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中科院動物研究所分離出小鼠皮膚干細胞

時間:2009-8-7閱讀:3004
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來自中科院動物研究所的段恩奎等人從小鼠分離和鑒定了SKPs(皮膚干細胞),這一研究成果公布在Cell Proliferation 雜志上。

     SKPs表達Nestin、Fibronectin、Stat3和Oct4等干細胞標記分子。SKPs能在體外擴增并穩(wěn)定維持其干細胞特性,并能自發(fā)向神經細胞、平滑肌細胞和脂肪細胞分化。本研究在體外利用三步法誘導小鼠干細胞分化為三維胰島樣集落(IPCs)。在Stage 1中,SKPs以懸浮的細胞球傳代培養(yǎng)在DMEM/F12培養(yǎng)基(含有20 ng/ml表皮生長因子、40 ng/ml 堿性成纖維細胞生長因子、1% B27,培養(yǎng)基葡萄糖的濃度為17.3mM)。在Stage 2中,SKPs在DMEM/F12培養(yǎng)基(含有1 mM二丁酰環(huán)腺苷酸、1 μM維甲酸、1% B27 和2% FBS,培養(yǎng)基葡萄糖濃度為5mM)中培養(yǎng)2天,SKPs從細胞球中遷移出來形成單層細胞。在Stage 3中,細胞在DMEM/F12培養(yǎng)基(含有10 mM 煙酰胺、10 nM I型胰島素樣生長因子、2nM 激活素A、1% B27和2% FBS,培養(yǎng)基葡萄糖濃度為17.3mM)的中培養(yǎng)7天,細胞能夠形成二硫腙陽性(Dithizone positive, DTZ+)的三維胰島樣集落(IPCs)。RT-PCR和間接免疫熒光的結果表明,IPCs共表達胰島素和C-肽,并表達胰腺β細胞發(fā)育和功能相關的基因和轉錄因子,如Insulin 1、Insulin 2、Islet-1、Pdx-1、NeuroD/beta2、Glut-2 和 Nkx6.1,但不表達胰腺中其它的激素,如胰高血糖素、生長激素抑制素和淀粉酶。體外葡萄糖刺激的功能性實驗結果表明,IPCs受葡萄糖濃度刺激而分泌胰島素。

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