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　　程序降溫盒的使用方法直都搞不明白，覺得是不是應(yīng)該把程序降溫凍存盒先從-80度移到室溫放一段時(shí)間(細(xì)胞剛開始還沒凍的時(shí)候就是室溫)，然后把細(xì)胞放進(jìn)去，再一起移到-80度，這樣才能實(shí)現(xiàn)程序降溫呢? 時(shí)間使用長了，感覺里面的液體是不是異丙醇啊，使用時(shí)間長了會(huì)不會(huì)揮發(fā)或變質(zhì)什么的，要不要添加或維護(hù)一下呢，還有有一只降溫盒因不小心給傾斜讓液體流出了部分，要補(bǔ)充嗎？

　　程序降溫盒使用經(jīng)驗(yàn)分析：

　　經(jīng)驗(yàn)1：凍存盒外表面有刻度的吧，異丙醇液面要高于底線。4a.C*D8Y&P9A，y凍存盒肯定是先放在室溫，然后放進(jìn)去細(xì)胞，置于-80，利用異丙醇實(shí)現(xiàn)梯度降溫啊。）根據(jù)論壇里的討論，異丙醇使用過一段時(shí)間后是要更換的，但是我一直沒換過，也沒發(fā)現(xiàn)很大問題。

　　經(jīng)驗(yàn)2：我們實(shí)驗(yàn)室凍存盒平時(shí)放4度，需要凍細(xì)胞時(shí)直接拿出來用就可以了。第二天轉(zhuǎn)移至液氮，貴重的細(xì)胞盡快轉(zhuǎn)移，不然會(huì)影響復(fù)蘇成活率的。一般是用5次就更換一下異丙醇。現(xiàn)在也有一些商品化凍存液可以直接丟進(jìn)-80的，很方便，效果也不錯(cuò)的。經(jīng)驗(yàn)3：異丙醇的量是要保證的，不能低于表明的線，否則不能起到很好的程序性降溫作用，我們是在4度放置，放了細(xì)胞后立馬放到-80度冰箱，第二天再轉(zhuǎn)移到液氮，效果很不錯(cuò)。異丙醇熔點(diǎn)：-87.9度的色透明具有乙醇?xì)馕兜目扇夹杂卸疽后w。注意了有可燃性！急性毒性：口服-大鼠LD50：5840毫克/公斤；口服-小鼠LC50：3600毫克/公斤。刺激數(shù)據(jù)：眼睛-兔子100毫克/！請(qǐng)注意清理！

　　經(jīng)驗(yàn)4：應(yīng)該不可以把凍存盒放4°的，因?yàn)樘荻冉禍氐钠鹗键c(diǎn)是室溫20°左右，所以從-80℃拿出來的凍存盒應(yīng)該現(xiàn)在室溫靜置一段時(shí)間待其恢復(fù)到室溫再使用。而其中的異丙醇應(yīng)使用6~7此后更換一次，而且保證液體量達(dá)到刻度線，否則降溫效果會(huì)受到影響。