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化工儀器網>產品展廳>試劑標物>行業專用試劑>生物試劑> 無需預孵育!導入細胞質的蛋白轉染試劑

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無需預孵育!導入細胞質的蛋白轉染試劑

具體成交價以合同協議為準

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富士膠片和光(廣州)貿易有限公司是日本富士膠片和光純藥株式會社(FUJIFILM Wako Pure Chemical Corporation)在中國的子公司,主營富士膠片和光品牌試劑產品,供應產品超50,000種,囊括了生命科學、藥品生產、品質管理領域、合成與材料、分析各個領域。


基于“想要為科研人員提供幫助”的創業初衷,富士膠片和光純藥(FUJIFILM Wako)作為一家滿足前沿研究領域需求的綜合試劑制造商,一直致力于生產和開發高品質的產品,并于2022年6月迎來了創業100周年。通過發揮企業優勢“技術力”,以及三大核心業務的試劑業務、化成品業務和臨床診斷業務來滿足學術界、企業以及醫療相關企業的廣泛需求。


憑借100 年的歷史經驗,富士膠片和光純藥(FUJIFILM Wako)在日本市場占據高份額,作為全球性的試劑供應商,以“成就科學未來之力,創造幸福源泉”為愿景,致力于高品質試劑的生產與開發。通過提供試劑,為再生醫療、癌癥、精神/神經疾病和抗體藥物等各類基礎研究和前沿研究做貢獻,并獲得 ISO9001等多項國際認證。基于可靠的技術和品質以及科研人員之間的信賴,作為富士膠片集團的一員將不斷實現全球化發展。


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主要業務——試劑


作為富士膠片和光純藥(FUJIFILM Wako)試劑業務的中國子公司,富士膠片和光(廣州)貿易有限公司可提供各個領域測試和研究用途的生命科學試劑和化學試劑。


試劑業務

可廣泛提供生命科學和化學領域的測試研究用產品



生命科學領域


化學領域



 

培養基生產

 ● 抗體制備

 ● 定制服務



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認證標準品

 ● 有機化學


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作為優質的試劑企業,我們可以提供滿足不同客戶需求的高品質產品。試劑業務自創業以來,已持續不斷地提供了廣泛領域的試劑產品,并致力于成為滿足前沿技術領域各項研究需求的試劑制造商。今后也將以過往技術經驗為基石,發揮作為可信賴的研究支持合作伙伴的作用。



產品一覽

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● 常規試劑

● 有機合成試劑

● 環境分析試劑

● 精密分析試劑

● 色譜試劑

● 生化學用試劑

● 基因研究用試劑

● 免疫研究用試劑

● 病理研究用試劑

● 細胞培養用試劑

● 內毒素檢測用試劑

● 生物藥生產用培養基

● 研究用基礎培養基

● 定制服務

● 設備和耗材










豐富的產品類目以及快速供應體系

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致力于持續監測市場的需求并跟蹤世界的研究動向。為了能夠及時準確地響應客戶的需求,富士膠片和光建立了以自有品牌為中心的豐富產品體系,為各界的研究和開發領域提供細致的服務與支持 。













高品質的試劑提供和生產體系

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試劑生產工廠以東京工廠和大阪工廠為中心,發揮優質技術力量建立的高品質生產體系。愛知工廠配備齊全的培養基生產設備,可用于生產再生醫療和生物制藥生產用的培養基。













優質的客戶服務和產品信息

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通過定期更新的主頁網站、富士膠片和光生物微信公眾號、富士膠片和光化學分析微信公眾號,以及不定期的富士膠片和光生物視頻號、網絡研討會和線下展會,致力于為客戶提供優質的服務以及不斷更新的產品信息。













強化全球化事業的開展

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建立日本海外銷售體系,通過提供富士膠片和光純藥(FUJIFILM Wako)優質研發力量生產的高品質產品,積極推進全球化業務。














