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想要選擇合適的液相色譜柱就看看這些吧

閱讀:2538      發(fā)布時間:2020-8-12
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  現(xiàn)代高效液相色譜分析中,液相色譜柱的選擇直接影響了分離效果的好壞,選擇合適的色譜柱可以縮短方法開發(fā)所需的時間,并且使方法更具穩(wěn)定性。但是現(xiàn)在市場上色譜柱種類繁多,不同類型的色譜柱分離對象不同,因此,要做合適的選擇,可以看看以下內(nèi)容。
 
  柱長及內(nèi)徑的選擇
 
  長度的選擇:柱越長,總柱效越高(n值越大),柱越長,分析時間也越長。250—300mm是普遍的柱長,實驗室一半以上的工作都是采用此規(guī)格柱子,一般用來分離l0到50個組份的中等至復雜混合物;500—600mm,要求較高分辨率的應用,—般用來分離大于50個組份或包含有難分離物質(zhì)的復雜樣品程序升溫分析。
 
  內(nèi)徑:柱效率與柱半徑平方成反比,內(nèi)徑越小柱效越高,但內(nèi)徑越大,柱容量也增加,允許進樣量就越多。當進樣量超過柱容量時,則因柱內(nèi)每塊理論板內(nèi)不能建立真正的平衡,將會導致色譜蜂畸變,柱分辨率降低,重現(xiàn)性不好。
 
  因此對于復雜樣品需要分離,必須使用小內(nèi)徑柱子。另一方面若樣品中存在具有很不相同濃度組份化合物,為了增加樣品容量就必須使用內(nèi)徑大的柱子,目前實驗室使用常見的柱子內(nèi)徑一般是4.6mm。
 
  一般選擇原則:分析大分子量化合物選擇大孔徑色譜柱;對于高pH值或者堿性化合物需要選擇高封端或者特殊封端的色譜柱,以改善峰形,延長色譜柱使用壽命等。
 
  現(xiàn)在商品化的液相色譜柱琳瑯滿目,根據(jù)色譜柱的參數(shù)可以給我們提供一個初步的選擇,但由于各個儀器廠商的填料技術和鍵合技術都有差異,即使都是C18柱,同一品牌不同系列都有不同的功能,有能耐受低pH值的、有耐高溫的、有適合堿性樣品的等等。所以在選擇色譜柱前要好好研究色譜柱參數(shù),仔細閱讀色譜柱說明書,才能找到合適的色譜柱和適宜的分離方法

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