自備儀器和用品：

低溫離心機、紫外分光光度計、1mL 石英比色皿、可調式移液器、研缽、冰和蒸餾水。

試劑組成和配制：

試劑一：液體 50 mL×1 瓶，室溫保存。

試劑二：液體 40 mL×1 瓶，室溫保存。

試劑三：粉劑×1 瓶，4℃保存。臨用前加入 10mL 蒸餾水充分溶解。

標準品：粉劑×1 瓶， 4℃保存。臨用前加入 5.743 mL 蒸餾水充分溶解；吸取 0.1 mL 上述溶液，加入 0.9 mL 蒸餾水，混勻，即為 100μmol/L DHA。

樣品中 DHA 提取：

1. 組織：按照組織質量（g）：試劑一體積(mL)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g 組織，

加入 1mL 試劑一）進行冰浴勻漿。12000g，4℃離心 20min，取上清置冰上待測。

2. 細菌、真菌：按照細胞數量（10 4 個）：試劑一體積（mL）為 500~1000：1 的比例（建議

500 萬細胞加入 1mL 試劑一），冰浴超聲波破碎細胞（功率 300w，超聲 3 秒，間隔 7 秒，

總時間 3min）；12000g，4℃離心 10min，取上清液置于冰上待測。

3. 血清等液體：直接測定。

DHA 測定操作：

1. 分光光度計預熱 30 min，調節波長到 265 nm，蒸餾水調零。

2. 試劑二在 25℃水浴鍋中預熱 30 min。

3. 標準管：依次在 1mL 石英比色皿加入100μL標準液、800μL預熱的試劑二和100μL試劑三，迅速混勻后于 265nm 比色，記錄 10s 和 130s 的吸光值 A1 和 A2，△A空白管=A2-A1。

4. 測定管：依次在1mL石英比色皿加入100μL上清液、800μL預熱的試劑二和 100μL試劑三，迅速混勻后于265nm 比色，記錄 10s 和 130s 的吸光值 A3 和 A4，△A 測定管=A4-A3。

注意：標準管只需測定一次。