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小鼠HYDELISA檢測試劑盒使用說明書

閱讀:1648      發布時間:2012-5-29
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小鼠 HYD ELISA檢測試劑盒使用說明書

試驗原理:
HYD試劑盒是固相夾心法酶聯免疫吸附實驗(ELISA).已知HYD濃度的標準品、未知濃度的樣品 加入微孔酶標板內進行檢測。先將HYD和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌,去除未結合的酶結合物,然后加入底物A、B,和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中HYD的濃度呈比例關系。

內容及其配制:
試劑盒成份 96孔配置 48孔配置
96/48人份酶標板 1塊板(96T) 半塊板(48T)
塑料膜板蓋 1塊 半塊
標準品:240ng/ml 1瓶(1.0ml) 1瓶(0.5ml)
空白對照 1瓶(1.0ml) 1瓶(0.5ml)
標準品稀釋緩沖液 1瓶(8.0ml) 1瓶(4.0ml)
生物素標記的抗HYD抗體 1瓶(8.0ml) 1瓶(4.0ml)
親和鏈酶素-HRP 1瓶(12ml) 1瓶(5ml)
洗滌緩沖液 1瓶(20ml) 1瓶(10ml)
底物A 1瓶(6.0ml) 1瓶(3.0ml)
底物B 1瓶(6.0ml) 1瓶(3.0ml)
終止液 1瓶(6.0ml) 1瓶(3.0ml)

自備材料:
1. 蒸餾水。
2. 加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
3. 振蕩器及磁力攪拌器等。
4.

樣品收集、處理及保存方法:

1、 血清……操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原
和內毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血紅

細胞迅速小心地分離。
2、 血漿……EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3、 細胞上清液……1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4、 組織勻漿……將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液。
5、 保存……如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

操作注意事項:

● 試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
● 實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
● 不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
● 使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
● 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
● 底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
● 加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
● 按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。


安全性:

1. 避免直接接觸終止液和底物A、B,一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
2. 實難中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

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