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化工儀器網(wǎng)>產(chǎn)品展廳>試劑標(biāo)物>行業(yè)專用試劑>生物試劑>B-P-00002 Biozellen 3D細(xì)胞、類器官培養(yǎng)基質(zhì)膠

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B-P-00002 Biozellen 3D細(xì)胞、類器官培養(yǎng)基質(zhì)膠

具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

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上海生物科技有限公司是服務(wù)于高校和科研院所生命科學(xué)基礎(chǔ)研究、生物醫(yī)藥研發(fā)、細(xì)胞生物學(xué)產(chǎn)業(yè)化等相關(guān)領(lǐng)域的高新生物技術(shù)企業(yè)。
我們致力于生命科學(xué)研究、活體動(dòng)物、大規(guī)模生物制品生產(chǎn)、基因和細(xì)胞治療領(lǐng)域客戶,提供細(xì)胞體內(nèi)可代謝的核酸試劑;inviCELL™Platelet lysate無動(dòng)物血清產(chǎn)品旨在支持廣泛的細(xì)胞擴(kuò)增和生產(chǎn),包括培養(yǎng)間充質(zhì)干細(xì)胞和多種免疫細(xì)胞系等,為制藥公司或者生物技術(shù)公司提供無血清細(xì)胞培養(yǎng)規(guī)模生產(chǎn)服務(wù);提供以植物生物為平臺(tái)基因序列全部人源化、細(xì)胞培養(yǎng)可分解的3D基質(zhì)膠產(chǎn)品;提供內(nèi)毒素≦ 1.0 EU/mL、對(duì)細(xì)胞無毒性影響、高純度的一型膠原蛋白產(chǎn)品。



細(xì)胞、3D細(xì)胞培養(yǎng)、血清

純度 ≥95% 供貨周期 現(xiàn)貨
規(guī)格 10ml-kit 貨號(hào) B-P-00002
應(yīng)用領(lǐng)域 生物產(chǎn)業(yè) 主要用途 3D細(xì)胞、類器官培養(yǎng)

Biozellen®3D 細(xì)胞培養(yǎng)基質(zhì)膠套裝

基質(zhì)膠封面.jpg

一、產(chǎn)品描述
Biozellen®3D 細(xì)胞培養(yǎng)基質(zhì)膠套裝包含整套基質(zhì)膠、膠體固定液、膠體溶解液,可應(yīng)用到 3D 細(xì)胞培養(yǎng)與
微環(huán)境應(yīng)用等;本試劑盒操作便利且可調(diào)控基質(zhì)膠硬度進(jìn)行多種細(xì)胞培養(yǎng)測(cè)試;植物膠體可快速形成水凝
膠, 請(qǐng)操作前詳細(xì)閱讀此使用指南。
Biozellen®3D 細(xì)胞培養(yǎng)基質(zhì)膠套裝為植物來源,無動(dòng)物成分)
二、應(yīng)用
3D 細(xì)胞球體培養(yǎng)試驗(yàn)
•小鼠皮下成瘤
•細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)
•適合用于 3D 細(xì)胞藥物篩檢平臺(tái)
•細(xì)胞生長和分化
•代謝/毒理學(xué)研究
三、特點(diǎn)
•為植物源材料,無任何動(dòng)物成分
•基質(zhì)膠氨基酸序列人源化
•成分分明,無生長因子和含生長因子可選擇
•可調(diào)控基質(zhì)膠的膠體硬度進(jìn)行多種細(xì)胞培養(yǎng)
•生物相容性好,不會(huì)引起機(jī)體或細(xì)胞免疫反應(yīng);
•3D培養(yǎng)結(jié)束后基質(zhì)膠可以溫和融化,并保留3D細(xì)胞/類器官結(jié)構(gòu)完整性
•無人畜共患病或毒素風(fēng)險(xiǎn)
膠體高度透明,便于觀察表征;
2年保存時(shí)間;4度運(yùn)輸
四、試劑盒組分

B-P-00002-2B-P-00002-4B-P-00002-10
(對(duì)應(yīng)數(shù)量和內(nèi)容)
貨號(hào).
Components
Amount
Content
B-P-00002-A
A 基質(zhì)膠 (2X)
4820
0.5mL / tube
B-P-00002-C
C 緩沖溶液 (10X)
1、2、1
1*10ml2*10ml1*50 mL / BT
B-P-00002-D
D 緩沖溶液 (10X)
1、2、1
1*10ml2*10ml1*50 mL / BT




