首頁 >> 供求商機
上海索萊寶生物科技有限公司
專業生化試劑供應商，專業分子生物學試劑生產商
T4 DNA Ligase
T4噬菌體DNA連接酶
說明：T4噬菌體DNA連接酶主要催化兩條DNA鏈上相鄰的5’磷
酸基和3’-羥基之間形成磷酸二酯鍵。它的主要用途是連接
帶匹配粘端的DNA分子，或使平端的雙鏈DNA分子互相連接
或與合成接頭相連接。也可催化DNA與RNA之間以及少數
RNA之間的連接，但不能催化單鏈DNA之間的連接。
單位定義：0.01Weiss單位的T4 DNA連接酶可以在16℃下反應
20分鐘，連接95％的1μgλDNA-HindⅢ的分解物。
注意：一個Weiss單位的T4 DNA連接酶相當于核酸外切酶測定
中的0.2單位或60個粘性末端（New England Biolabs）
存儲緩沖液：10mM Tris-HCl（pH7.5 25℃）,50mM KCl，
1mM DTT，0.1mM EDTA和50％glycerol。
10×反應緩沖液：300mM Tris-HCl（pH7.8 25℃）,
100mM MgCl2，100mM DTT，10mM ATP
質量控制：
1 活性：大于3Weiss單位/微升。
2 藍白克隆鑒定：12Weiss單位T4 DNA連接酶與3μg經內
切酶酶切產生的5’或3’粘性末端DNA在4℃下，反應16
小時后轉化到大腸桿菌JM109培養，白色菌落小于總菌落
數的2％；12 Weiss單位T4 DNA連接酶與3μg經內切酶酶
切產生的鈍性末端DNA在4℃下，反應16小時后轉化到大
腸桿菌JM109培養，白色菌落小于總菌落數的5％。
3 核酸內切酶測定：20Weiss單位酶與1μg超螺旋質粒
DNA在37℃下反應16小時，DNA的電泳圖譜不發生變化。
4 單鏈和雙鏈DNase測定：20Weiss單位酶與50ng同位素
標記的單鏈或雙鏈DNA反應16小時，單鏈DNA的釋放量
小于2％；雙鏈DNA的釋放量小于1％。
5 RNase測定：37℃時，20Weiss單位酶與50ng 3H-RNA
保溫5小時，釋放量小于1％。
6 蛋白純度：SDS PAGE 檢測純度≥90％。
儲存條件：−20℃
From Promega M1801S
17