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被污染的細(xì)胞應(yīng)該如何去除
點(diǎn)擊次數(shù)：2071 發(fā)布時(shí)間：2018-10-22
培養(yǎng)細(xì)胞一經(jīng)污染，多數(shù)較難處理。在細(xì)胞培養(yǎng)中如果污染細(xì)胞價(jià)值不大，宜棄之；在尋找原因后*消毒操作室，復(fù)蘇或重新購(gòu)置細(xì)胞，再進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。
污染細(xì)胞價(jià)值較大，又難于重新得到，可采取以下辦法清除。
1、細(xì)菌和真菌的清除
抗生素對(duì)殺滅細(xì)菌較有效。聯(lián)合用藥比單獨(dú)用藥效果好。預(yù)防用藥比污染后再用藥效果好。
預(yù)防用藥一般用雙抗生素，污染后清除用藥需采用大于常用量5～10倍的沖洗法，于加藥后作用24～48小時(shí)，再換常規(guī)培養(yǎng)液。此法在污染早期有效。
2、支原體的清除
(1) 用MRA處理
用MRA（Mycoplasma Removal Agent）處理細(xì)胞，每4天換一次液,連續(xù)處理15天以確保細(xì)胞純潔健康，效果好。
(2) 用清洗純化法清除支原體污染的方法
細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)馴化→細(xì)胞群的篩選→細(xì)胞清洗→反復(fù)離心洗滌。
其原理是利用離心力、細(xì)胞、微生物質(zhì)量和懸液的浮力差達(dá)到清除支原體的目的。由于支原體個(gè)體小且除發(fā)酵支原體外多為細(xì)胞外寄生,所以通過(guò)反復(fù)洗滌細(xì)胞和低速離心換液使其中潛在的支原體數(shù)量降低限。
如結(jié)合敏感抗生素的抑殺作用，可達(dá)到更好的效果。
(3) 藥物輔助加溫處理
細(xì)胞培養(yǎng)先用藥物處理后，再將污染的組織培養(yǎng)物放在41℃培養(yǎng)18小時(shí)，可殺死支原體，但對(duì)細(xì)胞有不良影響。
(4) 使用支原體特異性血清
用5%的兔支原體免疫血清可去除支原體污染，因特異抗體可抑制支原體生長(zhǎng)，故經(jīng)抗血清處理后11天即轉(zhuǎn)為陰性，并且5個(gè)月后仍為陰性。
但此法比較麻煩，不如用抗生素方便、經(jīng)濟(jì)。