五、使用步驟:
A、試劑制備
A 基質(zhì)膠:將 A 基質(zhì)膠溶于 37℃水浴槽回溫 10 分鐘, 確認(rèn)*融解.
C 緩沖溶液(1X)制備:使用前將 10X C 緩沖溶液用冰的無細(xì)胞培養(yǎng)液(例如: 無血清 DMEMopt-MEM)
備成 1X C 緩沖溶液。(不要用 PBS 稀釋 C 緩沖液) .
D 緩沖溶液(1X)制備: 使用前用冷的 1x PBS 稀釋 10X D 緩沖溶液至 1X D 緩沖溶液.
BBiozellen®3D 細(xì)胞培養(yǎng)基質(zhì)膠的制備
全部步驟需要在無菌環(huán)境內(nèi)操作,操作步驟如下:
1. 24 孔培養(yǎng)板放置于冰上預(yù)冷半小時(shí)。
2. 細(xì)胞計(jì)數(shù)后取 2×105~2×107 細(xì)胞與 0.5 毫升 37℃ 細(xì)胞培養(yǎng)基均勻混合,并與 0.5 毫升 37A 膠按
1:1 等比例均勻混合,最終細(xì)胞密度 1*105~1*107cells/mL
:請(qǐng)選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)溶液與條件進(jìn)行試驗(yàn)。
3.20-40 微升步驟 2 的混合液滴于 步驟 1 預(yù)冷的培養(yǎng)板上,膠體將于 5 分鐘內(nèi)成膠。 注: 測(cè)試膠體
是否成膠,可用微量吸管尖溫和的觸碰膠體表面進(jìn)行確認(rèn)。
4.待膠體成膠后,添加 1 毫升冰的 1X C 緩沖溶液,并蓋過步驟 3 的膠溶液,固定 15 分鐘。
5.15 分鐘固定后,小心的吸取 C 緩沖溶液并置換為適合此細(xì)胞生長之培養(yǎng)基溶液
6 將含有細(xì)胞的膠于 37°C 二氧化碳培養(yǎng)箱內(nèi)進(jìn)行 7~14 天的培養(yǎng),并觀察細(xì)胞球體的形成,按正常培養(yǎng)基
更換頻率進(jìn)行更換操作。
C、溶膠與收集細(xì)胞球體準(zhǔn)備程序
小心的將培養(yǎng)基吸取移除,并用 1X PBS 進(jìn)行清洗。
小心的將 1X PBS 吸取移除,并添加 1 毫升冰的 D 緩沖溶液,蓋過膠滴于室溫反應(yīng) 5 分鐘。
溫和的用 1 毫升移液管吸取,直到膠滴*溶解。
將含有細(xì)胞球體的溶液吸入 1.5 毫升離心管,用 1000 rpm 的轉(zhuǎn)速離心 10 分鐘,移除上清液體并收集細(xì)胞
球體做分析。
D、收集單顆細(xì)胞準(zhǔn)備程序
在分離單細(xì)胞前,先按上述溶膠與收集細(xì)胞球體準(zhǔn)備程序進(jìn)行操作
1. 添加 trypsin-EDTA 并與收集的細(xì)胞球體于 37°C 混合反應(yīng)。
2. 1 毫升移液管混合,直到細(xì)胞體*分解。
3. 待細(xì)胞球體*分解,加入 3 倍體積的 1X PBS,并用 1000 轉(zhuǎn)的轉(zhuǎn)速進(jìn)行離心 10 分鐘,并移除上清
液體收集沉淀的單細(xì)胞做分析。
E、細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備程序
1. 準(zhǔn)備 Transwell 裝置及無血清 DMEM 細(xì)胞培養(yǎng)液 (用于稀釋 A )
2. A (2X) (貨號(hào):B-P-00002-A) 置于 37 ℃水浴槽回溫 10 分鐘,確認(rèn)*融解。
3. 用無血清 DMEM 細(xì)胞培養(yǎng)液將 A (2X)稀釋 50 倍。
4. 根據(jù) Transwell 上室底部面積加入 100-120 ul/cm2稀釋后的 A 膠稀釋液到 Transwell 上室中。
5. 將步驟 4 4 ℃冰箱孵育 30 分鐘。
6. 將多余的稀釋液吸出,并在 Transwell 上室中加入無血清的癌細(xì)胞系細(xì)胞懸浮液使細(xì)胞濃度約 7.5 x 104
cells/well.
7. Transwell 下室中加入含 10 %血清的細(xì)胞培養(yǎng)液做為 chemoattractant,吸引癌細(xì)胞系進(jìn)行遷移。
F、小鼠皮下成瘤實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備程序
1. A (2X) (貨號(hào):B-P-00002-A) 置于 37 ℃水浴槽回溫 10 分鐘,確認(rèn)*融解。
2. C 緩沖溶液(10X) 貨號(hào):B-P-00002-C)與冰的無血清細(xì)胞培養(yǎng)液 (例如: 無血清 DMEM或內(nèi)含VEGF
heparin 的無血清 DMEM) 1:4 比例均勻混合配置。(例如:1 ml C 緩沖溶液(10X) 4 ml 無血清 DMEM
混合,不可用 PBS 稀釋)
3. A (2X) 與約 2*106 cells/ml 的癌細(xì)胞系懸浮液按 1:1 等比例均勻混合配置,癌細(xì)胞系懸浮液最終
濃度約為 106 cells/ml
4. 選用 21-25 G 的針頭 (避免破壞細(xì)胞),抽取 0.2-0.3 ml 預(yù)冷稀釋后的 C 緩沖溶液。(C 緩沖溶液用于 A
膠成膠反應(yīng))
5. 使用步驟 4 的同一支針管,再抽取 0.1-0.7 ml 含細(xì)胞的 A 膠混合液,在冰上孵育五分鐘。
6. 以皮下注射方式注射 0.3-1.0 ml 至小鼠。(需一次注射完含 C 緩沖溶液的 A 膠混合液)
1: 注射體積可依不同實(shí)驗(yàn)?zāi)康淖稣{(diào)整,若為血管生成研究注射體積需至少 0.5 ml
2: 此步驟依實(shí)驗(yàn)需求可執(zhí)行或不執(zhí)行,若需呈現(xiàn)明顯的皮下注射隆起效果,可于注射完畢后,在小鼠注
射部位冰敷 5-10 分鐘。
7. 培養(yǎng)一至三周后可摘取接種的腫瘤組織。
注 3: 若為血管生成研究,應(yīng)注射含 VEGF 及 heparin 的 A 膠,以促進(jìn)血管生成。約三天后,可摘取含有
新血管生成的腫瘤組織。
六、案例分享
A.形成 3D 腫瘤球體成功案例分享

基質(zhì)膠案例.jpg















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