特異性標記、純化ER駐留蛋白的試劑盒
- 公司名稱 富士膠片和光（廣州）貿易有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號
- 產地
- 廠商性質 生產廠家
- 更新時間 2020/9/30 17:11:17
- 訪問次數 1169
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富士膠片和光（廣州）貿易有限公司是日本富士膠片和光純藥株式會社（FUJIFILM Wako Pure Chemical Corporation）在中國的子公司，主營富士膠片和光品牌試劑產品，供應產品超50,000種，囊括了生命科學、藥品生產、品質管理領域、合成與材料、分析各個領域。
基于“想要為科研人員提供幫助”的創業初衷，富士膠片和光純藥（FUJIFILM Wako）作為一家滿足前沿研究領域需求的綜合試劑制造商，一直致力于生產和開發高品質的產品，并于2022年6月迎來了創業100周年。通過發揮企業優勢“技術力”，以及三大核心業務的試劑業務、化成品業務和臨床診斷業務來滿足學術界、企業以及醫療相關企業的廣泛需求。
憑借100 年的歷史經驗，富士膠片和光純藥（FUJIFILM Wako）在日本市場占據高份額，作為全球性的試劑供應商，以“成就科學未來之力，創造幸福源泉”為愿景，致力于高品質試劑的生產與開發。通過提供試劑，為再生醫療、癌癥、精神/神經疾病和抗體藥物等各類基礎研究和前沿研究做貢獻，并獲得 ISO9001等多項國際認證。基于可靠的技術和品質、以及科研人員之間的信賴，作為富士膠片集團的一員將不斷實現全球化發展。
主要業務——試劑
作為富士膠片和光純藥（FUJIFILM Wako）試劑業務的中國子公司，富士膠片和光（廣州）貿易有限公司可提供各個領域測試和研究用途的生命科學試劑和化學試劑。
試劑業務 | ||||||
可廣泛提供生命科學和化學領域的測試研究用產品 | ||||||
生命科學領域 | 化學領域 | |||||
● 培養基生產 ● 抗體制備 ● 定制服務 |
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● 認證標準品 ● 有機化學 |
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作為優質的試劑企業，我們可以提供滿足不同客戶需求的高品質產品。試劑業務自創業以來，已持續不斷地提供了廣泛領域的試劑產品，并致力于成為滿足前沿技術領域各項研究需求的試劑制造商。今后也將以過往技術經驗為基石，發揮作為可信賴的研究支持合作伙伴的作用。
產品一覽
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● 常規試劑 ● 有機合成試劑 ● 環境分析試劑 ● 精密分析試劑 ● 色譜試劑 | ● 生化學用試劑 ● 基因研究用試劑 ● 免疫研究用試劑 ● 病理研究用試劑 ● 細胞培養用試劑 | ● 內毒素檢測用試劑 ● 生物藥生產用培養基 ● 研究用基礎培養基 ● 定制服務 ● 設備和耗材 |
豐富的產品類目以及快速供應體系
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 | 致力于持續監測市場的需求并跟蹤世界的研究動向。為了能夠及時準確地響應客戶的需求，富士膠片和光建立了以自有品牌為中心的豐富產品體系，為各界的研究和開發領域提供細致的服務與支持 。 |
高品質的試劑提供和生產體系
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 | 試劑生產工廠以東京工廠和大阪工廠為中心，發揮優質技術力量建立的高品質生產體系。愛知工廠配備齊全的培養基生產設備，可用于生產再生醫療和生物制藥生產用的培養基。 |
優質的客戶服務和產品信息
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 | 通過定期更新的主頁網站、富士膠片和光生物微信公眾號、富士膠片和光化學分析微信公眾號，以及不定期的富士膠片和光生物視頻號、網絡研討會和線下展會，致力于為客戶提供優質的服務以及不斷更新的產品信息。 |
強化全球化事業的開展
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 | 建立日本海外銷售體系，通過提供富士膠片和光純藥（FUJIFILM Wako）優質研發力量生產的高品質產品，積極推進全球化業務。 |
企業歷史沿革
年份 | 內容 |
1922年6月 | 從武田長兵衞商店（現武田薬品工業株式會社）的化學藥品部門獨立出來，成立了武田化學薬品 株式會社 |
1940年 | 大阪工廠竣工 |
1944年 | 東京工廠竣工 |
