現(xiàn)代高效液相色譜分析中，液相色譜柱的選擇直接影響了分離效果的好壞，選擇合適的色譜柱可以縮短方法開發(fā)所需的時間，并且使方法更具穩(wěn)定性。但是現(xiàn)在市場上色譜柱種類繁多，不同類型的色譜柱分離對象不同，因此，要做合適的選擇，可以看看以下內(nèi)容。
柱長及內(nèi)徑的選擇
長度的選擇：柱越長，總柱效越高(n值越大)，柱越長，分析時間也越長。250—300mm是普遍的柱長，實驗室一半以上的工作都是采用此規(guī)格柱子，一般用來分離l0到50個組份的中等至復雜混合物;500—600mm，要求較高分辨率的應用，—般用來分離大于50個組份或包含有難分離物質(zhì)的復雜樣品程序升溫分析。
內(nèi)徑：柱效率與柱半徑平方成反比，內(nèi)徑越小柱效越高，但內(nèi)徑越大，柱容量也增加，允許進樣量就越多。當進樣量超過柱容量時，則因柱內(nèi)每塊理論板內(nèi)不能建立真正的平衡，將會導致色譜蜂畸變，柱分辨率降低，重現(xiàn)性不好。
因此對于復雜樣品需要分離，必須使用小內(nèi)徑柱子。另一方面若樣品中存在具有很不相同濃度組份化合物，為了增加樣品容量就必須使用內(nèi)徑大的柱子，目前實驗室使用常見的柱子內(nèi)徑一般是4.6mm。
一般選擇原則：分析大分子量化合物選擇大孔徑色譜柱;對于高pH值或者堿性化合物需要選擇高封端或者特殊封端的色譜柱，以改善峰形，延長色譜柱使用壽命等。
現(xiàn)在商品化的液相色譜柱琳瑯滿目，根據(jù)色譜柱的參數(shù)可以給我們提供一個初步的選擇，但由于各個儀器廠商的填料技術和鍵合技術都有差異，即使都是C18柱，同一品牌不同系列都有不同的功能，有能耐受低pH值的、有耐高溫的、有適合堿性樣品的等等。所以在選擇色譜柱前要好好研究色譜柱參數(shù)，仔細閱讀色譜柱說明書，才能找到合適的色譜柱和適宜的分離方法
14
立即詢價
您提交后，專屬客服將第一時間為您服務