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深圳市科潤(rùn)達(dá)生物工程有限公司
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HMGB1試劑盒
  • HMGB1試劑盒
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更新時(shí)間:2025-02-06 08:54:49

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HMGB1試劑盒可用于定量測(cè)定人血清和血漿中的HMGB1含量。此外,HMGB1試劑也可用于來(lái)自牛,豬,兔,小鼠和大鼠的血清,血漿和腦脊液(CSF)的研究。

HMGB1試劑盒(ELISA法)


通用名稱:人高遷移率族蛋白檢測(cè)試劑盒(ELISA法)
英文名稱:HMGB1 ELISA  
產(chǎn)品規(guī)格:96T
產(chǎn)品貨號(hào):ST51011
產(chǎn)品品牌:德國(guó)IBL

HMGB1試劑盒預(yù)期用途
HMGB1試劑盒可用于定量測(cè)定人血清和血漿中的HMGB1含量。此外,該試劑盒可用于來(lái)自牛,豬,兔,小鼠和大鼠的血清,血漿和腦脊液(CSF)的研究。也可以檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)基和BALF(支氣管肺泡液)。

前言簡(jiǎn)介

HMGB1是大約30kDa的蛋白質(zhì),是非組蛋白核蛋白組的主要成分。HMGB1(高遷移族Box1蛋白)是轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子,通常存在于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)中。

 

HMGB1在惡性疾病等疾病的發(fā)病機(jī)理中起重要作用。在腫瘤的情況下,細(xì)胞的氧供應(yīng)可以斷開。 這導(dǎo)致細(xì)胞死亡(壞死)和釋放HMGB1,進(jìn)而導(dǎo)致在相鄰腫瘤環(huán)境中形成朝向腫瘤的血管生成。這些血管確保腫瘤的存活和進(jìn)一步的生長(zhǎng)。

 

體外研究表明,通過(guò)定量測(cè)定HMGB1濃度,可以區(qū)分病理性細(xì)胞死亡(壞死)和生理細(xì)胞死亡(細(xì)胞凋亡)。在壞死中觀察到更高的HMGB1值。HMGB1在膿毒性休克后期也起重要作用。 結(jié)果表明,即使在膿毒性休克后期,HMGB1在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中的抑制顯著提高了嚙齒動(dòng)物的存活率。HMGB1通過(guò)與RAGE(“晚期糖基化終產(chǎn)物的受體”)結(jié)合起作用,具有與細(xì)胞因子TNF-α和IL-6相似的促炎作用。 膿毒癥患者血清中也可見高值。血液中的HMGB1濃度在許多其他疾病中也增加,包括類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA)急性肺損傷(ALI)和彌散性血管內(nèi)凝血(DIC)。HMGB1 ELISA由Ikuro Maruyama博士和Shino-Test Corporation(日本)開發(fā)。本產(chǎn)品由Shino-Test公司*的IBL制造。


HMGB1試劑盒檢測(cè)原理

HMGB1試劑盒是用于定量測(cè)定血清和血漿中HMGB1的夾心酶免疫測(cè)定。 微量滴定板孔用純化的抗HMGB1抗體包被。樣品中的HMGB1特異性結(jié)合固相的抗體,并被第二個(gè)酶標(biāo)記的抗體識(shí)別。底物反應(yīng)后,HMGB1濃度由顏色強(qiáng)度決定。


HMGB1試劑盒組成成分

數(shù)量標(biāo)簽組成
1 x 12 x 8MTP微孔板可拆卸,包被有抗HMGB1多克隆抗體
1 xENZCONJ  LYO酶標(biāo)記物  凍干粉含有與過(guò)氧化物酶結(jié)合的HMGB1,2 。
1 xCAL   LYO標(biāo)準(zhǔn)品 凍干粉含有豬HMGB1 ,稀釋見章節(jié)10.1
1 xCONTROL+   LYO陽(yáng)性質(zhì)控  凍干粉含有豬HMGB1 ,稀釋見章節(jié)10.1
1 x 20 mLDILBUF稀釋液即用型,含有:緩沖液,0.01 % NaN3.
1 x 12 mLENZCONJ DIL酶標(biāo)記物稀釋液即用型,含有:緩沖液
2 x 100 mLWASHBUF   CONC洗滌液  5X濃縮含有:磷酸鹽緩沖液,<0.5 %Tween 20.
1 x 6 mLCOLREA   A底物液A即用型。
1 x 6 mLCOLREA   B底物液B即用型
1 x 12 mLCOLOUR  STOP終止液即用型,含有:0.35M硫酸
2 xFOIL蓋板膜


所需材料(未提供)
1. 微量移液器(Multipette Eppendorf或類似設(shè)備,CV <3%)。 體積:10; 20; 100; 100-1000μL
2. 渦街?jǐn)嚢铏C(jī)
3. 軌道搖床(500 rpm)
4.  8通道微量移液器
5. 洗瓶,自動(dòng)或半自動(dòng)微量滴定板清洗系統(tǒng)
6. 能夠讀取450nm吸光度的酶標(biāo)儀(參考波長(zhǎng)600-650nm)
7. 雙蒸水或去離子水
8. 紙巾,吸頭和定時(shí)器
9. 聚苯乙烯(PS)或聚丙烯(PP)管用于標(biāo)準(zhǔn)和樣品稀釋
10. + 37°C和+ 25°C孵育箱
HMGB1試劑盒


儲(chǔ)存條件
HMGB1試劑盒在環(huán)境溫度下運(yùn)輸,儲(chǔ)存應(yīng)在2-8°C。 遠(yuǎn)離熱源或陽(yáng)光直射。 樣品和制備的試劑的儲(chǔ)存和穩(wěn)定性在相應(yīng)的章節(jié)中有描述。開封的微量滴定板條在試劑盒的有效期限內(nèi)保持穩(wěn)定,但應(yīng)在密封的袋子中儲(chǔ)存在2-8°C。

HMGB1試劑盒檢測(cè)步驟

1分別加入100ul稀釋液到相應(yīng)的板孔中。
2分別加入10ul稀釋液到板中的空白孔。
3分別加入10ul標(biāo)準(zhǔn)品,陽(yáng)性質(zhì)控及血清或血漿樣本到相應(yīng)的孔中,短暫搖動(dòng)30s。
4用蓋板膜蓋板,在+37℃溫育20-24h。
5移去蓋板膜,棄去溶液,用稀釋好的洗滌液400ul/孔洗滌板孔5次,用吸水紙拍干多余的液體。
6每孔加入100ul酶標(biāo)記物。
7蓋板膜蓋板,+25℃溫育2 h。
8移去蓋板膜,棄去溶液,用稀釋好的洗滌液400ul/孔洗滌板孔5次,用吸水紙拍干多余的液體。
9為了添加顯色液和終止液,如果有的話,可以使用8通道微量移液器。移液應(yīng)在底物液和終止液加液時(shí)的相同時(shí)間間隔內(nèi)進(jìn)行。使用正位移并避免形成氣泡
10每孔 加入100ul顯色液。
11室溫(18-25°C)孵育30min。
12每孔加入100ul終止液終止反應(yīng),將內(nèi)容物輕輕混合搖勻。
13清理板孔背面。 小心不要?jiǎng)潅蹇祝驗(yàn)檫@可能會(huì)干擾測(cè)量。
1460min內(nèi)在450nm(參考波長(zhǎng)600-650nm)處讀取吸光度值。


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