THP-1(人單核細(xì)胞白血病細(xì)胞)系是1980年Tsuchiya等人建立的人單核細(xì)胞白血病細(xì)胞系。它來(lái)自一位急性單核細(xì)胞白血病患者的血液，有分化為多種巨噬細(xì)胞的能力，是各領(lǐng)域研究常用的細(xì)胞系之一。

THP-1（人急性單核細(xì)胞白血病細(xì)胞）是人外周血的單核細(xì)胞系，最初來(lái)源于急性單核細(xì)胞性白血病患者。屬于懸浮細(xì)胞，適合用于轉(zhuǎn)染或感染實(shí)驗(yàn)。其表面抗原HLA型為：A2，A9，B5，DRw1，DRw2。

細(xì)胞培養(yǎng)信息：

細(xì)胞名稱(chēng)：THP-1(人單核細(xì)胞白血病細(xì)胞)

細(xì)胞別稱(chēng)：THP1; THP 1; THPI; THP-1(ATCC); Tohoku Hospital Pediatrics-1

生長(zhǎng)特性:  懸浮

培養(yǎng)條件:  RPMI-1640+10% FBS

培養(yǎng)環(huán)境:  空氣，95%；二氧化碳 (CO2)，5% 

細(xì)胞檢測(cè)：

實(shí)驗(yàn)室分離的人單核細(xì)胞白血病(THP-1)細(xì)胞經(jīng)鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

THP-1細(xì)胞培養(yǎng)注意事項(xiàng)

● THP-1細(xì)胞懸浮圓形生長(zhǎng)，偶有小聚團(tuán)，屬于正常現(xiàn)象，無(wú)需吹散；

● 圓形透亮、細(xì)胞膜完整的細(xì)胞是活細(xì)胞，如果無(wú)法判斷，可以取少量細(xì)胞用臺(tái)盼藍(lán)染色后計(jì)數(shù)確定細(xì)胞活率；

● 少量細(xì)胞附著瓶底屬于正常現(xiàn)象，可將懸浮細(xì)胞轉(zhuǎn)移至新瓶，丟棄貼壁的細(xì)胞；

● THP-1喜歡偏酸環(huán)境，培養(yǎng)基呈橘色時(shí)可不用換液，補(bǔ)充適量新鮮培養(yǎng)基維持一天再進(jìn)行換液或傳代操作；

● THP-1有密度依賴(lài)性，密度低時(shí)生長(zhǎng)較慢，培養(yǎng)密度維持在30萬(wàn)-100萬(wàn)細(xì)胞/mL之間為宜，超過(guò)80萬(wàn)細(xì)胞/mL即可傳代；

● THP-1復(fù)蘇后恢復(fù)較慢，如無(wú)特殊情況，復(fù)蘇后48小時(shí)內(nèi)不對(duì)細(xì)胞進(jìn)行操作；

● THP-1生長(zhǎng)需要穩(wěn)定的環(huán)境，不頻繁拿出培養(yǎng)箱，不頻繁離心；

● 培養(yǎng)時(shí)瓶子豎立放置（瓶蓋朝上），可增加細(xì)胞局部密度，促進(jìn)細(xì)胞增殖。

● β-巰基乙醇可以消除活性氧自由基，維持細(xì)胞高密度生長(zhǎng)。若培養(yǎng)基中不添加β-巰基乙醇，長(zhǎng)期培養(yǎng)細(xì)胞可能會(huì)出現(xiàn)大量貼壁，嚴(yán)重聚團(tuán)等情況。

細(xì)胞到貨須知

1. 請(qǐng)客戶(hù)收到本公司原代細(xì)胞產(chǎn)品后，立即對(duì)物品包裝、細(xì)胞培養(yǎng)瓶等拍照，如有疑問(wèn)或問(wèn)題，須在24小時(shí)內(nèi)通知本公司，提供照片和書(shū)面說(shuō)明。客戶(hù)收到非凍存原代細(xì)胞后，用75%酒精擦拭瓶身，再將原裝的原代細(xì)胞瓶放入細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，1-4小時(shí)后再使用，吸取瓶中培養(yǎng)液，換6ml完Q培養(yǎng)液。注意觀察細(xì)胞情況，待貼壁率達(dá)到90%以上再按傳代說(shuō)明操作。請(qǐng)客戶(hù)使用T25細(xì)胞瓶傳代，一瓶傳二瓶。

2. 謹(jǐn)記：培養(yǎng)原代細(xì)胞前三天，需對(duì)原代細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)進(jìn)行拍照并注明和標(biāo)記時(shí)間。若原代細(xì)胞培養(yǎng)生長(zhǎng)存在質(zhì)量問(wèn)題，需向本公司提供原代細(xì)胞培養(yǎng)生長(zhǎng)的照片和書(shū)面說(shuō)明。請(qǐng)客戶(hù)使用原代細(xì)胞第3代以?xún)?nèi)。原代細(xì)胞培養(yǎng)傳代過(guò)多，可能造成原代細(xì)胞的質(zhì)量問(wèn)題。

細(xì)胞培養(yǎng)

1.顧客收到T25瓶裝的細(xì)胞如果沒(méi)長(zhǎng)滿(mǎn)，建議先放培養(yǎng)箱2-4小時(shí)

2.吸去培養(yǎng)液，取部分放入50ml離心管，放置于培養(yǎng)箱（放2-3天，觀察是否有污染）

3.加PBS清洗1-2遍，去PBS。加6ml完Q培養(yǎng)基放培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。1-2天換一次液（如果培養(yǎng)液變黃，必須盡快換液）

細(xì)胞傳代

1.細(xì)胞密度到達(dá)90%，可以進(jìn)行傳代。

2.吸去培養(yǎng)液，加PBS清洗1-2遍，去PBS。加入0.25%胰酉每1.5ml潤(rùn)洗10秒，

3.加12ml完 Q培養(yǎng)基，吹打均勻，即可分到2個(gè)T25培養(yǎng)瓶里。（原代細(xì)胞1傳2，若顧客使用培養(yǎng)皿或培養(yǎng)孔板，建議先包被）

細(xì)胞凍存

1.選擇指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)液，加PBS清洗1-2遍。去PBS，加入0.25%胰酉每1.5ml潤(rùn)洗10秒，去胰酉每。將培養(yǎng)瓶放37度培養(yǎng)箱，靠殘余胰酉每繼續(xù)消化細(xì)胞直至細(xì)胞變圓，拍打瓶側(cè)使細(xì)胞脫落。

2.加1-1.5ml成品凍存液（本公司有賣(mài)的，無(wú)血清低DMSO，無(wú)需程序凍存），分裝至2ml凍存管里，放-80度冰箱過(guò)夜。第二天再轉(zhuǎn)至液氮

細(xì)胞復(fù)蘇

1.從液氮罐取凍存管，凍存管放置37度水浴鍋1min,至凍存液融解。

2.在超凈臺(tái)將凍存液吸取至T25培養(yǎng)瓶，再加入10-15ml完Q培養(yǎng)基

3.第二天換6ml完Q培養(yǎng)液即可