動物選擇

一般選擇4-6周齡Nude裸鼠,需要提前到SPF環境中適應1周。

接種部位與接種細胞量

接種部位常為皮下,靜脈或原位;細胞量一般是5*106個/200ul,但是不同的細胞系的接種量略有差別。

成瘤時間

皮下接種的細胞一般會在1-2周成瘤,一般不會超過1個月;尾靜脈和腹腔接種的細胞一般也是1周左右,需要密切觀察動物的體重與狀態進行判斷。

為什么腫瘤不長?

如果細胞接種后超過預期的觀察時間仍未成瘤,需要從以下方面進行排查原因:

一是細胞活力,細胞活力是影響腫瘤形成的重要原因,活力不夠不能成瘤,因此細胞消化下來PBS清洗后要盡快接種;

二是動物選擇,選擇的裸鼠周齡不宜過大,否則也會增大成瘤難度(如果還未成瘤建議更換缺陷程度更高的Nod-scid小鼠,NOG小鼠);

三是飼養環境,環境影響動物狀態,狀態差的鼠容易發生死亡,不易成瘤。

為什么瘤子長起來又消失?

很可能開始我們觀察到的腫瘤是炎癥反應,到后來腫瘤細胞被小鼠自身吸收,需要繼續觀察腫瘤細胞吸收之后是否還能長出來,長不出來建議分析上述原因重新實驗。

需要觀察什么?

在腫瘤長出后，需要密切觀察動物的狀態，體重和瘤體積。瘤體積的測量一般采用公式V=ab2/2進行計算。動物體重的增加活著減少量，直接反應著動物的整體狀態，評估腫瘤是否出現轉移等。

如何判斷腫瘤是否出現了轉移?

病理剖檢。如果腫瘤出現了轉移,在肝臟或者腎臟等組織上肉眼可見明顯轉移灶。

第二:小動物活體成像。如果接種的腫瘤細胞帶有熒光標簽或者熒光素酶,可以借助小動物活體成像儀進行觀察瘤細胞的大小和轉移情況。

第三:小動物核磁。小動物核磁技術可以更明細那地觀察到腫瘤細胞在肝臟,肺臟或者其他器官的轉移情況

哪些細胞能夠成瘤?

目前驗證過的細胞有HCT116、HePG2、A549、MKN45、AGS、 CT26 、NCI-H460、HT-29、SK-OV-3、MCF-7、B16、SGC7901、BEL-7402、BGC-823、PC-12等(待更新)。