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子宮內膜異位癥模型構建

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 上海申知心生物科技有限公司(簡稱“申知心生物”),是一家“提供全面、系統、高質量的心血管相關疾病研究服務平臺”的創新型企業,致力于搭建基礎醫學和臨床轉化服務體系并開展基于藥效學評價的臨床前CRO服務,提供各種成熟的心血管疾病模式動物。公司投資建立的動物實驗中心,建有清潔級、SPF級動物實驗室,面積約1800平米。為科研院所、臨床科室及醫藥企業提供專業定制化的動物模型、藥物篩選、藥理藥效評價、安全性評價、病理分析及分子生物學檢測等服務。

 

 申知心生物擁有專業的技術團隊,核心成員來自中科院、復旦、交大、同濟等國內重點高校及科研機構,并與心血管病研究所保持密切合作,能夠提供完善的實驗技術咨詢與服務。

 

 

 

 

心血管疾病動物模型,動脈粥樣硬化模型,高血脂癥動物模型,缺血性心臟病動物模型,心肌病動物模型,高血壓動物模型,肺動脈高壓動物模型,心血管模型,心血管相關原代分離

一、建模方法分類

1. 自體移植模型(主流方法)

基于"經血逆流種植學說",通過手術將自體子宮組織移植至腹腔或特定部位誘導異位生長。

  • 經典操作步驟

    1. 動物選擇:雌性未交配SD或Wistar大鼠(180-270g),動情周期規律

    2. 術前處理:皮下注射苯甲酸雌二醇(30-150 μg/kg)以促進子宮內膜增殖

    3. 組織獲取:麻醉后開腹切除1-1.5cm子宮角,縱行剖開并修剪成5×5mm內膜片

    4. 移植部位

  • 腹壁肌肉層(血管豐富區,成功率>80%)

  • 卵巢附近或子宮骶韌帶(模擬盆腔EMT)
    5. 固定方式:無損傷縫線將內膜面朝向腹腔縫合,保留肌層以促進血管生成

  • 術后處理

    • 預防性抗生素(如青霉素)及二次雌激素注射維持激素環境

    • 4-8周后開腹評估移植物體積(≥8mm3)及病理特征

2. 同種異體移植模型

用于藥物篩選時避免供體-受體個體差異干擾:

  • 操作要點

    • 供體鼠子宮內膜碎片經RPMI1640培養基處理后腹腔注射至受體鼠

    • 受體鼠需同步激素處理(雌二醇每4天注射,共2次)

  • 優勢:標準化移植組織量,適合高通量藥效評價

3. 誘導型模型

通過激素或藥物干預模擬EMT病理環境:

  • 激素誘導

    • DES(二乙基甲合資藥物)聯合手術,促進血管生成及炎癥反應

    • 雌孕激素比例失調:高劑量雌二醇+低孕酮環境

  • 藥物干預

    • GnRH拮抗劑(如Cetrorelix)緩釋植入,誘導慢性低雌激素狀態

    • 亮丙瑞林微球抑制垂體-性腺軸,評估病灶wei縮效果

4. 基因工程模型

新興技術用于機制研究:

  • 熒光標記模型:CFP轉基因鼠子宮內膜碎片移植,實現病灶實時追蹤

  • 基因敲除模型:針對VEGF、COX-2等靶點構建,但成本高且周期長

二、模型驗證指標

1. 形態學評估

  • 肉眼觀察:移植物呈囊狀隆起,內含黏液或血性液體,血管網豐富

  • 體積測量:游標卡尺或光聲成像(PAI)動態監測病灶大小及氧飽和度

  • 組織病理學

    • H&E染色:腺體擴張、乳頭狀增生,腺上皮柱狀化

    • Masson染色:評估纖維化程度

    • PAS染色:檢測糖原沉積(異位內膜特征)

2. 生化與分子指標

  • 激素水平

    • 血清雌二醇(E2)升高,孕酮(P4)降低,E2/P4比值失調

    • 垂體GnRHR mRNA表達下調提示中樞調控異常

  • 炎癥與血管生成

    • IL-6、TNF-α、COX-2等促炎因子升高

    • VEGF、FGF等血管生成標志物過表達

  • 增殖與凋亡

    • PCNA、Ki67陽性率增加(>30%)

    • Bcl-2/Bax比值失衡,Caspase-3活性降低

3. 功能學評估

  • 生育影響:模型鼠妊娠丟失率升高,胚胎著床數減少

  • 疼痛行為:機械性痛閾降低(需結合Von Frey纖維測試)


三、模型比較與適用場景

模型類型優勢局限性適用場景
自體移植模型操作簡單,成本低,成功率>80%易致腹腔粘連,病理異質性藥物篩選、機制初步研究
同種異體模型標準化程度高需嚴格免疫匹配藥效對比研究
GnRH拮抗劑模型模擬激素治療反應周期長(3-6個月)新型激素療法開發
熒光標記模型實時動態監測需特殊設備,成本高昂病灶遷移機制研究

四、關鍵注意事項

  1. 動物選擇

    • 優先選用SD大鼠(性周期穩定,耐受性強)

    • 術前確認動情周期(陰道涂片法),選擇動情前期手術

  2. 技術細節

    • 移植組織需保留基底膜以維持腺體結構

    • 縫合時避免壓迫血管,確保血供

  3. 倫理與質量控制

    • 嚴格無菌操作,術后鎮痛(如布洛芬混懸液)

    • 設立假手術對照組(注射脂肪組織替代內膜)

  4. 創新方向

    • 結合MRI或PAI實現無創監測

    • 開發類器官共培養模型模擬異位微環境


五、典型應用案例

  1. 藥物評價

    • GnRH激動劑GenSci006顯著縮小病灶體積(抑制率>60%),降低E2水平

    • 中藥復方(如加味沒竭片)通過調控ERα/ERβ平衡抑制異位內膜增殖

  2. 機制研究

    • 熒光模型揭示VEGF介導的血管新生是病灶存活關鍵

    • 基因表達譜分析發現EMT相關通路(Wnt/β-catenin)異常激活




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