影響ELISA試劑盒試驗成果的要素

時間：2020/3/24閱讀：930

ELISA試劑盒，即酶聯免疫法。ELISA法具有靈敏度高、特異性強、重復性好的特點，并具有操作簡潔、無放射性危害的優點，因此多年來廣泛應用于各高校、醫院、血站和科研機構的試驗室中。

影響ELISA試驗的要素有如下三方面：

一、試劑盒?
1、抗原、抗體活性對效價的影響：主要是試劑中抗體（或抗原）的效價下降或失活，成果不易判別。再有ELISA試劑盒靈敏度高，對雜質的反響靈敏度也高，試驗中空白對照OD值偏高或假陽性；

2、酶結合物濃度過高，也會導致OD值假性增高。

二、試驗儀器

1、加樣器是否通過校正，酶免測定血清用血量很少，如手工加樣器的功能不好，吸取樣品不，會使成果忽高忽低；

2、每次洗板前，應查看洗板機針孔有無阻塞。

三、ELISA試劑盒操作

1、檢測前先將試劑盒從冰箱取出置室溫平衡20min后運用，試劑用完及時放回冰箱冷藏，避免形成試驗成果假性下降；

2、加樣時留意勿觸及包被板底部，避免擦傷包被物使抗體（抗原）掉落而影響試驗成果的精確性；

3、洗刷不充分，會使成果假性增高，過分洗刷呈假陰性；

4、比色時應保持包被孔底部無異物、無水汽，特別是冬天板從37℃水浴箱取出時，底部留有水汽，應將板底擦干后進行比色，水汽或孔內氣泡也會使OD值升高；

5、抗原與抗體反響達到*平衡，依賴于溫度與時刻。溫度高于45℃易引起失活及符號物掉落，溫度低于4℃，影響反響速度。

總歸，由于ELISA試劑盒試驗的影響要素較多，在實踐工作中必須操作規范、仔細，避免和排除各種要素的影響，使之得到精確可靠的查驗成果。

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