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蛋白質測定儀操作方法粗談
蛋白質測定儀操作方法粗談
蛋白質測定儀是用于測定糧食、食品、乳制品、飲料、飼料、土壤、水等物質中氮或者蛋白質含量的儀器，因為所測出的物質不僅含有蛋白質，同時還含有游離氨基酸、嘌呤、吡啶、尿素、硝酸鹽和氨等物質，因此該儀器又被稱為粗蛋白測定儀。
蛋白質測定儀包括兩個裝置：消化爐和蒸餾裝置，分別用來消化樣品以及蒸餾和滴定。浙江托普生產的蛋白質測定儀的消化爐有多種孔數選擇，如4孔、8孔、12孔和20孔，根據消化爐不同孔數，我們可以將定氮儀分為不同的型號。如KDN-04A、KDN-08C等。下面我們具體介紹下蛋白質測定儀在測定蛋白質含量時的操作步驟。
消化：稱取經粉碎的樣品0.5克（視含氮量而定），放入已洗滌烘干的消化管中，加催化劑5克左右和10ml左右硫酸（如果是固體樣品，在加濃硫酸前先加3ml左右的蒸餾水以濕潤樣品，以防止濃硫酸遇到強堿發生劇烈反應）。將消化管放入消化架的各個孔內，然后置于消化爐上，然后開啟抽氣三通上自來水，使抽氣三通處于吸氣狀態，接通電源開始消煮。消化管有不同的孔數區別，你可以按照樣品數的多少來選擇。每兩個消化爐孔共用一個進出水開關。
蒸餾：（1）打開電源，儀器自動進入加水狀態，待加水工作完成后會自動停止。（2）在左邊托盤放上空的消化管，右邊放上空的三角瓶，打開水開關。為排空管路內空氣，實驗前請先按下加酸鍵，待液體流順暢后停止加酸；加堿同樣操作。按下蒸餾鍵，儀器開始進入蒸餾狀態，待蒸氣自動從噴射管中噴出并穩定后，關閉開關。在左邊托盤放上已消化冷卻好的樣品，右邊托盤放上250ml三角瓶，并使管口碰到杯底。再打開電源，依次按加酸、加堿、蒸餾鍵對樣品進行蒸餾（加酸、加堿量設定自行）。蒸餾完畢后，將三角瓶下移，使接收管離開液面，用水沖洗出氣口，繼續蒸餾半分鐘后，取下三角瓶待滴定用。第二個樣品同上方法。（3）關開關，關水，取下消化管，打開側面排水夾子，把連堿泵的膠管放入蒸餾水容器內，打開電源開關用手按加堿按鍵抽蒸餾水清洗堿泵，酸泵同樣清洗，zui后關電結束。
滴定：用0.1 NHCL滴定接收瓶內的溶液，滴定至粉紅色時為止，記下消耗HCL的毫升數，按下列式子計算蛋白含量：
蛋白質%＝
式中：X—樣品中蛋白質的含量，%
V1—樣品消耗硫酸或鹽酸標準液的體積，ml；
V2—試劑空白消耗硫酸或鹽酸標準液的體積，ml；
N—硫酸或鹽酸標準溶液當量濃度；
0.014—1N硫酸或鹽酸標準溶液1ml相當于氮克數；
m—樣品的質量（體積），g（ml）；
F—蛋白質系數，按16%計算乘以6.25即為蛋白質。
（空白測定：用0.1克糖代替樣品或不加樣品作空白測定）