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1ul薄層點樣毛細管100支/盒

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德之瑞M40薄層色譜中藥食品化工點樣定量毛細管

點樣原理

    用毛細管自動吸液時，液體在管狀物體的內側因為內聚力以及附著力的差異，克服地心引力而向上升。當毛細管的一端（液面）接觸薄層板時破壞了這種力，毛細管內的液體自動下降滲出到薄層板上。毛細管的一端（液面）只要不接觸到薄層板，就不會流出。

點樣方法

點樣除另有規定外，可直接手持毛細管的一端，點樣于薄層板上，一般為圓點，點樣基線距底邊2.0cm，樣點直徑及點間距離同紙色譜法，點間距離可視斑點擴散情況以不影響檢出為宜。點樣時必須注意勿損傷薄層表面。點樣直徑不超過5mm，點樣距離一般為1~1.5cm即可。樣品在溶劑中的溶解度很大，原點將呈空心環——環形色譜效應。因此配制樣品溶液時應選擇對組分溶解度相對較小的溶劑。點樣方式有點狀點樣和帶狀點樣。

德之瑞M40薄層色譜中藥食品化工點樣定量毛細管

怎樣提高點樣效率

點樣是造成TLC定量誤差的主要來源。實驗證明：定量毛細管更適合較小體積的點樣；微量注射器更適合較大體積的點樣。這主要是因為微量注射器受小氣泡、溶液回爬現象的影響較大。為避免不同定量毛細管間的點樣誤差、建議一塊薄層板上用同一只定量毛細管。但應注意更換樣品時，應將毛細管用超1聲bo或不同極性溶劑清洗干凈。在制備樣品時，溶樣溶劑黏度不能過高，以便于點樣；溶劑沸點過低則進樣體積易變，過高則會改變展開劑組成；對樣品溶解度過高會使樣點發生空心現象；常用的溶劑為甲醇、乙醇、**。經典TLC樣點原點一般為直徑3mm點間距1--2cm 底邊距1.5cm；HPLC樣點原點一般為直徑1mm點間距5mm 底邊距1cm。

德之瑞M40

點樣方式、點樣量及點樣設備的選擇

    對樣品的洗脫能力不同，因此在點樣的同時，樣品在原點開始呈環形展開，如果樣品在溶劑中的溶解度很大，原點將變成空心環，Kaiser稱這種現象為“點樣環形色譜效應”。這種效應對隨后的線形展開造成不良影響，因此配制樣品溶液時應選用對組分溶解度相對較小的溶劑；溶劑的粘度不宜過高，以便于點樣，溶劑的沸點要適中，沸點過低由于揮發會改變樣品溶液濃度導致較大誤差，沸點過高，樣品溶液的溶劑會在原點殘留，導致改變展開劑的選擇性，特別是樣品溶液的溶劑與展開劑的極性相差較大時更為明顯，zui常用的溶劑為甲醇及乙醇，有時也用丙酮。點樣后必須將溶劑全部除去后再進行展開，但要避免高溫加熱，以免改變待測成分的性質。

    點樣方式、點樣量及點樣設備的選擇決定于分析的目的、樣品溶液的濃度及被測物質的檢出靈敏度。

    點樣體積經典薄層一般為1-5μl，高效薄層為100-500nl，樣品溶液濃度一般在0.01%-1.00%范圍內，點樣過多會造成原點“超載”，展開劑產生“繞行”現象使斑點拖尾或重疊，使掃描峰形不對稱或不能基線分離，并由于超載得到非線性的校正曲線，嚴重影響定量結果，降低準確度。

    經典薄層的原點直徑zui大不得超過5mm，一般3mm較為合適，高效薄層原點直徑約為1-2mm，盡可能避免多次點樣，原點直徑過大會降低分辨率及分離度。

    經典薄層起始線距底邊約1.5cm，高效薄層為1cm，展距前者為10-15cm，后者為5-7cm，對于難分離的化合物用多元展開劑展開時，注意原點與展開劑的距離每次要保持*，否則由于色譜分離zui初行為的差異而導致分離失敗。