企業歷史沿革


年份

內容

1922年6月

  從武田長兵衞商店(現武田薬品工業株式會社)的化學藥品部門獨立出來,成立了武田化學薬品

 株式會社

1940年

  大阪工廠竣工

1944年

  東京工廠竣工

1947年

  更名為和光純薬工業株式會社

1950年

  展開化成品業務

1952年

  總部遷移至大阪

1960年

  展開臨床檢測藥業務

1968年

  播磨工廠竣工

1972年

  公司總部竣工

1974年

  成立德國和光純薬有限會社(今?FUJIFILM Wako Chemicals Europe GmbH)

1981年

  成立美國和光純薬株式會社(今?FUJIFILM Wako Chemicals U.S.A Corporation)

1989年

  建設東部配送中心

1991年

  建設西部配送中心

2004年

  愛知工廠竣工

2012年

  成立和光純耀(上海)化學有限公司(今?富士膠片和光純藥(上海)化學有限公司)

2015年

  收購株式會社シバヤギ(今?群馬辦事處)

2017年

  成為FUJIFILM Corporation的全資子公司

2018年

  更名為富士膠片和光純藥株式會社

2019年

  合并IS Japan Co.,Ltd.(今?戶田辦事處)

2022年

  成立100周年





























生物化學試劑、儀器和耗材

供貨周期 一個月以上 應用領域 醫療衛生,生物產業

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無需預孵育!導入細胞質的蛋白轉染試劑             

ProteoCarry <Protein Transfection Reagent>

 

 

本產品是將蛋白以及葡聚糖等生物大分子導入細胞內,尤其是導入細胞質的試劑。傳統的蛋白轉染試劑存在蛋白滯留在內體或溶酶體中的問題,但是由于本產品可以高效地將蛋白運送至細胞質,可以廣泛地適用于在評價導入蛋白的細胞內功能和抗體導入引起的功能抑制誘導等的實驗。另外與傳統產品不同的是,本品無需與蛋白進行預孵育,所以不會形成復合體,低限度地限制其對蛋白功能的影響。

※本產品僅供研究,研究以外請勿使用。

 

 

◆蛋白轉染試劑及其問題

 

蛋白轉染試劑(Proteofection試劑)是將重組蛋白和抗體直接導入細胞的工具。與將質粒導入以誘導表達目的蛋白的方法相比,可以更迅速地導入目的蛋白,因而受到了廣泛地關注。

雖然已經開發了許多基于肽、陽離子的脂質或聚合物的蛋白轉染試劑,但它們都是與蛋白形成復合物后,通過胞吞作用攝入細胞內,破壞內體膜將其運送至細胞質。然而,現有的大部分試劑內體膜的破壞活性低,并且從內體逃脫不足,導入的蛋白大部分都轉移至溶酶體降解系統。本產品是一種新型肽蛋白轉染試劑,克服了傳統的蛋白轉染試劑的缺點,通過強有力的內體膜選擇性破壞活性,高效地向細胞質運送蛋白,使轉導的蛋白在細胞內發揮活性。另外,與傳統的蛋白轉染試劑不同,本品無需與蛋白的復合物,不僅僅是蛋白,還可以向細胞質導入生物大分子(葡聚糖等)。

 

 

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圖1. 細胞導入原理的比較

 

 

圖2是導入熒光標記IgG的案例。不添加轉染試劑時,以內體/溶酶體的染色為主,從細胞質中無法獲得熒光信號,與之相對的,可以觀察到在本產品案例中,內體、細胞質被大面積染色。(詳情請參照應用實例)

 

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圖2. 向HeLa細胞導入熒光標記IgG的比較

 

 

◆特點

 

● 基于肽特性的蛋白轉染試劑,顯示出高度水溶性。

● 優異的內體膜破壞活性,與傳統方法相比顯示出高細胞質傳達性。

● 無需與導入物質進行預孵育,可以簡便且迅速地轉染。

● 由于不會與蛋白形成復合物,所以需要添加濃度較高的蛋白,但是可以低限度地抑制對蛋白功能的影響。

● 只需要1小時的處理就可以充分地轉染至細胞質。

● 有無血清(<10% FBS)不會影響導入效率,可以根據想要使用的細胞設計實驗。

● 已有向細胞質導入各種蛋白及生物大分子的應用實例。

● 例:IgG抗體、功能性蛋白(Cre recombinase, Saponin)、多糖(葡聚糖)

