體外受精實驗
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- 公司名稱 上海達為科生物科技有限公司
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- 廠商性質 生產廠家
- 更新時間 2025/7/17 10:33:04
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一、定義與技術原理
動物體外受精(IVF) 指在人工模擬的體內環境中,使哺乳動物的精子和卵子完成受精過程的技術。受精后形成的胚胎可移植至受體子宮發育,所得后代稱“試管動物”(test-tube animal)。
核心生物學原理:
精子獲能(Capacitation):
精子需去除表面“去能因子”(如糖蛋白),通過添加肝素、鈣離子或血清白蛋白誘導獲能,增強運動能力與穿透卵子能力。
獲能過程依賴物種特異性條件(小鼠需30分鐘,豬需2–3小時)。
卵母細胞成熟(Oocyte Maturation):
體內成熟卵子可直接使用;未成熟卵子需體外培養至MII期(第二次減數分裂中期)。
受精兼容性:人工環境需模擬輸卵管生理條件(溫度、pH、滲透壓、營養)以支持精卵結合。
二、標準化操作流程
1. 卵母細胞采集與處理
方法 | 適用場景 | 操作要點 |
---|---|---|
超數排卵法 | 實驗動物(小鼠、大鼠) | 注射FSH/LH激素誘導多排卵,從輸卵管采集成熟卵子 |
活體卵巢穿刺法 | 小牲畜(牛、羊)臨床操作 | 超聲或腹qiang鏡引導采集活體卵巢卵子 |
宰殺后卵巢采集法 | 屠宰場資源利用 | 取新鮮卵巢分離未成熟卵子,體外培養成熟 |
2. 精子采集與獲能
采集:附睪穿刺或精液收集。
獲能處理:
化學法:添加肝素(牛)、鈣離子載體(小鼠)。
生物法:與含卵丘細胞的卵泡液共培養。
3. 體外受精
技術 | 原理 | 應用場景 |
---|---|---|
共培養法 | 精卵在培養液中自然結合 | 常規IVF(牛、小鼠) |
顯微注射法(ICSI) | 直接注入單個精子至卵胞質 | 低活力精子或基因編輯動物 |
4. 胚胎培養與評估
培養基:KSOM+AA(小鼠)、SOF(牛)、TALP系列(跨物種)。
發育監測:形態學分級。
5. 胚胎移植或冷凍
移植:同步受體發情周期,手術/非手術法植入子宮。
冷凍保存:液氮(-196℃)長期儲存遺傳資源。