人糖缺失性轉(zhuǎn)鐵蛋白 CDT ELISA試劑盒

操作流程如下：

（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設(shè)3個平行孔；設(shè)兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細胞裂解液         100μl；另設(shè)一個空白對照孔，加入純細胞裂解液100μl。　                                                                                      

（2）酶標板置4℃，包被過夜。                                                                                                                                    

（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分 鐘，間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。                                                              

（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。                     　

（5）酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。　                                                                                                    

（6）洗板，同（4）。                                                                                                                                              　

（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。　                                                                           

（8）酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。                                                                                                    　

（9）洗板，同（4）。　                                                                                                                                              

（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應15-20min。　                                                           

（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。                                                                                                               　

（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，最終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃    痕或指印等造成的光干擾。                                                                                                                      

（13）產(chǎn)品僅用于科研數(shù)據(jù)處理：在得出標本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標     準。