大鼠胰腺上皮原代細胞

培養(yǎng)信息：

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 上皮細胞樣

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

大鼠胰腺上皮細胞分離自胰腺組織；胰腺分為外分泌腺和內(nèi)分泌腺兩部分。外分泌腺由腺泡和腺管組成，腺泡分泌胰液，腺管是胰液排出的通道。胰液中含有、原、脂肪酶、等。胰液通過胰腺管排入十二指腸，有消化蛋白質、脂肪和糖的作用。內(nèi)分泌腺由大小不同的細胞團──胰島所組成，胰島主要由4種細胞組成：α細胞、β細胞、γ細胞及PP細胞。α細胞分泌胰高血糖素，升高血糖；β細胞分泌胰島素，降低血糖；γ細胞分泌，以旁分泌的方式抑制α、β細胞的分泌；PP細胞分泌胰多肽，抑制胃腸運動、胰液分泌和膽囊收縮。胰腺干細胞在發(fā)育上被認為分離自內(nèi)胚層胰腺上皮，在隨后的胰腺發(fā)育過程中，胰腺干細胞分化為胰島細胞（α、β、δ、PP細胞）、導管上皮細胞以及腺泡細胞。胰腺組織中還存在大量的間充質來源的細胞，包括成纖維細胞、血管內(nèi)皮細胞、血管平滑肌細胞以及星形細胞，其中以成纖維細胞占主要部分。要離體分離培養(yǎng)獲得胰腺上皮細胞就要排除間充質來源的細胞，尤其是成纖維細胞。目前常用的去除成纖維細胞方法有機械刮除法、消化以及膠原酶消化法等，胰腺上皮細胞的病變與急慢性胰腺炎的發(fā)生具有重大意義。

方法簡介：

公司實驗室分離的大鼠胰腺上皮細胞采用膠原酶分次消化法并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

公司實驗室分離的大鼠胰腺上皮細胞經(jīng)Cytokeratin-19免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養(yǎng)法

　　③ 懸浮細胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　　④器官培養(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用。

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。(該細胞傳代次數(shù)有限約 2 代，建議客戶收到細胞后盡快安排后續(xù)實驗)

1、取出細胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養(yǎng)箱中靜置 6-8 小時，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

2、待細胞達到 80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。

3、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養(yǎng)基，用 PBS 清洗細胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養(yǎng)瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養(yǎng)液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當?shù)谋壤M行接種傳代，然后補充新鮮的培養(yǎng)基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4)待細胞貼壁后，培養(yǎng)觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養(yǎng)基。

CD274 Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 PD-L1 / B7-H1 / CD274 人細胞裂解液   293(人胚細胞)     肺成纖維細胞Many   中國倉鼠卵巢細胞系;CHO-TGF-beta-3/2000 Carrying Psv2-beta-TGF  人羊膜細胞 小鼠原代主動脈瓣膜間質細胞 兔原代胎盤間充質干細胞

軟骨寡聚基質蛋白(COMP)重組蛋白 Recombinant Cartilage Oligomeric Matrix Protein (COMP)

AACS Protein Human 重組人 AACS / Acetoacetyl-CoA Synthetase 蛋白 (His 標簽)

EPOR重組人 EPOR / Erythropoietin Receptor 蛋白  Protein

HA Protein Influenza B 重組乙型流感 (B/Florida/4/2006) 血凝素HA2 (Hemagglutinin) 蛋白

PRNP重組人 PRNP / Prion 蛋白  Protein

小鼠Ⅹ(FⅩ)ELISA 試劑盒

Rat alpha fetoprotein / alpha fetoprotein (AFP) ELISA Kit 大鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)試劑盒

Humanimmunosuppressiveacidicprotein,IAPELISAKit 人免疫抑制酸性蛋白(IAP)試劑盒 進口分裝

Human16-αHydroxyesogen1,16-αOHE-1試劑盒人16α羥基雌同1(16-αOHE-1)試劑盒

真菌/酵母細胞線粒體可溶性總蛋白制備試劑盒20次

MouseAquaporin2,AQP-2ELISAKit小鼠水通道蛋白2(AQP-2)試劑盒

人組織因子(TF)試劑盒   96T/48T

人組織型纖維溶酶激活物（t-PA）試劑盒   96T/48T

人組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)試劑盒   96T/48T

人組織相容性復合體Ⅰ類相關基因D（MICD）試劑盒   96T/48T

大鼠胰腺上皮原代細胞小鼠糖原0酸化酶同工酶BB(GP-BB)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human thioredoxin (x) ELISA Kit 人硫氧化還原蛋白(x)試劑盒

Humancostimulatorymoleculesrecptor,CMRELISAKit 人協(xié)同刺激分子受體(CMR)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Chickeumornecrosisfactor-relatedapoptosis-inducingligand3,AIL-R3試劑盒雞壞死因子相關凋亡誘導配體3(AIL-R3)試劑盒規(guī)格：96T/48T

載玻片細胞AIL蛋白表達熒光顯微鏡試劑盒10/20次

MouseEsadiolreceptor,ERELISAKit小鼠雌二醇受體(ER)試劑盒規(guī)格：96T/48T

CD274重組大鼠 PD-L1 / B7-H1 / CD274 蛋白 (His 標簽) Protein

CREB-1 (cAMP responsive element binding protein-1 0.5mgCREB-1 (cAMP responsive element binding protein-1) 環(huán)腺苷酸應答元件結合蛋白(抗原)

CSF3R重組人 G-CSFR / CD114 蛋白 (His 標簽) Protein

AK1 Protein Human 重組人 AK1 / Adenylate kinase 1 蛋白 (His 標簽)

NTRK3 Protein Mouse 重組小鼠 TrkC / NTRK3 蛋白 (His 標簽)