● 推薦使用濃度幾乎沒有細胞毒性。

 

 

◆使用方法概述

 

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1. 向新鮮的培養基(無血清培養基,10%以下含FBS培養基或PBS)添加本產品以及想要導入的蛋白。

1. (配制轉染混合液)。

1. ※無需預孵育

2. 用PBS清洗2次細胞(80%以下的融合狀態)后,向細胞添加轉染混合液。

3. 在轉染混合液中培養細胞(~1h)

4. 用PBS清洗2次細胞后,添加新鮮的培養基。

5. 實現各項應用。

 

 

◆試劑盒組成

 

● ProteoCarry(4 mg)

● FITC-dextran(2 mg,陽性對照用)

 

 

實驗次數的預測

 

孔板的尺寸

ProteoCarry

FITC-dextran

6 well

14 assays

5 assays

12 well

28 assays

10 assays

24 well

56 assays

20 assays

48 well

140 assays

50 assays

96 well

280 assays

100 assays

 

 

◆有導入數據的細胞

 

HeLa, SW280, COS7, NIH3T3, HUVEC

 

 

參考導入量

 

導入物

推薦培養基的終濃度

抗體

50~250 μg/mL

蛋白

Saponin

1~10 μg/mL

Cre recombinase

10~100 μg/mL

FITC-dextran
    (陽性對照)

200 μg/mL

 

※導入效率根據細胞類型,細胞數量和蛋白類型各種因素改變。以上數據僅供參考,建議每次實驗都要優化數據。

 

 

◆應用實例

 

1. 向細胞內導入FITC-dextran

 

向HeLa細胞導入FITC-Dextran(培養基的終濃度為200 μg/mL),僅向細胞添加FITC-Dextran時,(Reagent(-))觀察到點狀的熒光信號,細胞質中幾乎沒有觀察到信號;相反,使用本產品時擴散到了整個細胞質。

 

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實驗概要:

 

向HeLa細胞(80% confluent)添加200 μg/mL FITC-dextran, 1×ProteoCarry in α-MEM,并培養1個小時。用PBS清洗細胞后,進行核染色(Hoechst)。

 

 

2. 向細胞內導入熒光標記IgG

 

向HeLa細胞導入熒光標記IgG抗體(培養基終濃度為250 μg/mL),僅有抗體添加至細胞時,可以觀察到胞吞作用自發性攝入點狀的熒光信號,表明抗體停留在內體和溶酶體中。另一方面,使用本產品時,不僅能觀察到點狀的內體結構,還可以觀察到它主要在細胞質中廣泛擴散。

※用熒光信號觀察細胞擴散時,與內體相比,由于細胞質的體積較大,信號會被稀釋。細胞質信號的檢測需要添加高濃度的熒光標記蛋白,在本數據中添加了250 μg/mL的熒光標記IgG。

 

圖片.png

 

實驗概要:

 

向HeLa細胞(80% confluent)添加250 μg/mL熒光標記IgG,1×ProteoCarry in α-MEM并培養1小時。用PBS清洗細胞后,進行核染色(Hoechst)。

 

 

3. 向細胞內導入Cre recombinase

 

將設計為Cre recombinase不存在時表達DsRed,只有在Cre recombinase存在時發生重組表達GFP的質粒向HeLa細胞導入基因。相對于導入第二天就表達DsRed的HeLa細胞,使用本產品導入Cre recombinase(培養基終濃度為10 μM),依賴導入細胞內的Cre recombinase表達GFP,本產品在維持Cre recombinase的功能下將其導入了細胞。

 

圖片.png

 

實驗概要:

 

向HeLa細胞轉染質粒的第二天,向HeLa細胞添加10 μM Cre recombinase, 1×ProteoCarry in α-MEM,并培養1小時。用PBS清洗細胞后,用新的培養基再培養24小時。


 

◆保存

 

● 運輸:室溫

● 保存:-20℃

 

 

◆產品列表

 

 產品編號產品名稱包裝
FDV-0015

ProteoCarry<Protein Transfection Reagent>

ProteoCarry <蛋白質轉染試劑>

1 set

 



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