小鼠脈絡膜微血管內皮細胞采用膠原酶-混合消化法結合密度梯度離心法、最后通過內皮細胞專用培養基培養篩選制備而來，小鼠脈絡膜微血管內皮細胞分離自眼球脈絡膜組織；脈絡膜在視網膜和鞏膜之間，含有豐富血管和色素細胞，對外力沖擊的耐受性較視網膜差，當眼球受到從前面來的外力的沖擊作用通過玻璃體傳到后極部時，堅硬的鞏膜在其外面又有抵抗作用，使脈絡膜在內外兩種作用夾攻下而發生破裂和出血。脈絡膜呈暗褐色，圍繞視神經乳頭部有照膜，為青綠色帶金屬光澤的三角形區。脈絡膜是眼球中膜的后2/3處的薄膜，由纖維組織、小血管和毛細血管組成，軟而薄，棕紅色，在鞏膜和視網膜之間，續連于睫狀體后方。脈絡膜的血循環營養視網膜外層，其含有的豐富色素起遮光暗房作用。主要功能是營養視網膜外層及玻璃體，并有遮光作用，使反射的物象清楚。同時對視覺系統起保護作用，對整個視覺神經有調節作用。續連于睫狀體后方，含豐富的血管和色素細胞，有營養和遮光作用。脈絡膜新生血管(choroidal neovascularization，CNV)已成為眼科學領域的研究熱點之一，目前多數體外研究應用的是人臍靜脈內皮細胞或主動脈內皮細胞等容易得到的大血管內皮細胞。由于血管內皮細胞具有器官特異性和組織特異性，用大血管內皮細胞的研究結果很難客觀、準確地解釋CNV的發生機制。因此，建立脈絡膜微血管內皮細胞(choroidal microvascular endothelial cells，CEC)體外培養體系，對深入研究CNV相關疾病具有十分重要的價值。

1.吸出T25細胞培養瓶中的培養基，用PBS清洗細胞一次；

2.添加0.25%消化液1mL至T25培養瓶中，輕微轉動培養瓶至消化液覆蓋整個培養瓶底后，吸出多余消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后，再加入5ml培養基終止消化；

3.用吸管輕輕吹打混勻，按1:2比例接種T25培養瓶傳代，然后補充新鮮的培養基至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養；

4.待細胞貼壁后，培養觀察；之后每2-3天換液一次新鮮的培養基。

備注：由于實驗所用試劑、操作環境及操作手法的不同，以上方法僅供各實驗室參考

客戶在細胞培養過程中，有任何技術問題可以技術服務電話： 按 2，我們隨時給予解答。

1.培養基于4℃條件下可保存3-6個月。

2.在細胞培養過程中，請注意保持無菌操作。

3.傳代培養過程中，消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。

4.運輸用的培養基（灌液培養基）不能再用來培養細胞，請換用按照說明書細胞培養條件新配制的培養基來培養細胞。