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化工儀器網>產品展廳>試劑標物>常用實驗試劑>其它常用實驗試劑> 局部組織結構熒光染料 HistoBright

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局部組織結構熒光染料 HistoBright

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富士膠片和光(廣州)貿易有限公司是日本富士膠片和光純藥株式會社(FUJIFILM Wako Pure Chemical Corporation)在中國的子公司,主營富士膠片和光品牌試劑產品,供應產品超50,000種,囊括了生命科學、藥品生產、品質管理領域、合成與材料、分析各個領域。


基于“想要為科研人員提供幫助”的創業初衷,富士膠片和光純藥(FUJIFILM Wako)作為一家滿足前沿研究領域需求的綜合試劑制造商,一直致力于生產和開發高品質的產品,并于2022年6月迎來了創業100周年。通過發揮企業優勢“技術力”,以及三大核心業務的試劑業務、化成品業務和臨床診斷業務來滿足學術界、企業以及醫療相關企業的廣泛需求。


憑借100 年的歷史經驗,富士膠片和光純藥(FUJIFILM Wako)在日本市場占據高份額,作為全球性的試劑供應商,以“成就科學未來之力,創造幸福源泉”為愿景,致力于高品質試劑的生產與開發。通過提供試劑,為再生醫療、癌癥、精神/神經疾病和抗體藥物等各類基礎研究和前沿研究做貢獻,并獲得 ISO9001等多項國際認證。基于可靠的技術和品質以及科研人員之間的信賴,作為富士膠片集團的一員將不斷實現全球化發展。


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主要業務——試劑


作為富士膠片和光純藥(FUJIFILM Wako)試劑業務的中國子公司,富士膠片和光(廣州)貿易有限公司可提供各個領域測試和研究用途的生命科學試劑和化學試劑。


試劑業務

可廣泛提供生命科學和化學領域的測試研究用產品



生命科學領域


化學領域



 

培養基生產

 ● 抗體制備

 ● 定制服務



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認證標準品

 ● 有機化學


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作為優質的試劑企業,我們可以提供滿足不同客戶需求的高品質產品。試劑業務自創業以來,已持續不斷地提供了廣泛領域的試劑產品,并致力于成為滿足前沿技術領域各項研究需求的試劑制造商。今后也將以過往技術經驗為基石,發揮作為可信賴的研究支持合作伙伴的作用。



產品一覽

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● 常規試劑

● 有機合成試劑

● 環境分析試劑

● 精密分析試劑

● 色譜試劑

● 生化學用試劑

● 基因研究用試劑

● 免疫研究用試劑

● 病理研究用試劑

● 細胞培養用試劑

● 內毒素檢測用試劑

● 生物藥生產用培養基

● 研究用基礎培養基

● 定制服務

● 設備和耗材










豐富的產品類目以及快速供應體系

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致力于持續監測市場的需求并跟蹤世界的研究動向。為了能夠及時準確地響應客戶的需求,富士膠片和光建立了以自有品牌為中心的豐富產品體系,為各界的研究和開發領域提供細致的服務與支持 。













高品質的試劑提供和生產體系

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試劑生產工廠以東京工廠和大阪工廠為中心,發揮優質技術力量建立的高品質生產體系。愛知工廠配備齊全的培養基生產設備,可用于生產再生醫療和生物制藥生產用的培養基。













優質的客戶服務和產品信息

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通過定期更新的主頁網站、富士膠片和光生物微信公眾號、富士膠片和光化學分析微信公眾號,以及不定期的富士膠片和光生物視頻號、網絡研討會和線下展會,致力于為客戶提供優質的服務以及不斷更新的產品信息。













強化全球化事業的開展

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建立日本海外銷售體系,通過提供富士膠片和光純藥(FUJIFILM Wako)優質研發力量生產的高品質產品,積極推進全球化業務。














企業歷史沿革


年份

內容

1922年6月

  從武田長兵衞商店(現武田薬品工業株式會社)的化學藥品部門獨立出來,成立了武田化學薬品

 株式會社

1940年

  大阪工廠竣工

1944年

  東京工廠竣工

1947年

  更名為和光純薬工業株式會社

1950年

  展開化成品業務

1952年

  總部遷移至大阪

1960年

  展開臨床檢測藥業務

1968年

  播磨工廠竣工

1972年

  公司總部竣工

1974年

  成立德國和光純薬有限會社(今?FUJIFILM Wako Chemicals Europe GmbH)

