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燙傷感染動物模型

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燙傷感染模型

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一、燙傷感染模型的定義與分類

1. 定義

燙傷感染模型是一種復合型動物模型,通過人為制造燙傷創面并接種病原菌,模擬臨床燙傷后創面感染的病理過程。其核心目標是研究感染機制、評估抗感染藥物及創面愈合策略。

  • 燙傷基礎定義:由無火焰高溫液體(沸水、熱油)、固體(熱金屬)或蒸汽導致的組織損傷,破壞皮膚屏障功能,增加病原體定植風險。

2. 分類依據

根據感染發生方式分為兩類:

  • 自發感染模型:燙傷后不主動接種病原菌,依賴環境微生物自然定植,模擬臨床繼發感染。

  • 外源性感染模型:燙傷后立即接種特定病原菌(如金黃色pu萄球菌、銅綠假單胞菌),可控性強,用于機制研究。

燙傷深度分級(基于組織損傷程度):

分級病理特征臨床意義
Ⅰ度表皮紅腫、疼痛,無水皰輕微損傷,自愈快
淺Ⅱ度表皮全層壞死,水皰形成,真皮淺層炎癥易感染,愈合時間中等
深Ⅱ度真皮深層壞死,痛覺遲鈍,基底蒼白高感染風險,易留瘢痕
Ⅲ度全層皮膚壞死,呈蠟白/碳化,干燥無彈性需植皮,感染并發癥率高
Ⅳ度深達肌肉/骨骼罕見,多合并全身性感染
注:分級標準參考三度四分法。


二、動物模型選擇與構建方法

1. 常用實驗動物及特點

動物優勢局限性適用場景
小鼠成本低、易操作、遺傳背景清晰皮膚薄,與人類差異較大大規模藥物篩選、機制初探
大鼠體型適中,適合復雜操作(如休克復蘇)皮膚結構與人類仍存差異感染動力學、全身炎癥反應研究
皮膚結構(厚度、毛囊、代謝)與人類高度相似成本高、飼養復雜臨床前治療策略驗證
兔/豚鼠皮膚較厚,適用于深度燙傷模型免疫反應差異需謹慎解讀創面修復與瘢痕形成研究

2. 模型構建的核心步驟

(1)燙傷創面制備

  • 方法選擇

    • 熱水燙傷法:動物脫毛麻醉后,背部浸入恒溫水浴(溫度/時間因動物而異):

  • 大鼠:92℃水浸18秒 → Ⅲ度燙傷;100℃砝碼壓5秒 → 淺Ⅱ度。

  • 小鼠:80℃水浸20秒 → Ⅲ度;55℃水浸20秒 → Ⅱ度。

    • 熱金屬接觸法:銅塊/電烙鐵預加熱至80–100℃,垂直按壓皮膚(時間控制深度)。

  • 深度驗證:48小時后組織學檢查(HE染色),確認真皮壞死程度。

(2)病原菌接種

  • 菌種選擇:臨床常見病原體如金黃色pu萄球菌(ATCC 25923)、銅綠假單胞菌。

  • 接種方法

    • 刮擦法:創面輕微刮擦后滴注菌液(20μl,濃度1×10?–1×10? CFU/mL)。

    • 直接涂布:均勻涂布菌液于創面(大鼠:1ml菌液)。

  • 優化濃度:小鼠模型驗證顯示1×10? CFU/mL為最佳感染濃度(顯著延遲愈合,P<0.01)。

(3)感染維持與監控

  • 單籠飼養避免交叉感染,自由飲水飲食。

  • 定期檢測痂下細菌載量(>1×10? CFU/g組織提示感染成立)。


三、模型評估指標

1. 感染特異性指標

  • 細菌載量

    • 痂下組織定量培養(CFU/g)。

    • 內臟(肝、腎、肺)細菌定植評估全身播散。

  • 炎癥反應

    • 局部:HE染色觀察中性粒細胞/單核細胞浸潤;ELISA檢測創面促炎因子(IL-1β、IL-6、TNF-α)↑ 和抗炎因子(IL-10)↓。

    • 全身:血清HMGB-1(損傷相關分子)、透明質酸↑,纖維連接蛋白↓。

2. 創面愈合指標

  • 愈合時間:感染組愈合時間顯著延長(小鼠:15.92±0.34天 → 21±0.95天)。

  • 組織病理學

    • 光鏡觀察上皮再生、膠原排列、肉芽形成。

    • IHC染色檢測凋亡標志物(如cC3上調)。

3. 全身并發癥指標

  • 死亡率:感染組5天存活率降至40%(對照組100%)。

  • 血常規:白細胞總數↑(尤其粒細胞/單核細胞)。



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