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實驗室離心機(jī)都有哪幾種常用的離心分離法

閱讀:1313        發(fā)布時間:2022-10-24

實驗室離心機(jī)大家都知道主要是用于血液的分離、病毒的研究、DNA的研究、藥品的提純,對溶液中密度不同的粒子進(jìn)行分離,是放射免疫、生物化學(xué)、農(nóng)林科學(xué)等生產(chǎn)和科研單位的理想設(shè)備,但是我們實驗室離心機(jī)對于不同的樣品分離,離心分離法各不相同,適合的場合也盡不相同。那么常見的實驗室離心機(jī)離心分離法都有那幾種?


①差速離心法

差速離心法主要是采取逐漸提高離心速度的方法分離樣品中不同密度的結(jié)構(gòu),如線粒體、葉綠體、蛋白質(zhì)等!

第一步:設(shè)置起始的離心速度較低,先讓較大的顆粒沉降到管底,小的顆粒仍然懸浮在上清液中。

第二步:收集沉淀,改用較高的離心速度離心懸浮液,將較小的顆粒沉降,以此類推,達(dá)到分離不同大小顆粒的目的。





優(yōu)點:樣品的處理量較大,可用于大量樣品的初分離。

缺點:分離復(fù)雜樣品和要求分離純度較高時,離心次數(shù)多,操作繁雜,由于沉淀的多次清洗、溶解、再沉淀,容易引起中間損失,所以離心分辨力差。

②梯度離心法

密度梯度離心法是將樣品加在離心管中預(yù)先增加梯度介質(zhì)中進(jìn)行速度沉降或沉降平衡,在一定的離心力下把顆粒分配到梯度中某些特定位置上,形成不同區(qū)帶的分離方法。

密度梯度離心法常用的介質(zhì)為氯化銫,蔗糖和多聚蔗糖。





圖3

優(yōu)點:具有良好的分辨率,分離效果好;顆粒不會積壓變形,能保持顆粒活性,并防止已形成的區(qū)帶由于對流而引起混合;適應(yīng)范圍廣,即能分離具有沉降系數(shù)差的顆粒,又能分離有一定浮力密度的顆粒。

缺點:樣品濃度不能太高;達(dá)到平衡時間長。

③分析性超速離心法

分析性超離心法主要是為了研究生物大分子的沉降特性和結(jié)構(gòu),而不是專門收集某一特定組份。因此它使用了特殊的轉(zhuǎn)子和檢測手段,以便連續(xù)監(jiān)視物質(zhì)在一個離心場中的沉降過程。分析性超速離心機(jī)主要由一個橢圓形的轉(zhuǎn)子、一套真空系統(tǒng)和一套光學(xué)系統(tǒng)所組成。該轉(zhuǎn)子通過一個柔性的軸聯(lián)接成一個高速的驅(qū)動裝置,此軸可使轉(zhuǎn)子在旋轉(zhuǎn)時形成自己的軸。





圖4

優(yōu)點:加快液體中顆粒的沉降速度,把樣品中不同沉降系數(shù)和浮力密度的物質(zhì)分離開。

缺點:需要利用離心機(jī)產(chǎn)生強(qiáng)大的離心力,才能迫使這些微粒克服擴(kuò)散產(chǎn)生沉降運動。



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