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親和層析填料

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上海聯(lián)贏生物科技有限公司是一家實驗室產(chǎn)品專業(yè)服務(wù)商,致力于為生命科學、生物技術(shù)、藥物研究、醫(yī)學診斷、醫(yī)療器械等領(lǐng)域提供專業(yè)技術(shù)服務(wù)。我們的產(chǎn)品主要包括分析儀器、實驗室設(shè)備、試劑、耗材和軟件等,期待與志同道合的行業(yè)精英共同合作,技術(shù)創(chuàng)新,為中國生命科學領(lǐng)域研究者提供更好的綜合解決方案。

分析儀器、實驗室設(shè)備、試劑、耗材

供貨周期 兩周 應(yīng)用領(lǐng)域 生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥,綜合

親和層析填料親和層析是基于生物分子與其他配基分子之間(如抗原與抗體、酶與底物、激素與受體、核酸中的互補鏈、多糖與蛋白復(fù)合體等)的特異性吸附原理建立和發(fā)展起來的。通過介質(zhì)上的配基與目標分子之間的特異性吸附來實現(xiàn)純化目標分子的目的。由于這種特異性的作用力,親和層析具有高度選擇性、高活性回收等特點。

 

1. His標簽蛋白

過渡態(tài)金屬離子(Cu2+>Ni2+>Zn2+>Co2+)能夠與電子供體,如N、S、O等原子以配位鍵結(jié)合,金屬離子上剩余的空軌道是電子供體的配位點,在溶液中會被水分子或陰離子占據(jù),當?shù)鞍踪|(zhì)表面氨基酸殘基(His)與金屬離子的結(jié)合力較強時,氨基酸殘基的供電原子就會與金屬離子結(jié)合形成復(fù)合物,取代原先結(jié)合的水分子或陰離子,這樣就能使蛋白質(zhì)分子結(jié)合在固體表面。His標簽蛋白的His和介質(zhì)結(jié)合,由于蛋白質(zhì)表面的氨基酸的種類、數(shù)量、位置和空間構(gòu)象不同,因而具體使用時根據(jù)金屬配基的親和力大小不同,選擇不同的金屬配基進行分離純化。

圖片5.png

★螯合離子(和His結(jié)合力)Cu2+>Ni2+>Zn2+>Co2+,其中:Cu2+結(jié)合力強,Ni2+常用,Co2+結(jié)合力較弱而分辨率高。

根據(jù)螯合方式不同,又分為IDA,IMAC,TED三種。

圖片6.png

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2. GST標簽蛋白

GST能特異的與GSH結(jié)合,表現(xiàn)為酶和底物的作用原理,利用這個原理,將GST做成標簽表達出融合蛋白,與GSH配基的親和介質(zhì)特異性結(jié)合,從而純化出目標蛋白。GST融合蛋白純化的特點是:純度高,純化條件溫和保持蛋白活性,促進蛋白可溶性表達等。

 

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3. C3H7NO3蛋白酶

C3H7NO3蛋白酶純化親和介質(zhì),是將C3H7NO3蛋白酶的廣譜抑制劑對氨基苯甲醍偶聯(lián)在瓊脂糖微球Focurose FF和高強度交聯(lián)的瓊脂糖Focurose 4FF制備而成,稱為Benzamidine Focurose FF(LS)和Benzamidine Focurose 4FF(HS)。

 

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4. Protein A/Protein G

將Protein A和Protein G等物質(zhì)偶聯(lián)在高強度交聯(lián)瓊脂糖上,廣泛用于抗體的純化。

 

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5. Plasmid

質(zhì)粒DNA是一類能在細菌染色體外自主復(fù)制的環(huán)形雙鏈DNA分子。不同類型的質(zhì)粒DNA分子量大小不同,大的可達到10^5kDa,小的則僅為10^3kDa左右。質(zhì)粒DNA的構(gòu)型一般分為超螺旋、幵口環(huán)狀或線性3種,此外它們各自還可能會形成聚體。初步純化的質(zhì)粒DNA溶液中常混有3種構(gòu)型,并且摻雜一定量的蛋白質(zhì)、RNA、內(nèi)毒素以及宿主基因DNA,這些雜質(zhì)會影響后續(xù)的應(yīng)用,因此質(zhì)粒DNA需要進一步精細純化。我公司具備成熟的質(zhì)粒純化整體解決方案(三步法、兩步法)和產(chǎn)品服務(wù)。Plasmid系列填料純化原理是利用配基的嗜硫吸附,適用于分離純化閉環(huán)的超螺旋質(zhì)粒DNA。

 

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6. 預(yù)活化

預(yù)活化介質(zhì)也稱為親和介質(zhì)活化中間體,是在各種交聯(lián)強度瓊脂糖的基礎(chǔ)上,通過不同的偶聯(lián)方法鍵合上不同的活性基團(活性間隔臂)。通過活性基團可進一步偶聯(lián)各種配基,用于制備其它介質(zhì)(主要是親和介質(zhì))及固定相應(yīng)物質(zhì),用戶可根據(jù)自己需求把待偶聯(lián)的配基很容易地偶聯(lián)上去,避免了前期接活性基團的繁瑣工序。

 

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