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西安東瑞科教實驗儀器有限公司

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液相色譜儀的使用方法

2017-4-13 閱讀(2865)

液相色譜儀的品牌、種類很多,各家的使用方法也不盡一樣,主要看你是那一款的液相色譜儀,當(dāng)初購買設(shè)備時,廠家的工程師會培訓(xùn)使用方法。液相色譜儀與結(jié)構(gòu)儀器的聯(lián)用是一個重要的發(fā)展方向。液相色譜-質(zhì)譜連用技術(shù)受到普遍重視,如分析氨基甲酸酯農(nóng)藥和多核芳烴等;液相色譜-紅外光譜連用也發(fā)展很快如在環(huán)境污染分析測定水中的烴類,海水中的不揮發(fā)烴類,使環(huán)境污染分析得到新的發(fā)展。液相色譜儀的使用方法:內(nèi)容:1 開機1.1 打開電腦。1.2 打開液相色譜各個模塊的電源。1.3 雙擊桌面“儀器—聯(lián)機",進入聯(lián)機界面。1.4 排氣:1.4.1 手動旋開泵處沖洗閥(逆時針旋轉(zhuǎn)約1圈)。1.4.2 右鍵單擊“泵"圖標(biāo)區(qū)域,選擇“方法?"選項,進入泵編輯畫面,設(shè)流速:5ml/min(一般為3-5ml/min),點擊“確定"。1.4.3 右鍵單擊“泵" 圖標(biāo),點擊“控制?"選項,選中“ON",點擊“確定",則系統(tǒng)開始沖洗,直到管線內(nèi)(由溶劑瓶到泵入口)無氣泡為止,(一般為5分鐘),切換通道繼續(xù)沖洗,直到所有要用通道無氣泡為止。1.4.4 右鍵單擊“泵" 圖標(biāo),點擊“方法?"選項,設(shè)流速:0ml/min,手動旋緊沖洗閥。1.4.5 右鍵單擊“泵"圖標(biāo),點擊“方法?"選項,按照方法要求選擇合適比例的流動相,設(shè)流速:1.0ml/min。1.4.6 同理右鍵單擊“柱溫箱",“檢測器"圖標(biāo),點擊“方法?"選項,按照方法的要求設(shè)置溫度,波長,點擊“控制" 選項,“ON"打開柱溫箱和檢測器。2 編輯方法2.1 點擊“方法"-“編輯完整方法"開始編輯完整方法。2.2 選中除“數(shù)據(jù)分析 "外的三項,進入下一選項卡。2.3 方法信息:在“方法注釋"中加入方法的信息(如:This is for test!)。進入下一選項卡。2.4 泵參數(shù)設(shè)定:在“流速"處輸入流量, 如1.0ml/min,停止時間:如10 min(該停止時間僅為做一個樣品需要的時間),按照要求選擇合適比例的流動相配比,如乙腈:水=75:25,A為水,B為乙腈,則設(shè)置B:75%即可。進入下一選項卡。2.5 自動進樣器參數(shù)設(shè)定: 選擇“洗針進樣"----可以輸入進樣體積和洗瓶位置,進入下一選項卡。2.6 柱溫箱參數(shù)設(shè)定: 在“溫度"下面的空白方框內(nèi)輸入所需溫度,如:40度。進入下一選項卡。2.7 UV檢測器參數(shù)設(shè)定: 在“波長"下方的空白處輸入所需的檢測波長,如254nm。點擊確定。2.8 在“ 運行時選項表 "中,選中“ 數(shù)據(jù)采集",點擊“確定"。2.9 從“方法"菜單,選中“方法另存為?",輸入一方法名,如“測試",點擊“確定。3 單次采集3.1 從“運行控制"菜單中,選擇“樣品信息"選項,選擇合適的路徑,在“數(shù)據(jù)文件"中選擇 “前綴/計數(shù)器",輸入樣品瓶的位置,點擊“確定"。3.2 基線平穩(wěn)后約10分鐘,從“運行控制"菜單中選擇“運行方法"。4 多次數(shù)據(jù)采集4.1 按照步驟2 編輯完整方法。4.2 點擊“序列"-“序列表",輸入“樣品瓶"“樣品名稱",“進樣次數(shù)",選擇合適的“做樣方法"4.3 點擊“序列"-“序列參數(shù)",選擇序列數(shù)據(jù)的保存路徑(序列會自動生成以“序列名稱-時間"為名稱的文件夾保存數(shù)據(jù)),數(shù)據(jù)建議以選擇 “前綴/計數(shù)器"保存。4.4 從“序列"菜單,選中“序列另存為?",輸入一序列名,如“測試",點擊“確定。