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大家都知道，在細胞凋亡的早期，線粒體膜電位的下降是一個標志性的事件。而對于線粒體膜電位的檢測，JC-1這種親脂性陽離子染料是個很好的工具，也使用了很多年。生物通 www.ebiotrade。。ｃｏｍ 
當線粒體膜電位較高時，JC-1聚集在線粒體的基質中，形成聚合物，產生紅色熒光；而當線粒體膜電位較低時，JC-1不能聚集在線粒體的基質中，此時JC-1為單體，產生綠色熒光。這樣就可以很方便地通過熒光顏色的轉變來檢測線粒體膜電位的變化。人們常用紅綠熒光的相對比例來衡量線粒體膜去極化的程度。
對于傳統的JC-1檢測，在使用帶有單個488 nm（藍色）激光器的流式細胞儀進行分析時，JC-1單體和JC-1聚合物這兩個檢測通道需要熒光補償。在今年4月發表于《Current Protocols in Cytometry》的一篇文章中，意大利摩德納大學的Sara De Biasi等人對此方法進行了改進。他們使用的是賽默飛世爾的Attune? NxT聲波聚焦流式細胞儀。生物通 www.ebiotrade。。ｃｏｍ 
這種儀器采用模塊化設計，配有紅、黃、藍、紫四個激光器。作者認為，多激光器的使用能zui大限度減少熒光補償的需要，從而有助于實現更輕松、更的檢測。同時，多激光器的激發也讓作者能夠檢測其他的凋亡標志物，如PS外翻和活性氧簇的形成。
在這項研究中，De Biasi及其同事使用兩個激光器來檢測JC-1：藍色（488 nm）激光器來激發JC-1的單體，而黃色（561 nm）激光器來激發JC-1聚合物。他們利用纈氨霉素（valinomycin）處理U937細胞后，開展JC-1染色。在使用單色激光激發時，不使用補償就無法輕松分開JC-1的單體和聚合物；不過，在使用雙色激光激發時，就不需要熒光補償。生物通 www.ebiotrade。。ｃｏｍ 
在同時檢測多個凋亡標志物時，作者利用兩種額外的探針：Pacific Blue? annexin V檢測磷脂酰絲氨酸的暴露（紫色激光），而CellROX? Deep Red試劑檢測活性氧簇（紅色激光）。同時使用Attune? NxT流式細胞儀上的四個激光器，作者證明了三種凋亡標志物的檢測。他們認為，這些方案適用于凋亡的多參數檢測。