1981年

  成立美國和光純薬株式會社(今?FUJIFILM Wako Chemicals U.S.A Corporation)

1989年

  建設東部配送中心

1991年

  建設西部配送中心

2004年

  愛知工廠竣工

2012年

  成立和光純耀(上海)化學有限公司(今?富士膠片和光純藥(上海)化學有限公司)

2015年

  收購株式會社シバヤギ(今?群馬辦事處)

2017年

  成為FUJIFILM Corporation的全資子公司

2018年

  更名為富士膠片和光純藥株式會社

2019年

  合并IS Japan Co.,Ltd.(今?戶田辦事處)

2022年

  成立100周年





























生物化學試劑、儀器和耗材

供貨周期 一個月以上 應用領域 生物產業,制藥/生物制藥

可實現局部組織結構可視化的熒光染料局部組織結構熒光染料 HistoBright

HistoBright




HistoBright是一種可實現雙光子激發的環境響應型膜染色熒光色素,組織滲透性優異,可根據組織的局部結構改變熒光特性,因此可實現高對比度的組織可視化。結合組織透明化處理和雙光子激光顯微鏡使用,可對組織塊進行深度觀察和空間結構分析。


本產品基于高知大學和愛媛大學的研究成果,由funakoshi(株)生產并銷售。

本產品僅供研究使用,研究以外的目的不可使用。



局部組織結構熒光染料 HistoBright


HistoBright 是一種環境響應型熒光染料,可根據溶劑的極性顯示出大范圍的波長。應用于透明化處理后的組織時,熒光會響應組織內的微環境而發生變化,隨后配合雙光子激光顯微鏡即可清晰地觀察到組織結構。



◆傳統的組織結構分析方法和新型的三維組織結構分析


傳統的組織結構分析,是通過有色染料對組織進行染色實現的,如蘇木精-伊紅(HE)染色法。而使用這些有色染料很難將組織塊整塊染色,一般需制成薄切片后再進行觀察。但薄切片很容易丟失組織結構的三維信息,因此需要制備大量切片才能重現三維結構。

HistoBright是高知大學教育研究部的仁子陽輔博士合成的新型環境響應型熒光染料(原著論文中的化合物名為PC),目前由愛媛大學醫學部的今村健志博士、村上正基博士、川上良介博士推進開發應用于三維組織結構的熒光成像染料。HistoBright會聚集在生物膜上,并根據所在局部環境不同,熒光在綠光~近紅外光的大范圍內變化。因此,當HistoBright應用于生物組織時,它可以根據組織結構誘導熒光色調的變化,從而實現高對比度觀察組織結構。由于HistoBright能夠進行雙光子激發,因此除了激光共聚焦顯微鏡外,還可以使用雙光子激光顯微鏡進行觀察。此外,配合組織透明化處理(除保持膜結構進行脫脂操作的方法外),使用HistoBright可在不破壞組織結構(不制備薄切片)的前提下觀察厚組織樣本,并通過雙光子激光顯微鏡進行深度成像,實現組織的三維結構分析。



◆特點


● 環境響應型的膜染色試劑,能根據周圍環境表現出綠光~近紅外光的熒光特性。通過區分需要檢測的熒光波長范圍,可實現高對比度的局部組織結

 構可視化。

配合無脫脂處理的組織透明化處理(如RapiClear(SunJin Lab公司)、LUCID等),可實現深度的組織結構三維分析。

※ 使用表面活性劑(Triton X-100、Tween 20等)會溶解組織中的脂質膜,可能對HistoBright的染色產生影響,因此不推薦使用。如需使用,請討論適用條件。

使用激光共聚焦顯微鏡鏡(推薦激發光:488 nm激光)或雙光子激光顯微鏡(推薦激發光:960 nm激光)皆可進行觀察。

使用雙光子激光顯微鏡觀察時,可配合使用二次諧波發生(SHG)成像,在使用本試劑的同時觀察未染色組織中的膠原纖維。

使用HistoBright進行染色和觀察后,可進行HE染色。



◆原著原文


Inoue, K., et al., J. Mater. Chem. B., 10(10), 1641~1649 (2022). Synthesis and photophysical properties of a new push-pull pyrene dye with green-to-far-red emission and its application to human cellular and skin tissue imaging. [PMID:35194628]



◆原理


激發/發射光譜


HistoBright是一種根據溶劑的分子極性改變熒光特性的溶劑極性響應型熒光染料(Solvatochromic fluorescent dye)。根據溶劑的極性,熒光會從綠色(低極性)向近紅外光(高極性)的范圍內大幅變動。