4.5 從“運行控制"菜單中選擇“運行序列"。5 數(shù)據(jù)分析(脫機狀態(tài)使用)5.1 雙擊“儀器 —脫機"圖標(biāo) 進入的脫機畫面。5.2 從“視圖"菜單中,點擊“數(shù)據(jù)分析"進入數(shù)據(jù)分析畫面。5.3 從“文件"菜單選擇“調(diào)用信號",選中您的數(shù)據(jù)文件名。點擊“ 確定",則數(shù)據(jù)被調(diào)出。(如預(yù)建立標(biāo)準(zhǔn)曲線,應(yīng)先打開濃度較低的標(biāo)樣圖譜。)5.4 做譜圖優(yōu)化:從“圖形"菜單中選擇“信號選項"。從“范圍" 中選擇“滿量程" 或“自動量程" 及合適的時間范圍或選擇“自定義量程" 調(diào)整。反復(fù)進行,直到圖的比例合適為止。點擊“ 確定"。6 積分:6.1 從“積分"菜單中選擇“積分事件"選項,選擇合適的“斜率靈敏度",“峰寬",“zui小峰面積",“zui小峰高"。點擊 ,自動加載積分參數(shù)。6.2 點擊左邊“√"圖標(biāo),將積分參數(shù)存入方法并退出“積分事件"。6.3 如積分結(jié)果不理想,則修改相應(yīng)的積分參數(shù),直到滿意為止。7 標(biāo)準(zhǔn)曲線7.1 點擊“校正"-“校正設(shè)置",輸入“含量單位"。7.2 點擊“校正"-“新建校正表",點擊確定。輸入“化合物名稱"和“含量",點擊“確定",按照提示刪除其他組分。7.3 至此完成單級校正,如要增加校正級別,應(yīng)從“文件"菜單選擇“調(diào)用信號",選中您的數(shù)據(jù)文件名(第二個標(biāo)樣),點擊“校正"-“添加級別",點擊確定,輸入“含量",依次增加校正級別。8 打印報告8.1 從“報告"菜單中選擇“設(shè)定報告"選項,點擊“定量結(jié)果"框中“定量"右側(cè)的黑三角,選中“外標(biāo)法",其它選項不變,點擊“ 確定"。8.2 從“報告"菜單中選擇“打印報告",則報告結(jié)果將打印到屏幕上,如想輸出到打印機上,則點擊“報告" 底部的“打印"鈕。8.3 點擊“文件"-“另存為"-“方法",把數(shù)據(jù)分析方法保存,下次分析可直接在“文件"-“調(diào)用"-“方法"下,將該方法調(diào)出使用。(調(diào)用的方法中含有積分方法,標(biāo)準(zhǔn)曲線方法和打印報告方法)9 關(guān)機9.1 關(guān)機前,先關(guān)紫外燈,用相應(yīng)的溶劑(甲醇或乙腈)充分沖洗系統(tǒng)大約30分鐘。(色譜柱zui終應(yīng)保存在甲醇或乙腈中)9.2 退出化學(xué)工作站,依提示關(guān)泵,及其它窗口,關(guān)閉計算機。9.3 關(guān)閉Agilent 1260各模塊電源開關(guān)。10 其它注意事項10.1 當(dāng)樣品運行時,切勿打開自動進樣器前遮蓋,否則進樣過程停止。10.2 系統(tǒng)發(fā)生漏液時,機器會檢測到并停止進樣,狀態(tài)指示燈為紅色。檢查擦干并安置好漏液處,擦干漏液傳感器,單擊ON按鈕,系統(tǒng)重新初始化。10.3 注意紫外燈使用壽命,切勿來回開關(guān)紫外燈。液相色譜法只要求樣品能制成溶液,不受樣品揮發(fā)性的限制,流動相可選擇的范圍寬,固定相的種類繁多,因而可以分離熱不穩(wěn)定和非揮發(fā)性的、離解的和非離解的以及各種分子量范圍的物質(zhì)。與試樣預(yù)處理技術(shù)相配合,HPLC所達到的高分辨率和高靈敏度,使分離和同時測定性質(zhì)上十分相近的物質(zhì)成為可能,能夠分離復(fù)雜相體中的微量成分。隨著固定相的發(fā)展,有可能在充分保持生化物質(zhì)活性的條件下完成其分離HPLC成為解決生化分析問題zui有前途的方法。由于HPLC具有高分辨率、高靈敏度、速度快、色譜柱可反復(fù)利用,流出組分易收集等優(yōu)點,因而被廣泛應(yīng)用到生物化學(xué)、食品分析、醫(yī)藥研究、環(huán)境分析、無機分析等各種領(lǐng)域


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