NBS4926 EZ poly™DNA/RNA轉染試劑
- 公司名稱 上海諾寧生物科技有限公司
- 品牌 NoninBio
- 型號 NBS4926
- 產地
- 廠商性質 經銷商
- 更新時間 2023/12/14 20:27:21
- 訪問次數 113
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供貨周期 | 現貨 | 應用領域 | 醫療衛生,環保,生物產業,農林牧漁,制藥/生物制藥 |
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EZ poly™DNA/RNA轉染試劑
產品編號 | 產品名稱 | 包裝規格 |
NBS4926-0.5ml | EZ poly™DNA/RNA轉染試劑 | 0.5ml |
NBS4926-1ml | EZ poly™DNA/RNA轉染試劑 | 1ml |
NBS4926-5ml | EZ poly™DNA/RNA轉染試劑 | 5x1ml |
產品簡介:
EZ poly™DNA/RNA轉染試劑是一款高性能、高品質的通用型基因轉染試劑,既可用于傳送質粒DNA,又具有較強的RNA轉染能力。與其它轉染試劑相比,具有不受血清影響、毒性低、穩定性好、轉染簡單易行、重復性好等優點。
應用范圍:
EZ poly™DNA/RNA轉染試劑可適用于眾多較難轉染細胞株的DNA/siRNA轉染、瞬時轉染及穩定轉染。適用于多種貼壁細胞,特別適用于各種較難轉細胞如L929、NIH3T3、MCF-7和A549等,均可得到較高的轉染效率,且重復性好。
保存條件:
2-8℃保存一年
運輸:
常溫運輸
質粒DNA的轉染:
以24孔板為例,請參考表1的轉染規模調整,步驟如下:
1 | 細胞接種: 每孔接種0 . 5 ~ 1 . 0 × 105 個細胞,細胞培養 12~24小時,使轉染時細胞密度達到60~70%融合度 |
2 | 質粒稀釋: 將0.4 µg質粒稀釋于Opti-MEM培養基中,終體積10 µL |
3 | 復合物制備: 按比例取適量EZ poly™DNA/RNA轉染試劑稀釋于Opti-MEM培養基中,終體積10µL,室溫孵育5分鐘后與質粒稀釋液混勻 |
4 | 室溫靜止20分鐘 |
5 | 每孔20 µL復合物加入細胞培養板中,混勻,37℃培養18~48小時后檢測基因表達,無需更換培養基 |
siRNA的轉染:
轉染步驟與DNA相同,請參考表1的轉染規模進行調整,所有數量和體積均是按孔計算。轉染高密度細胞可獲得高轉染效率、高表達水平和低細胞毒性。
質粒DNA和siRNA的轉染優化:
可通過改變細胞密度、DNA/siRNA濃度及EZ ploy™DNA/RNA轉染試劑濃度對轉染進行優化。保證細胞融合度在60%以上,EZ poly™DNA/RNA轉染試劑(µL):DNA (µg)可以在1:1和5:1之間調整;EZ poly™DNA/RNA轉染試劑(µL): siRNA (pmol)可以在0.02:1和0.15:1之間調整。
表1. 不同培養板所需轉染試劑和DNA/siRNA的用量
培養板 | 單孔面積 | 接種 培養基 | Opti-MEM 稀釋后終體積 | DNA轉染 | siRNA轉染 | ||
試劑用量 | DNA | 試劑用量 | siRNA | ||||
96孔板 | 0.3cm2 | 200µL | 2×5µL | 0.4µL | 0.2µg | 0.5µL | 7.5pmol |
24孔板 | 2.0cm2 | 500µL | 2×10µL | 0.8µL | 0.4µg | 1.0µL | 15pmol |
12孔板 | 4.0cm2 | 1mL | 2×20µL | 1.6µL | 0.8µg | 2.0µL | 30pmol |
6孔板 | 10.0cm2 | 2mL | 2×50µL | 2.0µL | 1.0µg | 4.0µL | 60pmol |
60mm | 20.0cm2 | 5mL | 2×0.1mL | 8.0µL | 4.0µg | 10µL | 100pmol |
100mm | 60.0cm2 | 15mL | 2×0.3mL | 24µL | 12µg | 30µL | 300pmol |