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親和純化質譜檢測技術服務詳情介紹
親和純化質譜(Affinity Purification-Mass Spectrometry, AP-MS) 是一種將親和純化技術與質譜分析相結合的強大工具,用于研究分子間相互作用、dànbáizhì復合物的組成以及功能性分子的動態行為。該技術的核心理念是通過目標分子(如dànbáizhì、核酸或小分子)的特異性結合特性,將其從復雜的生物樣本中分離出來,同時捕獲與其相關聯的相互作用分子,隨后利用質譜技術對這些分子進行鑒定和定量分析。與傳統的dànbáizhì組學方法相比,該技術能夠在高度復雜的背景中jīngzhǔn捕獲特定分子及其結合伙伴,從而大幅提高分析的靈敏度和特異性。親和純化質譜的應用場景十分廣泛,尤其在研究細胞信號傳遞、代謝調控和疾病分子機制等領域具有重要價值。例如,在信號傳導研究中,某些關鍵蛋白通過與下游分子的特異性結合啟動一系列生物學反應,而親和純化質譜能夠捕獲這些結合分子,揭示信號傳遞路徑的核心節點。除此之外,該技術還在病毒感染研究中表現出bùkětìdài的作用,幫助科學家解析病毒蛋白與宿主細胞蛋白的相互作用,為新型抗病dúyào物的開發提供分子靶點。近年來,隨著質譜技術的不斷進步,該技術已成為dànbáizhì組學研究的主流工具之一。特別是在研究復雜生物樣本時,它能夠深入挖掘dànbáizhì間的功能性網絡,幫助科學家從分子層面理解生命活動的動態機制。
一、親和純化質譜的實驗流程
1、樣本制備
(1)目標分子表達與標記:通過基因工程技術表達帶有特定標簽的目標蛋白,或直接使用抗體捕獲內源性目標分子。
(2)樣本裂解:將細胞或組織裂解,獲得完整的dànbáizhì樣本,避免降解和非特異性修飾。
2、親和純化
(1)固定化親和基質:將抗體、配體或標簽結合樹脂,用于捕獲目標分子及其復合物。
(2)結合與洗滌:將樣本與親和基質結合,并通過優化洗滌條件,去除非特異性結合物。
(3)洗脫:采用適當的緩沖液條件(如改變 pH 或使用競爭性配體),釋放目標分子及其結合物。
3、質譜分析
(1)dànbáizhì消化:通過yídànbáiméi或其他蛋白酶,將捕獲的dànbáizhì分解成多肽片段。
(2)質譜檢測:利用液相色譜-質譜聯用技術(LC-MS/MS)進行檢測,獲得dànbáizhì序列信息。
(3)數據分析:通過生物信息學工具對質譜數據進行解析,鑒定目標分子及其相互作用蛋白。
二、親和純化質譜的應用場景
1、dànbáizhì-dànbáizhì相互作用研究
親和純化質譜是研究dànbáizhì相互作用的核心工具。例如,在研究信號通路時,可以通過捕獲關鍵信號分子及其結合物,解析調控網絡的關鍵節點。
2、靶點鑒定
在藥物開發中,親和純化質譜能夠幫助篩選與藥物分子結合的潛在靶點,為藥物機制研究提供重要數據支持。例如,小分子藥物通過與dànbáizhì結合實現功能,AP-MS 技術能夠捕獲這些結合蛋白。
3、復合物組裝與動態變化研究
許多生物學功能由dànbáizhì復合物協同完成,例如核糖體的組裝、細胞骨架的動態調控等。通過親和純化質譜,可以研究復合物的組裝過程及其動態變化
三、親和純化質譜的技術優勢
1、高靈敏度與特異性:通過結合親和純化與質譜,能夠從復雜的dànbáizhì混合物中jīngzhǔn捕獲目標分子及其復合物。
2、全局與局部結合:不僅能分析全局dànbáizhì組,還可以聚焦特定分子間的直接相互作用。
3、靈活性強:可結合多種親和技術(如標簽法、抗體法)和質譜平臺,適應不同實驗需求。
四、親和純化質譜的注意事項與常見問題
1、非特異性結合
(1)非特異性結合是親和純化中的主要挑戰。通過優化洗滌條件(如提高鹽濃度或加入去污劑),可以有效減少背景信號。
(2)使用對照組(如空載載體或非靶標抗體)有助于排除非特異性信號。
2、靶標降解與修飾
靶標在樣本制備過程中可能降解或發生翻譯后修飾,這可能影響結合物的純化效果,快速的樣本處理和適當的抑制劑使用是關鍵。
3、低豐度蛋白檢測
低豐度蛋白可能難以在質譜中被有效檢測,結合多輪純化或高靈敏度質譜儀可以改善這一問題。
百泰派克生物科技專注于提供高質量的dànbáizhì相互作用質譜分析服務,我們的服務涵蓋從實驗設計、樣本制備到數據分析的全過程,確保實驗結果的可靠性和可重復性。選擇百泰派克,讓我們為您的科學研究提供zhuānyè支持,助力突破性成果的實現。
百泰派克生物科技特色項目
一、蛋白測序
百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質譜儀及島津公司埃德曼降解測序系統對dànbáizhì序列進行分析,提供基于質譜的蛋白測序分析服務,包括對dànbáizhì的氨基酸組成分析,Nduāncèxù,Cduāncèxù和全序列分析,以及基于埃德曼降解的dànbáizhìN端序列分析服務。對于未知理論序列的dànbáizhì,提供基于從頭測序法的dànbáizhì從頭測序服務,對蛋白序列進行分析。
※服務優勢:
1.采用目前世界上優良的質譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;
