基因組DNA提取,RNA提取,質(zhì)粒提取,DNA產(chǎn)物純化和凝膠回收,PCR/RT-PCR及qPCR產(chǎn)品,技術(shù)服務(wù)
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,食品/農(nóng)產(chǎn)品 |
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提取次數(shù) | 50次 |
游離DNA(或稱循環(huán)DNA,以下簡(jiǎn)稱cfDNA)是一種無(wú)細(xì)胞狀態(tài)的、片段化的胞外DNA,存在于血液、滑膜液和腦脊液等體液中,主要以為核小體的形式存在,片段長(zhǎng)度主要為178 bp及其倍數(shù)。cfDNA在正常人的血液中含量甚微,平均值為13 ng/ml,而當(dāng)機(jī)體在一些特殊狀態(tài)時(shí)(如患有腫瘤、自身免疫性疾病、感染性疾病、中風(fēng)、心肌梗死及妊娠等),其含量明顯上升,比如惡性腫瘤患者平均值達(dá)到180ng/ml。
適合處理的樣品為血清、EDTA-K2、EDTA-K3或ACD抗凝的血漿,不適合處理肝素抗凝的血漿。
提供負(fù)壓抽濾和離心過(guò)濾兩種方式回收DNA:
DK607-01 (50次):負(fù)壓抽濾,處理體積為4 ml,輕松獲得≥30 ng
產(chǎn)品特點(diǎn)
Buffer CFDA可作為樣品保存液,方便分次采樣和樣品的異地運(yùn)輸;
Buffer CFDA含DNA吸附基質(zhì),能有效去除細(xì)胞DNA;
無(wú)需添加Carrier RNA,回收率約70-80%(見實(shí)驗(yàn)示例);
DNA吸附柱-L6,可連接30 ml-擴(kuò)容管,負(fù)壓抽濾快速完成DNA結(jié)合和洗滌步驟,在臺(tái)式離心機(jī)上完成洗脫步驟,最小洗脫體積為25 μl。
DNA吸附柱-CS,最小洗脫體積為10 μl。
cfDNA含量甚微,濃度低于Nanodrop等微量分光光度計(jì)和常規(guī)瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)下限,建議使用Qubit熒光計(jì)測(cè)定總DNA濃度,使用Agilent Bioanalyzer 2100電泳并測(cè)定區(qū)域DNA濃度。如存在大量細(xì)胞DNA,前者明顯高于后者,兩者的比例可作為判斷能否進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)的依據(jù)之一。
改進(jìn)瓊脂糖凝膠電泳方法可觀察178 bp核小體單位DNA,同時(shí)能判斷是否有細(xì)胞核染色體DNA殘留。電泳詳細(xì)方法:瓊脂糖凝膠電泳鑒定游離DNA