局部組織結構熒光染料 HistoBright

   

溶劑

最大吸收波長(nm)

最大熒光波長(nm)

熒光量子產率

Toluene

424

546

0.82

EtOAc

418

581

0.77

CHCl3

427

610

0.83

MeCN

414

641

0.65

EtOH

427

691

0.2

MeOH

426

712

0.07









脂質體膜模型中熒光光譜的變化


HistoBright對脂質膜顯示高親和性,并根據脂質膜的相態表現出不同的熒光特性。與有序相Lo模型(鞘磷脂(SM)/膽-固-醇(Chol))脂質體中的熒光最大值不同,無序相Ld模型(DOPC)脂質體中的最大波長也轉移到了約30 nm的長波長范圍,熒光量子產率也從0.72(SM/Chol)下降到了0.37(DOPC)。

局部組織結構熒光染料 HistoBright

※ 以上熒光光譜數據均由高知大學 仁子陽輔博士提供。



◆應用數據


使用雙光子激光顯微鏡對透明化人正常皮膚組織進行成像


使用4% paraformaldehyde/ PBS固定人正常皮膚組織塊后,制備成500 μm的切片,同時進行76 h的組織透明化處理(LUCID)和HistoBright(10 μM)染色。通過雙光子激光顯微鏡,用960 nm處激光激發組織塊,分別在492 nm(SHG:青色)、500-550 nm(綠色)、560~593nm(橙色)和 593-690 nm(紅色)處分別獲取熒光圖像,制作以下4幅合成圖像。


※ 492 nm(青色)來源于組織中膠原纖維的SHG信號,而非HistoBright來源的熒光信號。


局部組織結構熒光染料 HistoBright



接下來,使用雙光子激光顯微鏡在Z軸方向以5 μm的間隔連續拍攝500 μm的圖像,并使用圖像分析軟件進行三維構建,以三維方式將人皮膚組織的精細結構可視化。


局部組織結構熒光染料 HistoBright




使用雙光子激光顯微鏡對透明化人正常皮膚組織進行三維成像


使用4% paraformaldehyde/PBS固定人正常皮膚組織塊后,制備成1 mm的切片,同時進行72 h的組織透明化處理(RapiClear、SunJin Lab公司)*、HistoBright(10 μM)染色和核染色(Hoechst33342)。通過雙光子激光顯微鏡,用1100 nm處激光激發組織塊,分別在<492 nm(SHG:青色)、500~550 nm(綠色)、560~593 nm(橙色)和 593-690 nm(紅色)處分別獲取熒光圖像,制作以下4幅合成圖像。基于以上條件,在Z軸方向以5 μm的間隔連續拍攝,使用圖像分析軟件進行三維構建,將連續的數據制作成動畫。


* 本實驗中的組織塊固定后未進行透膜處理,直接透明化處理和染色。


真皮的觀察圖像                    

表皮的觀察圖像                    

局部組織結構熒光染料 HistoBright                    

局部組織結構熒光染料 HistoBright                    















完整視頻請查看:labchem.fujifilm-wako.com.cn/product/show/1646.html


重復用于HE染色


使用HistoBright染色并觀察人正常皮膚細胞組織塊,在PBS中靜置,去除透明化試劑。然后制備成薄切片,進行HE染色。已確認HistoBright染色后,仍可進行清晰的HE染色。


局部組織結構熒光染料 HistoBright



在激光共聚焦顯微鏡和雙光子激光顯微鏡下觀察染色


使用4% paraformaldehyde/ PBS固定人正常皮膚組織塊后,制備成0.5 mm的切片,同時進行72 h的組織透明化處理(RapiClear、SunJin Lab公司)*和HistoBright(10 μM)染色。隨后,使用激光共聚焦顯微鏡鏡(左圖:激發光488 nm激光)和雙光子激光顯微鏡(右圖:激發光960 nm激光)進行觀察。雖然兩幅圖像沒有明顯區別,但在雙光子激光顯微鏡下可以觀察到雙光子激發的SHG信號(膠原纖維)。

* 本實驗中的組織塊固定后未進行透膜處理,直接透明化處理和染色。


局部組織結構熒光染料 HistoBright


※ 以上圖像數據均由愛媛大學 川上良介博士提供。



◆產品列表


產品編號產品名稱產品規格
FDV-0051HistoBright 0.1 mg




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