2.可實現對所測定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;
3.可測定蛋白N端多達 70個氨基酸序列;
4.可測定多種形式的樣品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白條帶;
5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug,即可完成檢測;
6.測序不受N端封閉,PEC和和糖基化等N端修飾的影響。
二、dànbáizhì組學
百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質譜平臺結合Nano-LC,提供定量dànbáizhì組學、靶向dànbáizhì組學、多肽組學、翻譯后修飾蛋白組學等多種dànbáizhì組學分析服務。此外,百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4Ddànbáizhì組學服務,助力微量樣本蛋白組學、大樣本群醫學及高通量修飾組學等研究工作。
※服務優勢:
1 .高通量定量蛋白分析:多對照組大規模實驗分析,發現新的生物標記物;
2.體內體外多種dànbáizhì標記方法,適用于分析組織、細胞、血液等多種樣品;
3.質譜分析靈敏度高,實驗結果重復度高;
4.可檢測較低豐度蛋白,線性范圍廣;
5.zhuānyè生物信息學分析,分析更系統準確。
三、單細胞質譜流式技術分析
百泰派克生物科技采用Fluidigm質譜流式系統進行單細胞質譜流式技術分析,采用金屬元素標記物(通常是金屬元素標記的特異抗體)標記細胞表面和內部的分子,然后用流式細胞原理分離單個細胞,再用電感耦合等離子體質譜(ICP-MS)分析單個細胞的原子質量譜,zuì后將原子質量譜數據轉換為細胞表面和內部的信號分子表達量。
※服務優勢:
1.技術優良,*技術空白
采用金屬標記抗體技術,避免了傳統流式熒光通道少且易相互影響的問題。可在單細胞層面上對多種指標同時進行表征,百泰派克生物科技可做到同時檢測51個目標蛋白。
2.分析數量大,成本較低
單細胞RNAseq受成本等因素限制,所有樣本細胞匯總的分析數目一般在2x10^4個左右,而流式質譜技術一次(單樣本)就可分析至少10^5的細胞,實現了數量級的提高,且成本不高于單細胞RNAseq。
3.應用前景大
①流式質譜結果可以給出細胞亞群的變化,在臨床診斷、疾病機制研究等方面具有極大的研究前景;
②將金屬標簽技術與其他技術結合會有新應用方向。除常規蛋白外,質譜流式細胞技術還可用于蛋白翻譯后修飾;
③可檢測細胞存活率、細胞大小、mRNA轉錄子表達量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。
四、基于高精度質譜的免疫多肽組學分析及新抗原發現
百泰派克生物科技的基于高精度質譜的免疫多肽組學分析及新抗原發現一站式解決方案包括我們專有的、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實現10,000個以上I型多肽和10,000個以上II型多肽的鑒定和識別。通過我們優化的高通量免疫多肽組學分析平臺進行免疫肽組學分析,可從zuì小的樣品材料中進行可重復的識別和定量。該服務可以應用于大規模的研究,旨在助力科研工作者尋找癌癥、免疫疾病及傳染病的解決方案,深入挖掘未知的靶標。
五、生物藥物表征
百泰派克基于高分辨率質譜技術,MALDI TOF,高效色譜分離技術,提供一系列完善的生物藥物分析方案,從dànbáizhì、多肽、抗體、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級結構分析,到產品變異性和純度分析。旨在提供優質生物藥物分析服務,幫助生物醫藥生產商提高生物藥物品質。
百泰派克生物科技七大檢測平臺
百泰派克生物科技-生物制品表征,生物質譜多組學優質服務商
北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫療器械行業提供質量控制檢測和項目驗證等zhuānyè服務。公司實驗室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法規和指導原則,通過CNAS/ISO9001雙重質量體系認證,建立了完備的質量體系,數據冷熱/異地備份,設備定期計量/期間核查,軟件審計追蹤,為客戶提供一體化解決方案和技術服務,支持新藥研發、藥物申報注冊和生產放行。
1.公司采用ISO9001質量控制體系,zhuānyè提供以質譜為基礎的CRO檢測分析服務;
2.獲國家CNAS實驗室認可,為客戶提供符合全球藥政法規的藥物質量研究服務;
3.業務范圍覆蓋dànbáizhì組學、多肽組學、代謝組學、生物藥物表征、單細胞分析、單細胞質譜流式、生信云分析以及多組學生物質譜整合分析等;
4.七大質量控制檢測平臺,滿足您一站式服務需求;
5.服務3000+企業,10000+客戶的選擇;
6.致力于為您提供優質的生物質譜分析服務!