大鼠血清溶菌酶(LZM)檢測elisa北京方程生物公司現貨供應

本試劑僅供研究使用 目的：本試劑盒用于測定人血清，血漿及相關液體樣本中大鼠血清溶菌酶(LZM)檢測elisa的含量。
實驗原理：
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠血清溶菌酶(LZM)檢測elisa水平。用純化的大鼠血清溶菌酶(LZM)檢測elisa抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入 大鼠血清溶菌酶(LZM)檢測elisa ，再與 HRP標記的大鼠血清溶菌酶(LZM)檢測elisa抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經過*洗滌后加底物TMB 顯色。TMB 在 HRP 酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的 大鼠血清溶菌酶(LZM)檢測elisa呈正相關。 用酶標儀在 450nm 波長下測定吸光度 （OD值） ，通過標準曲線計算樣品中人大鼠血清溶菌酶(LZM)檢測elisa濃度。

 

一、操作因素對ELISA結果的影響ELISA操作步驟復雜，操作不當將引起較大的誤差。以下敘述各個步驟中的影響因素。1.加樣2.溫育3.洗滌4.顯色5.比色二、灰區的設置通常情況下，ELISA定性實驗以"陽性"和"陰性"來報告結果，兩者間有一條分界線被稱為"陽性判斷值"（cut-off value，CO值），這是定性免疫測定結果報告的依據。三、標本復查ELISA手工檢測過程復雜，影響因素較多，即使室內質控在控，也可能因孔間差異而造成結果的差異，因此加大復查力度是保證結果準確性的可靠方法，比如對HBsAg、HBeAg、HCV-Ab、HIV-Ab、TP-Ab等項目的可疑、弱陽性標本及少見模式的檢測結果進行復查。四、結果判斷和報告常用下列幾種方法表示結果：1.定性測定2.半定量測定 結果一般以滴度表示。3.定量測定 即用已知量的標準品作一系列稀釋后進行ELISA測定，繪制標準曲線，結果以量或單位表示。在ELISA定量檢測中每一塊反應板都必須繪制相應的標準曲線。

 

1. 每個標準品的OD值減去空白孔的OD值后作圖，如設置復孔，則應取其平均值計算。以標準品的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，繪出標準曲線。亦可以OD值為橫坐標，標準品的濃度為縱坐標，繪出標準曲線。2. *使用專業的曲線制作軟件，如curve expert 1.3或1.4，在軟件界面既可根據樣品OD值，由標準曲線查出相應的濃度，乘以稀釋倍數。亦可將樣品的OD值代入標準曲線的擬合方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數，即為樣品的實際濃度。3. 若樣品OD值高于標準曲線上限，應適當稀釋后重測，計算濃度時應乘以稀釋倍數。 特異性：無明顯交叉反應。由于受到技術及樣本來源的限制，不可能完成對所有相關或相似物質交叉反應檢測，因此本試劑盒有可能與未經檢測的其它物質有交叉反應?；厥章剩悍謩e于定值血清及血漿樣本中加入一定量的小鼠白介素1β (IL-1β)（加標樣品），重復測定并計算其均值，回收率為測定值與理論值的比率。 線性：在定值血清及血漿樣本內加入適量的小鼠白介素1β (IL-1β)，并倍比稀釋成 1:2，1:4，1:8，1:16 的待測樣本，線性范圍即為稀釋后樣本中小鼠白介素1β (IL-1β)含量的測定值與理論值的比率。 小鼠白介素1β (IL-1β)酶聯免疫吸附檢測試劑盒精密度：精密度用樣品測定值的變異系數 CV 表示。CV(%) = SD/mean×100批內差：取同批次試劑盒對低、中、高值定值樣本進行定量檢測,每份樣本連續測定 20 次，分別計算不同濃度樣本的平均值及 SD 值。

 

 樣本處理及要求：
1. 血清：室溫血液自然凝固 10-20 分鐘，離心 20 分鐘左右（2000-3000 轉/分） 。仔細收集上清，保存過程中如出現沉淀，應再次離心。
2. 血漿：應根據標本的要求選擇 EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合 10-20 分鐘后，離心20 分鐘左右（2000-3000 轉/分） 。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應該再次離心。
3. 尿液：用無菌管收集，離心 20 分鐘左右（2000-3000 轉/分） 。仔細收集上清保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細胞培養上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心 20 分鐘左右（2000-3000 轉/分） 。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時，用 PBS（PH7.2-7.4）稀釋胞懸液，細胞濃度達到 100 萬/ml 左右。通過反復凍融，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心 20 分鐘左右（2000-3000 轉/分） 。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
5. 組織標本：切割標本后，稱取重量。加入一定量的 PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備
用。標本融化后仍然保持 2-8℃的溫度。加入一定量的 PBS（PH7.4） ，用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心 20 分鐘左右（2000-3000 轉/分） 。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
6. 標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融.
7. 不能檢測含 NaN3 的樣品，因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

 

大鼠血清溶菌酶(LZM)檢測elisa

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