β-1,3葡聚糖酶活性檢測試劑盒 微量法

產品名稱: β-1,3葡聚糖酶(β-1,3-GA)活性檢測試劑盒  微量法

產品英文名:  Micro β-1,3-glucanase （β-1,3-GA）Assay Kit

產品貨號：BC0365     產地：北京市通州區馬駒橋聯東U谷8三樓

產品規格：100管/48樣        產品商標：solarbio
保存與運輸：4℃保存或-20℃保存；            參考價格：1400
庫存狀態：現貨                          
關鍵字: 葡聚糖酶檢測試劑盒|β-1,3-GA檢測試劑盒|葡聚糖酶|試劑盒

簡要介紹：
β-1,3-GA( EC 3.2.1.73)主要存在植物中，催化β-1,3-葡萄糖苷鍵水解。在植物染病或處于其他逆境條件下，可誘導細胞大量合成β-1,3-GA，因此β-1,3-GA 活性測定廣泛應用于植物病理和逆境生理研究。
β-1,3-GA 水解昆布多糖，內切β-1,3-葡萄糖苷鍵，產生還原末端，通過測定還原糖生成速率，來計算其酶活性。


產品詳細描述
產品內容：
提取液：液體100mL×1瓶，4℃保存；
試劑一：粉劑×1瓶，4℃保存；臨用前每瓶加入3.5mL雙蒸水，充分溶解待用；
    試劑二：液體30mL×1瓶，4℃保存；
    標準品：粉劑×1支，4℃保存，含10mg無水葡萄糖（干燥失重<0.2%），臨用前加入1ml蒸餾水溶解，配制成10mg/ml葡萄糖溶液備用，4℃可保存1周，或者用飽和苯甲酸溶液溶解，可保存更長時間。
標準品準備：將標準品用蒸餾水稀釋1、0.8、0.6、0.4、0.2mg/ml。
產品說明：
β-1,3-GA( EC 3.2.1.73)主要存在植物中，催化β-1,3-葡萄糖苷鍵水解。在植物染病或處于其他逆境條件下，可誘導細胞大量合成β-1,3-GA，因此β-1,3-GA 活性測定廣泛應用于植物病理和逆境生理研究。
β-1,3-GA 水解昆布多糖，內切β-1,3-葡萄糖苷鍵，產生還原末端，通過測定還原糖生成速率，來計算其酶活性。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、水浴鍋、移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

操作步驟：
一、粗酶液提取：
稱取約0.2g組織，剪碎，放入預冷的研缽中，加入1.0 mL提取液進行冰浴勻漿，12000g，4℃，離心10min，取上清，置冰上待測。
二、測定步驟：

1. 分光光度計預熱30min 以上，調節波長540nm，蒸餾水調零。
2. 樣本測定（在1.5mL EP 管中依次加入下列試劑）：

充分混勻，沸水浴5min（蓋緊，防止水分散失），流水冷卻，540nm 處記錄各管吸光值A，
如果吸光值大于2，可以用提取液對樣本稀釋后測定（計算公式乘以相應稀釋倍數），ΔA=A 測定-A對照。每個測定管需設一個對照管。
三、β-1,3-GA 活性計算：
根據標準管吸光度x（A標準管-A空白管）和濃度（y，mg/mL）建立標準曲線，將ΔA帶入公式中計算出樣品中產生的還原糖的含量y值（mg/mL）

1. 按蛋白濃度計算

單位的定義：每mg 組織蛋白每小時產生1mg 還原糖定義為一個酶活性單位。
β-1,3-GA(U/mg prot)=(y×V1)÷(V1×Cpr)=y ÷Cpr

2. 按樣本鮮重計算

單位的定義：每g 組織每小時產生1mg 還原糖定義為一個酶活性單位。
β-1,3-GA(U/g 鮮重)=(y×V1)÷(W×V1÷V2)=y ÷W
(3) 按細菌或細胞數量計算
單位的定義：每1萬個細胞或細菌每小時產生1mg 還原糖定義為一個酶活性單位。
β-1,3-GA(U/10⁴ cell)=( y×V1)÷(500×V1÷V2)=0.002×y
V1：加入反應體系中樣本體積，0.1mL；V2：加入提取液體積，1mL；Cpr：樣本蛋白質濃度，mg/mL；W：樣本鮮重，g；500：細菌或細胞總數，萬。
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《The antifungal activity of a thaumatin-like protein from oyster Crassostrea gigas》 作者:X Niu,Q Xu,W Wang,Z Yu,Z Liu,C Qu,Y Liu,C Gong,L Wang,L Song 期刊:Invertebrate Survival Journal 影響因子:0.967 PMID:






 

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