小鼠骨細胞采用膠原酶消化法制備而來，小鼠骨細胞分離自骨組織；骨組織的細胞成分包括骨原細胞、成骨細胞、骨細胞和破骨細胞。只有骨細胞存在于骨組織內，其他三種細胞均位于骨組織的邊緣。骨細胞（Osteocyte）是人體骨骼中最主要的細胞成分。在成年人骨骼中，骨細胞占細胞總數量的90%～95%，大約是成骨細胞數量的20倍。骨細胞生長在骨骼內部的骨基質中。骨細胞的細胞體呈梭形或類圓形，位于基質構成的骨陷窩內。與神經細胞類似，每個骨細胞具有大量向外延伸的突觸，而這些突觸均位于由骨基質構成的骨小管結構中。通過這些突觸，骨細胞能夠與骨表面的細胞、周圍其它的骨細胞進行“交流”。普遍認為，骨細胞起源于成骨細胞。在骨形成的終末階段，成骨細胞將可能有3種不同的歸宿：分化成為骨細胞、轉移至骨表面成為暫不活動的成骨細胞、進入程序死亡過程（凋亡）。骨細胞為扁橢圓形多突起的細胞，核亦扁圓、染色深。胞質弱嗜堿性。電鏡下，胞質內有少量溶酶體、線粒體和粗面內質網，高爾基復合體亦不發達。骨細胞夾在相鄰兩層骨板間或分散排列于骨板內。相鄰骨細胞的突起之間有縫隙連接。在骨基質中，骨細胞胞體所占據的橢圓形小腔，稱為骨陷窩，其突起所在的空間稱骨小管。相鄰的骨陷窩借骨小管彼此通連。骨陷窩和骨小管內均含有組織液，骨細胞從中獲得養分。

1.吸出T25細胞培養瓶中的培養基，用PBS清洗細胞一次；

2.添加0.25%消化液1mL至T25培養瓶中，輕微轉動培養瓶至消化液覆蓋整個培養瓶底后，吸出多余消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后，再加入5ml培養基終止消化；

3.用吸管輕輕吹打混勻，按1:2比例接種T25培養瓶傳代，然后補充新鮮的培養基至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養；

4.待細胞貼壁后，培養觀察；之后每2-3天換液一次新鮮的培養基。

備注：由于實驗所用試劑、操作環境及操作手法的不同，以上方法僅供各實驗室參考

客戶在細胞培養過程中，有任何技術問題可以技術服務電話： 按 2，我們隨時給予解答。

1.培養基于4℃條件下可保存3-6個月。

2.在細胞培養過程中，請注意保持無菌操作。

3.傳代培養過程中，消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。

4.運輸用的培養基（灌液培養基）不能再用來培養細胞，請換用按照說明書細胞培養條件新配制的培養基來培養細胞。