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BC3710-全蛋白提取試劑盒(強(qiáng))
  • BC3710-全蛋白提取試劑盒(強(qiáng))
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貨物所在地:北京北京市

地: 北京

更新時(shí)間:2025-01-13 21:00:07

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全蛋白提取試劑盒(強(qiáng))用于哺乳動(dòng)物組織和細(xì)胞中提取總蛋白,試劑盒中的裂解液含有蛋白酶抑制劑和磷酸酶抑制劑,作用較為強(qiáng)烈,可快速獲得總蛋白,可用于免疫印跡實(shí)驗(yàn)等基礎(chǔ)研究實(shí)驗(yàn),由于含有上述的酶抑制劑,不能用于研究蛋白激酶和磷酸激酶的研究。本品僅用于科研。全蛋白提取試劑盒(強(qiáng))由索萊寶提供。

     全蛋白提取試劑盒(強(qiáng))用于哺乳動(dòng)物組織和細(xì)胞中提取總蛋白,試劑盒中的裂解液含有蛋白酶抑制劑和磷酸酶抑制劑,作用較為強(qiáng)烈,可快速獲得總蛋白,可用于免疫印跡實(shí)驗(yàn)等基礎(chǔ)研究實(shí)驗(yàn),由于含有上述的酶抑制劑,不能用于研究蛋白激酶和磷酸激酶的研究。本品僅用于科研。

產(chǎn)品組成:

 

 

規(guī)格

儲(chǔ)存條件

裂解液(強(qiáng))

100 ml

2-8 oC

磷酸酶抑制劑(100x)

1ml

-20 oC

蛋白酶抑制劑(100x)

1 ml

PMSF(100x)

1ml


操作方法:
1、組織總蛋白的提取
在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑和PMSF;混勻,放置在冰上備用;稱取0.1g的新鮮組織,放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處,用眼科剪將組織塊盡可能的剪碎,然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液,研磨直沒有明顯的組織塊,這個(gè)過程注意冰上操作;將組織勻漿液移入1.5ml的EP管中,4 oC 12000g離心30min;
吸取上清新的管中;
進(jìn)行蛋白定量或者變性進(jìn)行蛋白實(shí)驗(yàn)。
(提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復(fù)凍融,避免長(zhǎng)時(shí)間儲(chǔ)存。)
2、細(xì)胞總蛋白的提取
裂解液的用量:107個(gè)細(xì)胞需要裂解液1ml;
貼壁細(xì)胞:棄去培養(yǎng)基,用冷的PBS洗兩次,棄去PBS,然后加入計(jì)算好的細(xì)胞裂解液;在冰上用細(xì)胞刮刀進(jìn)行刮離細(xì)胞,
將刮離的細(xì)胞裂解液移入EP管中,顛倒裂解20-30min
懸浮細(xì)胞:4 oC 400g離心收集細(xì)胞,用冷的PBS洗兩次細(xì)胞,同樣按細(xì)胞數(shù)加入裂解液,
渦旋10s,放置冰上裂解10min,重復(fù)3-4次;
裂解完畢之后,將細(xì)胞裂解液4 oC 12000g離心30min;
將上清移入新的EP管中;
進(jìn)行蛋白定量或者變性進(jìn)行蛋白實(shí)驗(yàn)。
(提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復(fù)凍融,避免長(zhǎng)時(shí)間儲(chǔ)存。)

注意事項(xiàng):
實(shí)驗(yàn)過程,所有試劑都要需要預(yù)冷或者即融,保證操作過程中的低溫環(huán)境;
PSMF(有毒)現(xiàn)用現(xiàn)加,因?yàn)镻MSF在水溶液中會(huì)快速降解;

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