產品介紹：

美國Axion公司Mastro Z實時無標記細胞分析儀，是基于阻抗技術研發的第三代無標記、實時、非侵入式細胞分析設備，于2019年秋季上市，其培養檢測一體機設計、強大的全自動數據分析，成為長時間不間斷細胞檢測的有力工具。

 

 

高精準度——提供三個頻率下的實時參數，可以更清晰、更精確地了解細胞當前動態變化，例如細胞數量（細胞死亡）、細胞屏障（細胞間緊密連接被破壞）、GPCR離子通道（細胞外形可能變化）等；
全自動分析——內置強大的AxIS-Z數據分析軟件，無需人工計算，可實時得到KT50（半數殺傷時間）、柱狀圖、增殖、凋亡曲線等；
數據安全——Maestro Z自帶500G存儲空間，數據實時自動保存，雙通路備份檢測，確保重要數據不丟失；
數據合規——符合FDA頒布的21CFRPart 11，確保數據的合規，以備審查；
一體設計——內置智能環境倉，可在超凈臺里操作，無需額外CO2培養箱，節省空間。
  

 

 
追蹤免疫T細胞介導的細胞死亡

神經膠質瘤是一種惡性腦腫瘤，人體免疫系統中的效應T細胞，有著高特異性和固有的細胞毒性，在未來的腦膠質瘤研究中被人們寄予很高的期望。Maestro Z的阻抗測試有著高靈敏、無標記及無損的特點，為連續監控腫瘤細胞增殖和免疫細胞介導的細胞毒性提供了可能，因而被用來評估免疫效價。

 

如左圖所示，我們將惡性膠質母細胞瘤細胞株U87MG，以三種不同的細胞密度及四重復的形式，分成12個樣本種到CytoView-Z阻抗板內。使用Maestro Z對其阻抗值變化持續監測24小時后，以10:l的比例將被激活的人T細胞加入到這些樣本孔內，后續能夠觀察到阻抗值的降低。這和預期中的T細胞介導U87細胞裂解效應是一致的。對比之下，那些未經處理的腫瘤細胞樣本（淺藍色顯示），某同時段測得的阻抗值則繼續上升。

 

中圖顯示了在這三種處理條件下（不同的T細胞數量）檢測到的實時細胞裂解比例。在這基礎上，我們就能如右圖所示，對每種處理方案的KT50值（裂解50%腫瘤細胞所需時間）進行計算?？梢钥吹?，要達到更快的U87MG細胞殺傷速度，我們就需要更高的T細胞密度。

 

 

 

細胞毒性的動態研究

當需要測試新藥時，傳統的終點法實驗只能區分細胞樣本的死活，而無法了解細胞反應的動態過程并對背后的機理做出解釋。Maestro Z所提供的無標記、非侵入的連續監控能力，得以捕捉到細胞毒性的全程。不僅能看到毒性的程度，還能揭示其動態學和細胞死亡的速率。通過這些細胞反應的動態表現，更容易洞悉一個藥物的效力及作用機理。

 

 

例如用Doxorubicin（）處理A549細胞（人非小細胞肺癌細胞）后，阻抗測試揭示了樣本的動態反應（左圖為實時連續檢測結果，中圖為虛線處單個時間點的讀數）。在同一塊板上，我們可以將Doxorubicin處理組的阻抗數據和細胞生長組（未加藥對照）及細胞死亡組（加入Tergazyme清潔劑）的相關數據做比對，從而得知Doxorubicin導致細胞溶解比例的實時效應，并能夠覆蓋藥物反應的整個過程。

 

 

 

細胞樣本專屬功能檔案

基于各自不同的生物學功能，細胞樣本間的生長、貼附及互作會有所不同。這些特性共同構成了一個的細胞檔案。Maestro Z可以記錄這些信息，并基于細胞各種特性（如種類、密度、形態和貼附）的不同來將它們分開歸檔。細胞功能檔案可被用于細胞質控、純度分析、量化生長速率和優化實驗啟動時間點等方面。這些功能的實現無需復雜的實驗設定和分析。只需一個按鍵，Maestro Z系統就能穩定測試環境，長時間非侵入地監測細胞，提供實時的生長曲線和簡明的終點圈示。

 

 

我們將Hela細胞按照不同密度種入Maestro Z系統專用的CytoView-Z阻抗測試板內，并對其貼附、伸展及增殖的不同生長階段開展監測。如左圖所示，可以看到對應于這些階段的實時阻抗記錄。其中任意時間的終點數據（如第16個小時）都可以以柱狀圖的形式單獨表示出來（如中圖）。而從右圖可以看出Hela、A549、Calu-3這三種不同細胞的生長曲線都不盡相同。

 

 

感知受體介導的快速信號傳導

經由信號傳導通路，細胞能夠接收外界的信息。胞外信號分子與細胞表面的對應受體結合后，細胞內的信號傳導就會被觸發，并最終決定細胞的行為?？缒な荏w中的家族是G蛋白偶聯受體(GPCRs）。被結合后，它們將導致細胞構象的改變并引起下游的一系列反應。這些細微的變化通常發生迅速，但其對細胞生理的重大影響卻能夠持續幾分鐘至幾個小時。通過阻抗檢測，我們能夠將其捕獲并量化。Maestro Z的高靈敏度及連續監測特性，賦予您測試細胞信號傳導動態的能力，無論這個過程有多久。

 

如左圖所示，我們將Calu-3細胞培養在阻抗檢測板中，隨后加入不同濃度的異丙腎上腺素（一種強效β腎上腺素受體拮抗劑，圖中青色所示），并觀察阻抗值的實時變化。如果我們將20分鐘時間點的數據做成柱狀圖（如中圖所示），可以看到藥物濃度組的阻抗值在那時已經降到了，而藥物濃度組則已經回復到了基線值。我們還可以探索不同機理的化合物對于細胞信號傳導的不同作用。如右圖所示，橙色標識的組胺處理組（100µM）很迅速地出現了短時間的阻抗值降低；而灰色標識的細胞松弛素處理姐，由于其細胞周期停止及肌動蛋白合成受抑制，則表現出前高后低的阻抗變化規律。

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