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高效液相色譜法（HPLC）具有高壓、高效、高速、高靈敏度、高選擇性等特點，廣泛應用于醫藥、環保、石化、食品、化工等行業，是現在分離分析的重要方法，本文著重介紹HPLC的工作原理、基本組成及高效液相色譜名詞術語，使新學者快速了解高效液相色譜知識，在日常操作中理論與實踐結合，確保HPLC的高效運行、快速分析。

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HPLC工作原理

100多年前植物學家Tswett(茨維特) 他將植物色素的石油醚提取液倒入裝有碳酸鈣的直立玻璃管，再加入石油醚使其自由流下,結果色素中各組份互相分離形成各種不同顏色的譜帶，Tswett用希臘語chroma(色)和graphos(譜)描述他的

實驗方法，即現在的Chromatography(色譜法)。

色譜法是通過是利用混合物中各組份在不同的兩相中溶解、分配、吸附等化學作用性能的差異，當兩相作相對運動時，使各組分在兩相中反復多次受到上述各作用力而達到相互分離，色譜法的本質是分離分析方法

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液相色譜儀是一種用液體作為流動相的色譜分離分析的方法，是基于金典色譜的理論，使用高壓泵、化學柱和固定相分離柱以及高靈敏度的檢測器，液相色譜儀和氣相色譜儀之間有什么區別呢？這里小編就來給大家介紹一下，僅供參考，希望對大家有所幫助！

液相色譜儀和氣相色譜儀之間的區別是：1、分析對象之間的區別

GC:適用于氣化程度高，熱穩定性好，沸點低的樣品;但對于沸點高，揮發性差，熱穩定性差，離子和高聚物的樣品，特別是對于大多數生化樣品而言，檢測不到20％的有機物質。 HPLC：適用于溶解后可制成溶液的樣品（包括有機介質溶液）,它不受樣品的揮發性和熱穩定性的限制,它是一種分子量大，氣化困難，熱穩定性差的生化樣品，聚合物和離子。類型樣品可用于廣泛的應用，占有機物的80％。

2、流動相位差異的差異GC：流動相是惰性的，氣體組分與流動相無親和力，僅與固定相相互作用。HPLC：流動相為液體，流動相和組分具有協同作用力，可提高色譜柱的選擇性，提高分離度，對分離起積極作用。此外，流動相有很多種，房間的選擇范圍很廣。改變流動相的極性和pH也可以調節分離。當選擇具有不同比例的兩種或更多種液體作為流動相時，可以提高分離選擇性。

3.運行條件的差異GC：變暖操作。HPLC：室溫，高壓。

使用液相色譜儀時應注意什么？更換流動相時，必須按照規定的程序進行，否則可能會出現問題，改變流動相有三種情況：互溶性的流動相的更換、無互溶性的流動相的更換和緩沖溶液的更換，在種情況下，使用準備更換的流動相*清潔吸濾器，然后打開儀器的排水閥并按下清洗按鈕清潔泵中的流動相。

將吸濾器放入新的流镲中并減慢流量。清潔幾分鐘后，關閉排水閥。接下來清潔色譜柱和檢測器池，直到基線穩定。對于第二種情況，首先使用與新舊流動相兼容的中間清潔溶液進行清潔，然后使用新的流動相進行清潔，與種情況相同。對于第三種情況，應使用蒸餾水作為中間清潔溶液，然后使用新的流動相清洗。

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