1947年 | 更名為和光純薬工業株式會社 |
1950年 | 展開化成品業務 |
1952年 | 總部遷移至大阪 |
1960年 | 展開臨床檢測藥業務 |
1968年 | 播磨工廠竣工 |
1972年 | 公司總部竣工 |
1974年 | 成立德國和光純薬有限會社（今?FUJIFILM Wako Chemicals Europe GmbH） |
1981年 | 成立美國和光純薬株式會社（今?FUJIFILM Wako Chemicals U.S.A Corporation） |
1989年 | 建設東部配送中心 |
1991年 | 建設西部配送中心 |
2004年 | 愛知工廠竣工 |
2012年 | 成立和光純耀（上海）化學有限公司（今?富士膠片和光純藥（上海）化學有限公司） |
2015年 | 收購株式會社シバヤギ（今?群馬辦事處） |
2017年 | 成為FUJIFILM Corporation的全資子公司 |
2018年 | 更名為富士膠片和光純藥株式會社 |
2019年 | 合并IS Japan Co.,Ltd.（今?戶田辦事處） |
2022年 | 成立100周年 |
生物化學試劑、儀器和耗材
| 供貨周期 | 一個月以上 | 應用領域 | 生物產業 |
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特異性標記、純化ER駐留蛋白的試劑盒
ER-Protein Capture Kit
ER-Protein Capture kit是一款利用熒光標記物特異性標記ER駐留蛋白，再使用標簽捕獲抗體通過免疫沉淀法純化標記蛋白的試劑盒。可用于ER相關蛋白的全面鑒定與定量分析有或無刺激（例如內質網應激）下靶蛋白的ER駐留量。
※ 本產品是funakoshi基于京都大學工學研究科浜地格教授、田村朋則講師的研究成果商品化銷售的產品。
※ 本產品僅供研究使用。研究以外不可使用。
◆ER蛋白的回收方法與問題點
ER （內質網；Endoplasmic Reticulum）是一種通常在細胞內占據約20%體積的細胞器，結構非常復雜且遍布整個細胞。ER是負責細胞內蛋白質生物合成的中央細胞器，在多肽鏈合成、通過伴侶蛋白適當折疊、排除異常蛋白等，從生物合成到品質管理中起著重要作用。ER還擔任分泌路徑的一部分，是細胞膜蛋白和細胞外分泌蛋白通過的細胞器。另外，它還被認為對于脂質代謝和脂肪滴形成十分重要，因此能夠分離、鑒定并定量分析ER蛋白的方法備受期待。然而，不同于其他細胞器，特異性純化ER的的技術十分貧乏，選擇性回收ER蛋白并不容易。
ER Protein Capture Kit是由京都大學浜地格教授、田村朋則講師等開發的基于ER駐留蛋白標記技術商品化的ER蛋白選擇性標記、純化試劑盒。通過使用ER駐留蛋白標記試劑ERM （ER-localizable Reactive Molecule），可以利用熒光標記物標記ER駐留蛋白，然后通過針對該標記物的特異性抗體進行純化，選擇性回收ER蛋白。無需超速離心機等特殊的機器，僅需簡單操作便可純化ER蛋白。除了能夠通過蛋白組學進行全面鑒定外，本產品還適用于相對定量分析各種刺激處理下的ER駐留量。
◆試劑盒內容
本試劑盒由兩部分組成。
A：ER駐留蛋白標記試劑ERM
A：（本試劑與產品名稱為ERseeing、產品編號FDV-0038為同一試劑。可單獨購買，也可以用作ER成像試劑）
B：標簽捕獲抗體（純化兔多克隆IgG抗體）
A：※ 產品不包含用于細胞裂解液制備用的溶解緩沖液或免疫沉淀所需的Protein A / G樹脂等。請另行購買。
◆原理和實驗流程
ER駐留蛋白標記試劑ERM是一種在ER駐留性綠色熒光色素（Rhodol衍生物）上綴合蛋白標記基團的化合物。將ERM添加到活細胞后，由于色素部分的特性，顯示出較高的ER駐留性。在ER中迅速濃縮后，通過蛋白標記基團用熒光標記物標記ER蛋白物（Step-1）。標記反應后破碎細胞制備細胞裂解液（Step-2），然后通過使用標簽捕獲抗體（抗Rhodol抗體）進行免疫沉淀（Step-3），可以選擇性地回收被ERM標記的ER蛋白。由于回收的蛋白上帶有熒光基團，使用SDS-PAGE分離后，可以通過CBB/銀染或熒光成像儀檢測出來（Step-4）。進行SDS-PAGE分離后，可以通過LC / MS進行全面蛋白組學分析或使用任何抗體的蛋白印跡法鑒定ER蛋白。
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◆原著論文
Fujisawa et al., J. Am. Chem. Soc., 140, 17060～17070 (2018). Chemical Profiling of the Endoplasmic Reticulum Proteome Using Designer Labeling Reagents.
