細胞周期與細胞凋亡檢測試劑盒
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- 公司名稱 上海貝博生物科技有限公司
- 品牌
- 型號
- 產地
- 廠商性質 生產廠家
- 更新時間 2025/7/14 8:16:51
- 訪問次數 48
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保存溫度
-20℃避光
注意事項
1.染液短期2周內可以2-8℃保存。染料長期不用可以-20℃保存。避免反復凍融。
2.試劑拆封后請盡快使用完！
2.試劑拆封后請盡快使用完！
有效期
1年
檢測方法
流式細胞儀
適用樣本
1.懸浮細胞 2.貼壁細胞
產品應用
流式細胞儀
儀器準備
1.流式細胞儀
2.離心機
3.移液器
4.冰箱
5.冰盒
2.離心機
3.移液器
4.冰箱
5.冰盒
試劑準備
1.PBS 緩沖液（pH7.4，實驗室常用的10mM磷酸緩沖鹽溶液（1X））
2.或者HBSS（Hank's Balanced Salt Solution）
2.或者HBSS（Hank's Balanced Salt Solution）
耗材準備
1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套
2.吸頭
3.一次性手套
使用注意事項
1.細胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細胞。
2.使用含EDTA的細胞消化液。
3.洗滌細胞離心轉速不可超過800×g。
4.乙醇固定時離心大概采用2000×g力5分鐘，離心力太小可能部分細胞難以沉淀。? 5.固定時在振蕩器上輕輕振蕩細胞，并緩慢滴加75%乙醇，直接加入會導致細胞團聚的現象，很難重懸成單細胞。或者先用冷PBS懸浮細胞，充分懸浮，使細胞充分分散成單細胞。之后緩慢加入無水乙醇，終濃度為70-90%乙醇。乙醇固定之后須無細胞沉淀。
2.使用含EDTA的細胞消化液。
3.洗滌細胞離心轉速不可超過800×g。
4.乙醇固定時離心大概采用2000×g力5分鐘，離心力太小可能部分細胞難以沉淀。? 5.固定時在振蕩器上輕輕振蕩細胞，并緩慢滴加75%乙醇，直接加入會導致細胞團聚的現象，很難重懸成單細胞。或者先用冷PBS懸浮細胞，充分懸浮，使細胞充分分散成單細胞。之后緩慢加入無水乙醇，終濃度為70-90%乙醇。乙醇固定之后須無細胞沉淀。
使用方法
1. 收集樣本細胞，細胞數量在1-5*106個。
2. 用冷PBS洗滌細胞兩次。
3. 在15ml離心管中，用500 μl PBS重懸細胞。
4. 慢慢滴加冷的無水乙醇或95%乙醇至終濃度為70%-80％冰凍乙醇。-20℃固定1小時或4℃固定過夜。
5. 在1000g離心10分鐘，棄上清，收集細胞。
6. 用冷PBS洗滌細胞一次。
7. 用500 μl冷PBS重懸細胞。
8. 加入Rnase A溶液20 μl， 37℃水浴30分鐘。
9. 400目篩網過濾。
10. 在1000g離心10分鐘，棄上清，收集細胞。
11. 加入400 μl PI染液重懸細胞，輕輕混勻后4℃避光孵育30分鐘-1小時。
12. 流式檢測結果。激發波長為488nm。采用適當分析軟件進行細胞DNA含量分析和光散射分析。
2. 用冷PBS洗滌細胞兩次。
3. 在15ml離心管中，用500 μl PBS重懸細胞。
4. 慢慢滴加冷的無水乙醇或95%乙醇至終濃度為70%-80％冰凍乙醇。-20℃固定1小時或4℃固定過夜。
5. 在1000g離心10分鐘，棄上清，收集細胞。
6. 用冷PBS洗滌細胞一次。
7. 用500 μl冷PBS重懸細胞。
8. 加入Rnase A溶液20 μl， 37℃水浴30分鐘。
9. 400目篩網過濾。
10. 在1000g離心10分鐘，棄上清，收集細胞。
11. 加入400 μl PI染液重懸細胞，輕輕混勻后4℃避光孵育30分鐘-1小時。
12. 流式檢測結果。激發波長為488nm。采用適當分析軟件進行細胞DNA含量分析和光散射分析。
常見問題分析
1.染色后找不到細胞？
固定細胞可能難以離心沉淀；固定細胞可能成團；固定細胞膜容易損傷成碎片。操作過程中注意以上幾點。
2.可以不固定細胞嗎？
本試劑盒可以用于非固定細胞的周期檢測。
固定細胞可能難以離心沉淀；固定細胞可能成團；固定細胞膜容易損傷成碎片。操作過程中注意以上幾點。
2.可以不固定細胞嗎？
本試劑盒可以用于非固定細胞的周期檢測。
參考文獻
1.Meng Zhang, et al.
lnc9141-a and -b Play a Different Role in Bovine Myoblast Proliferation, Apoptosis, and Differentiation
Molecular Therapy-Nucleic Acids 2019 （IF=5.919）
2.Jiebing Yang, et al.
Phenylboronic acid-modified polyamidoamine-mediated delivery of short GC rich DNA for hepatocarcinoma gene therapy
Biomaterials science 2019 （IF=5.831）
3.Wenqi Chen, et al.
Chondroitin sulfate-functionalized polyamidoamine as a tumor-targeted carrier for miR-34a delivery
Acta Biomaterialia 2017 （IF=6.383）
4.Feng Liu, et al.
Interleukin-6-stimulated progranulin expression contributes to the malignancy of hepatocellular carcinoma cells by activating mTOR signaling
Sci Rep. 2016; 6: 21260 （IF 5.228）
5.Fei Fei, et al.
The number of polyploid giant cancer cells and epithelial-mesenchymal transition-related proteins are associated with invasion and metastasis in human breast cancer
Journal of Experimental & Clinical Cancer Research 2015 （IF 6.217）
lnc9141-a and -b Play a Different Role in Bovine Myoblast Proliferation, Apoptosis, and Differentiation
Molecular Therapy-Nucleic Acids 2019 （IF=5.919）
2.Jiebing Yang, et al.
Phenylboronic acid-modified polyamidoamine-mediated delivery of short GC rich DNA for hepatocarcinoma gene therapy
Biomaterials science 2019 （IF=5.831）
3.Wenqi Chen, et al.
Chondroitin sulfate-functionalized polyamidoamine as a tumor-targeted carrier for miR-34a delivery
Acta Biomaterialia 2017 （IF=6.383）
4.Feng Liu, et al.
Interleukin-6-stimulated progranulin expression contributes to the malignancy of hepatocellular carcinoma cells by activating mTOR signaling
Sci Rep. 2016; 6: 21260 （IF 5.228）
5.Fei Fei, et al.
The number of polyploid giant cancer cells and epithelial-mesenchymal transition-related proteins are associated with invasion and metastasis in human breast cancer
Journal of Experimental & Clinical Cancer Research 2015 （IF 6.217）
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