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非洲豬瘟PCR儀的這些知識值得我們學習

閱讀:1110      發布時間:2023-4-17
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  非洲豬瘟PCR儀(African Swine Fever PCR Analyzer)是一種集DNA特異性擴增與檢測于一體的實驗室分析設備。利用引物擴增技術來檢測因非洲豬瘟病毒產生的目標DNA片段。在使用時,需要注意如何選擇合適的引物以及正確的操作流程和步驟。該儀器可用于從血樣、組織、糞便、尿液等多種來源中檢測非洲豬瘟病毒的存在,且其檢測結果具有快速、準確、靈敏等特點。屬于利用聚合酶鏈式反應(Polymerase Chain Reaction,PCR)技術來檢測目標序列的檢測儀器之一。將待檢測的DNA樣本與引物、縮合酶及核酸酶自由水混合放入試管內,并通過恒定溫度四次循環擴增。其中每個循環包括模板退火、引物連接、DNA聚合和擴展階段。所需的引物為兩種,即左、右引物,二者體積成一比例計算加入;縮合酶與核酸酶是配位縮合酶及回轉酶。配位縮合酶作用于引物5'-端的縮合反應,解鎖并啟動雙鏈DNA擴增的階段(即退火和連接)。而回轉酶能夠解旋雙鏈、釋放目標序列并啟動DNA合成。
 
  實際應用中,非洲豬瘟PCR儀的檢測過程可以分為三個主要部分,即樣品制備、擴增反應和結果分析。在樣品制備階段,需要從目標組織、血液等樣本中提取出目標DNA;而擴增反應階段則需要將上述提取到的DNA進行聚合酶鏈式反應,并通過PCR技術擴增出目標片段;在結果分析階段,則可通過熒光信號檢測系統檢測PCR反應產物的熒光強度值,以識別是否存在非洲豬瘟病毒(ASFV)。
 
  在具體的操作過程中,操作人員需要按照非洲豬瘟PCR儀操作步驟進行相應的設定,包括樣品裝載、數據輸入及儀器開機等幾個主要流程。此外,在使用基于PCR技術的檢測工具時,還需要注意如何選擇引物合適的生化特性、協同作用、PE(polyethylene)交聯改變溫度敏感性、HDA (Hyper-dimensional Amplification)雜交寡核苷酸光敏化等多個操作因素。這些因素的掌握,不僅會影響檢測效率、準確性和方便性,還會直接影響食品安全標準。

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