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蛋白質提取試劑RIPA組織/細胞裂解液
貨號 :R0020
規格 :100ml
本產品配有一支 PMSF(100mM,1.5ml)
保存 :RIPA 裂解液 4℃保存,PMSF -20℃保存。
產品簡介 :
RIPA 組織/細胞裂解液是利用表面活性劑等來裂解細胞膜(包括核膜) 。本試劑提取的蛋白為可溶性總蛋白。
使用說明 :
如發現 RIPA 有沉淀,請放室溫半小時或者常溫水浴使沉淀溶解。
根據使用量, 取每 1ml RIPA 加入 10ul PMSF, 使 PMSF 的終濃度為 1mM, 混勻備用 (PMSF 現用現加) 。
1、樣品前處理:
a)對于貼壁細胞:去除培養液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養液洗一遍。按照 6 孔板每孔細胞量加入150-250 ul 裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數下,使裂解液和細胞充分接觸。
b)對于懸浮細胞:離心收集細胞,按照 6 孔板每孔細胞量加入 150-250ul 裂解液的比例加入裂解液,用手指輕彈懸浮細胞以充分裂解。充分裂解后應沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多,必需分裝成 5-10×10 5 細胞/管,然后再裂解。
c)對于組織樣品:把組織剪切成細小的碎片。按照每 20mg 組織加入 150-250ul 裂解液的比例加入裂解液(如果裂解不充分可以適當添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當減少裂解液的用量) 。用玻璃勻漿器勻漿,直充分裂解。
2、后處理:
將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘, 取上清, 即可進行后續的蛋白濃度測定、 SDS-PAGE、 Western blotting 和免疫沉淀等操作。
注意事項 :
1、 使用本裂解液可以裂解細胞核,釋放出核蛋白的同時,也會將基因組一并釋放出來,造成細胞裂解液粘稠,此時可以直接加入蛋白上樣緩沖液煮沸再離心,離心后直接上樣電泳;若想測定濃度,可入加少量 SDS(1%) ,煮沸后離心測濃度。
2、 本系列蛋白提取試劑所提取的蛋白由于含有去污劑,所以不適合使用 Bradford 蛋白濃度測定試劑盒,請選擇 BCA 法或者 Lowry 法檢測蛋白濃度。
3、 如果需要檢測和基因組結合特別緊密的蛋白,則可以通過超聲處理打碎打散粘稠狀物,隨后離心取上清用于后續實驗。
相關產品 :
P1020 1×PBS , PH7.2-7.4 , 0.01M
R0010 高效 RIPA 組織細胞裂解惉
R0030 非變性組織細胞裂解惉
P1010 4× 蛋白上悪緩沖惉(含 β- 巰基乙醇)
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PC0030 Lowry 法蛋白濃度測定試劑盒
P1300 SDS-PAGE 凝膠制備試劑盒
蛋白質提取試劑RIPA組織/細胞裂解液訂購說明:
1、絕大部分產品備有現貨,一般情況下都能訂貨當日發貨。
2、部分非常用產品,需提前1-2日預訂,海外期貨則需要提前3-6周預訂。
3、部分產品價格會因貨期、批次等因素發生變化,若有變動以訂貨當日新價格為準。
4、每日訂單截止時間為16點整,部分城市可到17點整,因超過截止時間造成當日不能發貨的將于次日安排發貨。
5、請辦理完貨款后,將收據、底單等連同收貨人的地址、姓名、等以傳真、、短信、等形式通知我們。
蛋白質提取試劑RIPA組織/細胞裂解液運輸說明:
1、極低溫產品:極低溫產品運輸過程中加裝干冰運輸。用干冰把產品包裹起來,再用泡沫盒密封,膠帶層層粘住泡沫盒,放入索萊寶的箱子,然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送客戶的手中,保證產品的性質穩定如一,為您的實驗保駕護航。
2、低溫產品:低溫產品運輸過程中加裝索萊寶冰袋運輸。事先用冰袋把產品包裹起來,再使用泡沫盒密封,用膠帶嚴實密封泡沫盒,再放入索萊寶的箱子(保溫效果少可以持續一周),然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送客戶的手中,保證產品的性質穩定如一,為您的實驗保駕護航。
3、常溫產品:常溫產品運輸過程中無需加冰或者特殊包裝。產品由公司庫房人員快速配貨,準確快速高效的快遞保證產品快速送達您的手中。