    點與點的間距經典薄層為1-2cm，高效薄層為0.5cm，用具自動換行功能的薄層掃描儀時，斑點之間的距離必須十分精確，才能正確地掃描每行的色斑，得到好的測定結果

在點樣前，應將薄層板在日光及紫外光下檢查板面有無損壞或污染，選擇合格的薄層板后決定用點狀點樣還是用帶狀點樣。為此，有些廠家生產了系列點樣設備以供選用，這些設備只適用于硬板。下面是常用的點樣方式及設備。

（一）點狀點樣

    如果僅僅為了定性，用內徑約0.5mm管口平整的毛細管或微量注射器將樣品溶液點在距薄層底邊約2cm處，點樣直徑不超過5mm，點間距約為1-1.5cm即可。

    為進行定量，借毛細作用吸樣的定容管有兩種，一是容積為1、2、3、4及5μl的定量毛細管（Microcaps），另一種是100及200nl的鉑銥合金定量毛細管（Nanopipette）；注射器式的可變體積的點樣器有50-230nl的毫微點樣器及0.5-2.3μl的微量點樣器（Micro-Applicator），用于需要調節體積及沒有毛細作用的鍵合相薄層的點樣。

    毛細管式的微量點樣器裝在手動的點樣裝置的磁性點樣頭上，點樣頭裝在彈簧上。按下此點樣頭，毛細管借恒定的壓力接觸薄層表面。點間距離由帶準確的#44 間隔的E字形缺刻裝置控制，手動點樣器，適用于普通或高效薄層板，點樣體積精確，樣品原點小，原點間隔定位準確；注射器式的毫微點樣器及微量點樣器由測微尺控制，也可與Nanomat型點樣裝置配合，以使點樣位置精確。

    電動的點樣裝置*適用于上述各種點樣器的配套使用，并且還可以自動控制點樣次數，點樣器在薄居上的停留時間，以及點樣器接觸薄層的速度。還可避免手持毛細管點樣時的用力不勻，由于靠機械控制接觸板面，壓力恒定。此外，還有可以用于環形展開及向心展開的薄層點樣裝置。

（二）帶狀點樣

    當樣品溶液體積大、濃度稀時，采用自動點樣設備進行帶狀點樣。定量分析的點樣范圍為1-99μl，制備型分離點樣范圍為5-490μl，作定量標準曲線時，可由同一標準溶液，自動點上不同體積的標準液，故快速簡便，利用內裝的微處理器編序操作，簡單易行。使用時樣品溶液吸在微量注射器中，點樣器不接觸薄層，而是用氮氣將注射器針尖的溶液吹落在薄層上，薄層板在針頭下定速移動點成0-199mm的窄帶。帶狀點樣展開后的斑點不僅分辨率明顯高于點狀點樣，而且精密準確，為定量分析提供便利條件。

（三）自動點樣

    全自動點樣裝置結合了現代的電子及機械技術，能進行點狀或帶狀點樣，采用*計算機編程控制，靈活多用，點樣量為10nl-50μl，可隨意設定點樣規范，可應用于單向、雙向、環形或向心色譜展開，高度自動化的點樣使定量分析結果準確。點樣參數可與掃描儀的掃描分析軟件連用，令定量分析工作達到高度自動化。

（四）接觸點樣

    當樣品溶液粘度較大或點樣體積要超過100μl時，用毛細管點樣就有困難，Fenimore設計的接觸點樣法適用于這類樣品的點樣，美國制造的Clarke Contact Spotter就是這種接觸點樣器。在帶有抽氣孔的凹形塊的上方覆蓋一片涂有疏水性物質的聚氟化物薄膜（a），當減壓抽氣時薄膜凹陷（b），此時將樣品溶液點在凹槽處（c），然后用氮氣吹去大部分溶劑（d），再將濃縮后的樣品液滴與高效薄層板的吸附劑層接觸（e），此時樣品就定量地轉移到薄層上。

用管狀點樣器上樣的誤差來源是由于點樣時薄層表面的損傷，溶液“爬壁”效應使外壁樣品的沉積、樣品的記憶效應以及管中的微小氣泡等。

    點樣誤差的大小與樣品的溶解度，溶液的表面張力，溶劑的粘度、揮發性和極性、點樣所耗費的時間、薄層板的質量（粒度、均勻度、薄層厚度、粘合劑的性質）等有關。