◆實驗參考數據
■ ERM的激發/發射光譜
■ 激發光譜（藍）以及發射光譜（綠）
■ ※ 適用于普通的綠色熒光色素FITC觀察條件
■ ER特異性檢驗
■ 通過與各種細胞器標記共染色評價本試劑的ER特異性。觀察到ERM（100 nM）與ER標記試劑高度共定位（皮爾遜相關系數>0.9）。另一方面，未觀察到本試劑與溶酶體標記、線粒體標記的共定位。高爾基體標記觀察到部分共定位，應該是因為本試劑所標記的蛋白通過Golgi體運輸從ER轉移至分泌路徑。此外，添加ER-Golgi運輸抑制劑的話，會減少與高爾基體的共定位（詳細請參考原著論文）。
◆應用實例
通過蛋白組學全面分析回收蛋白
使用ERM (100 nM)處理HeLa細胞后，破碎細胞制備細胞裂解液。在裂解液中加入標簽捕獲抗體，使用Protein A磁珠進行免疫沉淀回收標記蛋白。將回收的蛋白通過SDS-PAGE分離后，切出每個條帶，在凝膠中用胰蛋白酶/ Lys-C消化制備LC/MS樣品。通過MS分析鑒定出共146種蛋白，其中63種蛋白是數據庫上的ER蛋白，或是個別論文中確認了ER駐留的蛋白。73種蛋白作為細胞膜、細胞外分泌蛋白以及高爾基體蛋白被鑒定出來，它們都是存在于細胞外分泌路徑的蛋白。由于存在于細胞外分泌途徑的蛋白會途經ER，當這些蛋白在ER的時候便會被標記。因此，檢測出來的蛋白中ER蛋白與途經ER的蛋白約占93%。本實驗中檢測出與ER無關的蛋白有10種，約占7%。
R應激引起的ER駐留蛋白變動量的定量評價
通過SILAC定量分析法分析ER應激誘導的ER駐留蛋白的變動量。準備兩份細胞，一份在SILAC Heavy標記培養基中培養，另一份在Light標記培養基中培養。在Heavy標記培養基的細胞中添加ER應激誘導試劑Tunicamycin培養4 h。而Light標記培養基無需任何處理培養4 h。之后，使用ERM（100 nM）處理1 h，分別制備細胞裂解液，再以1:1的比例混合。通過免疫沉淀法回收混合裂解液中的標記蛋白，然后與上述實驗一樣，制備LC/MS用樣品。檢測出了87種可相對定量的蛋白，再通過SILAC法算出由ER應激引起的變動量。其中6種蛋白因ER應激在ER上的存在量增加了兩倍以上。
◆產品列表
| 產品編號 | 產品名稱 | 包裝 |
| FDV-0039 | ER-Protein Capture Kit | 1 Kit |
特異性標記、純化ER駐留蛋白的試劑盒
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