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ELISA試劑盒依據樣品中檢測物水平來選擇科研

時間:2017-11-2閱讀:1275
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ELISA試劑盒如果實驗君的實驗樣品為人、小鼠或大鼠樣品,那么要選擇一個適宜的試劑盒相對簡略,但如果您的實驗樣品來歷于其他物種如雞、牛、猴等,則市面上能供應的試劑盒種類卻很少。且不可輕信能供應近萬種試劑盒,覆蓋多物種的供貨商。但如果又非要檢測這些物種的方針時,要對待檢物(如有種屬差異性)進行同源性剖析以及試劑盒的種屬交叉反應數據。關于樣品類型而言,一般的商業化試劑盒都經過血清、血漿和細胞培養上清液的驗證。在選擇試劑盒時,要詳細閱讀說明書,比如血漿樣本抗凝劑的運用是否與試劑盒兼容。另外,在某些景象下樣品中會存在煩擾要素比如溶血血漿、高脂肪含量的樣品、人抗鼠抗體(HAMA)、細胞培養上清中含胎牛血清等。因而需根據樣品來選擇試劑盒,必要時還要根據樣本來恰當優化。或在樣品收集前,先閱讀一些可靠供貨商試劑盒的說明書或直接咨詢。如果您的樣品為組織或細胞裂解物,則需求更穩重的選擇試劑盒。市面上大多數的商業化試劑盒沒有經過多種來歷組織樣本的驗證。這需求實驗君能了解不是全部試劑盒所用的抗體對,都能特異的從一堆裂解物蛋白中特異檢出您的目的蛋白,還要考慮組織樣品的基質效應(Matrix Effect)等。但如果實驗君要了解組織樣品的制備問題,我們另起一文來總結。
ELISA試劑盒如果實驗君關于樣品中待檢物的水平沒有任何可參看的數據,選擇寬動力學檢測規劃的試劑盒。如果樣品中待檢物的含量很低,主張選擇高靈敏度的試劑盒。為了下降基質效應,有必要用稀釋液至少做2倍稀釋。如果樣品中待檢物含量遠超過試劑盒的檢測規劃(標曲規劃), 也需做恰當的倍數稀釋。在zui終計算結果時,需乘以相應的稀釋倍數。
一般來說,商業化試劑盒的樣品用量都在50ul或100ul, 但也有一些供貨商的試劑盒對樣品的用量要求可少至10ul。如果您的樣品很名貴或較難獲取,則需求細心考慮試劑盒對樣品用量的要求。如果樣品量少,且要做多因子檢測時更需穩重。
詳盡比較科研ELISA試劑盒要害性技術參數
ELISA試劑盒的要害技術參數包括板內差異性、板間差異性、批間差異性、重復性、特異性及交叉反應性、回收率等。如果實驗君常常打開ELISA實驗,主張運用同一廠家的試劑盒,這樣可盡量確保數據的重復性(當然條件是實驗條件的一致性)。關于科研用的定量ELISA試劑盒,不同的生產廠家運用的抗體對、酶以及底物、生產工藝和研發實力不盡相同,天然不同廠家試劑盒測出的數據會有差異。 

 

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