酶聯(lián)診斷試劑常用的兩大洗滌方式介紹
酶聯(lián)診斷試劑是酶免疫測(cè)定技術(shù)中應(yīng)用較廣的技術(shù)。其基本方法是將已知的抗原或抗體吸附在固相載體 ( 聚苯乙烯微量反應(yīng)板 ) 表面，使酶標(biāo)記的抗原抗體反應(yīng)在固相表面進(jìn)行，用洗滌法將液相中的游離成分洗除。常用的 ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn))法有雙抗體夾心法和間接法，前者用于檢測(cè)大分子抗原，后者用于測(cè)定特異抗體。
酶聯(lián)診斷試劑具有快速、敏感、簡(jiǎn)便、易于標(biāo)準(zhǔn)化等優(yōu)點(diǎn)，使其得到迅速的發(fā)展和廣泛應(yīng)用 。盡管早期的試劑盒由于特異性不夠高而妨礙了其在實(shí)際中應(yīng)用的步伐，但隨著方法的不斷改進(jìn)、材料的不斷更新，尤其是采用基因工程方法制備包被抗原，采用針對(duì)某一抗原表位的單克隆抗體進(jìn)行阻斷酶聯(lián)診斷試劑試驗(yàn)，都大大提高了酶聯(lián)診斷試劑的特異性，加之電腦化程度*的檢測(cè)儀的使用，使酶聯(lián)診斷試劑更為簡(jiǎn)便實(shí)用和標(biāo)準(zhǔn)化，從而使其成為廣泛應(yīng)用的檢測(cè)方法之一。
酶聯(lián)診斷試劑靠洗滌來達(dá)到分離游離的和結(jié)合的酶標(biāo)記物的目的。通過洗滌以清除殘留在板孔中沒能與固相抗原或抗體結(jié)合的物質(zhì)，以及在反應(yīng)過程中非特異性地吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。對(duì)于酶聯(lián)診斷試劑的洗滌主要有兩大方法，那今天酶聯(lián)診斷試劑廠家就給大家簡(jiǎn)單講解下哦。
一、浸泡式
1.吸干或甩干孔內(nèi)反應(yīng)液；
2.用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后，即甩去)；
3.浸泡，即將洗滌液注滿板孔，放置1-2分鐘，間歇搖動(dòng)，浸泡時(shí)間不可隨意縮短；
4.吸干孔內(nèi)液體，吸干應(yīng)*，可用水泵或真空泵抽吸，也可甩去液體后在清潔毛巾或吸水紙上拍干；
5.重復(fù)操作c和d，洗滌3-4次(或按說明規(guī)定)。在間接法中如本底較高，可增加酶聯(lián)診斷試劑洗滌次數(shù)或延長浸泡時(shí)間。
二、流水沖洗式
開始用于小珠載體的洗滌，洗滌液僅為蒸餾水甚至可用自來水。洗滌時(shí)附接一特殊裝置，使小珠在流水沖擊下不斷地滾動(dòng)淋洗，持續(xù)沖洗 2分鐘后，吸干液體，再用蒸餾水浸泡2分鐘，吸干即可。浸泡式猶如盆浴，流水沖洗式則好比淋浴，其洗滌效果更為*，且也簡(jiǎn)便、快速。已有實(shí)驗(yàn)表明，流水沖洗式同樣也適用于微量滴定板的洗滌。酶聯(lián)診斷試劑洗滌時(shí)設(shè)法加大水流量或加大水壓，讓水流沖擊板孔表面，洗滌效果更佳。
