本產(chǎn)品只用于科研不用于臨床或者人體

操作流程：

1 試劑準備

酸酒精：在100mL 70%乙醇中加入1mL 鹽酸，室溫保存。

注意：冰凍切片后，各種步驟（干燥，乙醇或甲醇固定，熱固定，使用帶電的或有粘性的蓋片）保證組織切片在染色過程中不脫落。

2 95%乙醇：在HE染色開始前，組織切片需要固定并水化。將切片置于95%乙醇中約2min，開始水化并固定組織。

注意：跳過使用95%乙醇對組織進行水化和固定，并不影響形態(tài)學上的細節(jié)。

3 水化：進一步對組織切片進行水化3~5min，并沖掉前一步殘留的乙醇。

注意：與前面步驟相似，跳過水化對于組織染色的質(zhì)量非常小。

4 蘇木素：水化后，組織切片用蘇木素染色1~3min，可根據(jù)染色結果和要求調(diào)整染色時間。蘇木素是一種基本染料，可以對細胞的酸性成分進行染色，包括核酸、粘多糖、酸性糖蛋白，將他們?nèi)境伤{-紫色。

注意：沒有蘇木素，伊紅會將組織染成亮粉紅色；顯而易見的是缺乏細胞核。組織結構很難區(qū)分，細胞內(nèi)成分幾乎都不存在，難以辨別。而上述問題，可以通過使用蘇木素進行復染。

4.1 染色較弱是由于：

4.1.1 自身溶解或者固定不好；

4.1.2 過度脫鈣；

4.1.3 染色時間不足；

4.1.4 過度脫色--- 酸與醇的比例過高或者酸乙醇脫色時間過長；

4.1.5蘇木素的作用較弱：蘇木素氧化過度（過老）或水稀釋過度；

4.1.6 漂洗溶液的污染；

4.1.7 切片過薄；

4.1.8 乙醇的去除或者染色前水的漂洗不充分。

4.2 染色過度是由于：

4.2.1 組織切片干燥；

4.2.2 蘇木素濃度過高；

4.2.3 染色時間過長；

4.2.4 載玻片粘合劑過多；

4.2.5 脫色：過弱或時間不足；

4.2.6 切片過厚；

4.2.7 熱暴露的時間過長。

5 水洗：蘇木素染色后，用水洗組織是非常重要的。這一步以及隨后的水洗，可將多余的染料，媒染劑等去除。適當?shù)钠纯梢匀コ砻娼饘俟鉂桑饘俟鉂煽勺柚固K木素的染色。

注意：跳過此步，將產(chǎn)生不好的結果，例如沉淀的形成，染液的稀釋，表面金屬光澤的存在。

6 酸酒精：酸酒精分色劑3~5sec。在蘇木素染色方法中，組織切片有意過度染色，酸酒精將去除多余的染料以及玻片上的背景染色。

注意：如果沒有此步驟，組織切片將變?yōu)榘底仙Ｊ人峤Y構，例如，膠原，將不會呈現(xiàn)明亮

的粉紅色。組織結構之間將很難區(qū)分。很難對切片做出正確的判斷。

6.1 分色過度可能是由于：

6.1.1 酸濃度過高；

6.1.2 脫色時間過長等。

6.2 分色不足是由于：

6.2.1 酸濃度過低；

6.2.2 脫色時間不足；

6.2.3 在切片上有多余的蛋白或者明膠等。

7 水洗：水洗30sec，終止酸酒精反應，進一步阻止酸酒精從組織切片上將大量蘇木素去除。

注意：如果切片沒有經(jīng)過漂洗，酸酒精可以過度脫色。如果不去除脫色劑，酸酒精將持續(xù)從組織切片上去除蘇木素。