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德國Applichem品牌RNaseA(a2760)

2015-3-17  閱讀(318)

西美杰*代理Applichem品牌RNaseAa2760

英文名稱:Ribonuclease A 

核糖核酸酶A(RNase A) 來源:牛胰腺。

分子量:13.7kD
CAS9001-99-4
外觀:類白色結晶或凍干粉
特性:類型:Type I-A          活性:70u/mg protein
鑒定:約70% as RNase A (SDS-PAGE)
制備不含DNaseRNase:將RNase A溶解在0.01M的醋酸鈉(pH5.2)中,使終濃度為10mg/ml,加熱到10015min,在室溫下緩慢冷卻。用0.1體積的1M Tris-cl調整PH  pH7.4后,分裝小管保存在-20備用,當濃縮的溶液在中性pH條件下加熱到100度時,核糖核酸酶產生沉淀。

活性:在25°CpH5.0條件下,活性被定義為一個單位的酶量導致RNA產生的水解速度常數,k = 1
儲存:-20

 

Applichem RNase A是一種被詳細研究和具有廣泛應用的核酸內切酶.RNase A 對RNA有水解作用,但對DNA則不起作用。RNase A在C端和U端殘基處專一地催化RNA的核糖部分3'-與5' -磷酸二酯鍵的裂開,形成具有 2',3'-環磷酸衍生物寡聚核苷酸。如 pG-pG-pC-pA-pG 被切割產生pG-pG-pCp 和 A-pG。可以用來去除DNA制品中的污染RNA。

 

主要用于生化研究,測定核酸的結構  · RNase 保護檢測  · 去除非特異結合的RNA  · 分析RNA 序列  · 水解蛋白樣品中的RNA  · 純化DNA  此外,它具有顯著的細胞毒性,可以殺滅許多腫瘤細胞系,可以抑制導致艾滋病的HIV-1病毒在細胞中的復制,可以治療乙肝。西美杰代理applichem  (1)從DNA-RNA或RNA—RNA雜合體中去除未雜合的RNA區。  (2)確定DNA或RNA中單堿基突變的位置(Myers et al.1985,Winter et al.1985)。 在此方法中,RNA-DNA或RNA-RNA雜合體上的單堿基錯配可被RNA酶A識別并切割。利用含SP5或T7噬菌體啟動子的質粒,在體外合成與野生型DNA或RNA互補的32p標記RNA探針,然后與待檢含單堿基置換的DNA或RNA退火, 所產生的單堿基錯配可用RNA酶A切割,通過凝膠電泳分析切割產物的大小即可確定錯配的位置。

西美杰*代理Applichem品牌RNaseAa2760) 咨詢全國:

 

文獻:

(1)  Ausubel, F.A., Brent, R., Kingston, R.E., Moore, D.D., Seidman, J.G., Smith, J.A. & Struhl, K. (eds.) (1995) Current Protocols in Molecular Biology. Page 3.13.1 Suppl. 8; Greene Publishing & Wiley-Interscience, New York
  (2)  Sambrook, J. & Russel, D.W. (2001) Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 3rd Edition Page A4.39. Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, New York.
  (3)  Melton, D.A. et al. (1984) Nucleic Acids Res. 12, 7035-7056
Efficient in vitro synthesis of biologically active RNA and RNA hybridization probes from plasmids containing the SP6 promoter.
  (4)  Winter, E. et al. (1985) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 82, 7575-7579
A method to detect and characterize point mutations in transcribed genes.



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