20411ES01 PNGase F (N-糖酰胺酶F或肽N-糖苷酶 F)
- 公司名稱 翌圣生物科技(上海)股份有限公司
- 品牌 Yeasen/翌圣生物
- 型號(hào) 20411ES01
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時(shí)間 2022/2/10 11:53:27
- 訪問(wèn)次數(shù) 1557
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 15000 U |
---|---|---|---|
貨號(hào) | 20411ES01 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè) |
PNGase F (N-糖酰胺酶F或肽N-糖苷酶 F)
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號(hào) | 規(guī)格 | 價(jià)格(元) |
PNGase F (N-糖酰胺酶F或肽N-糖苷酶 F) | 20411ES01 | 15000 U | 763 |
PNGase F (N-糖酰胺酶F或肽N-糖苷酶 F) | 20411ES02 | 75000 U | 3373 |
產(chǎn)品描述
N-糖苷酶 F (PNGase F)是一種酰胺水解酶,經(jīng)過(guò)和平空間站伊麗莎菌克隆,并在 E. coli大腸桿菌中重組表達(dá),可以裂解由天冬酰胺連接的高甘露糖、雜合和復(fù)雜的寡糖糖蛋白。PNGase F的切割位點(diǎn)為糖蛋白內(nèi)側(cè)N-乙酰葡萄糖胺(GlcNAc)和天冬酰氨殘基之間的酰胺鍵,同時(shí)將酶解后蛋白上的天冬氨酰轉(zhuǎn)化為天冬氨酸。本產(chǎn)品常應(yīng)用于抗體及其相關(guān)蛋白*去糖基化。
產(chǎn)品性質(zhì)
中文別名(Chinese synonym) | N-糖酰胺酶F;N-糖苷酶 F |
英文別名(English synonym) | PNGase F |
來(lái)源(Source) | 大腸桿菌表達(dá) |
純度(Purity) | 經(jīng)SDS-PAGE及HPLC分析,純度> 90% |
分子量(Molecular weight) | 36 kDa |
比活性(Specific activity) | 1,800,000 U/mg |
緩沖液組分(Buffer) | 20 mM Tris-HCl pH 7.5, 50 mM NaCl, 5 mM EDTA,50%Glycerol. |
酶活定義(Unit Definition) | 1個(gè)酶活力單位指在10 μL的反應(yīng)體系中,37℃條件下1小時(shí)從 10 μg變性RNase B中除去超過(guò)95%的碳水化合物所需要的酶量。 |
運(yùn)輸和保存方法
干冰運(yùn)輸;-20℃保存;有效期12個(gè)月。
使用方法
1、變性條件下蛋白質(zhì)去糖基化:
1)將1μL 5%SDS和1μL 1 M DTT加入到12 μL目標(biāo)糖蛋白(50 μg),總體積14 μL;
2)100℃溫度下煮沸10 min使其變性,室溫冷卻5 min;
3)加入2 μL的0.5M磷酸鈉緩沖液(pH 7.5)。如果pH在PNGase F(pH 6-10)范圍內(nèi),可以使用其他緩沖液。20 mL 0.5 M磷酸鈉(調(diào)制pH 7.5)的配置: 8.4 mL 1 M Na2HPO4,1.6 mL 1 M NaH2PO4 。
4)加入2 μL的10%NP-40。可用Triton X-100替代NP-40。PNGase F 的活性受 SDS 的抑制,所以在反應(yīng)混合物中必須加入 NP-40。
5)加入1-2 μL的PNGase,在37℃孵育1-3 h。
2、非變性條件下蛋白質(zhì)去糖基化:
1)在50 mM碳酸氫銨(pH 7.8)中加入20 μg的糖蛋白至終體積為18μL;
2)加入1-2 μL的PNGase F,在37°C孵育2-18 h。
注意:在變性條件下大多數(shù)底物能夠更好的去糖基化,在非變性條件下可能需要增加PNGase F的量和延長(zhǎng)孵育時(shí)間。具體酶濃度見(jiàn)管壁標(biāo)簽
注意事項(xiàng)
為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
HB210129
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