兔子細胞間粘附分子1elisa進口\北京檢測兔ICAM-1/CD54\免費代測說明書

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3.2 酶聯(lián)物（結合物）結合物即酶標記的抗體（或抗原），是ELISA中zui關鍵的試劑.良好的結合物應該是既保有酶的催化活性，也保持了抗體（或抗原）的免疫活性.結合物中酶與抗體（或抗原）之間有恰當?shù)姆肿颖壤?，在結合試劑中應盡量不含有或少含有游離的（未結合的）酶或游離的抗體（或抗原）.此外，結合物尚要有良好的穩(wěn)定性.3.2.1酶用于ELISA的酶應符合以下要求：純度高，催化反應的轉化率高，專一性強，性質(zhì)穩(wěn)定，來源豐富，價格不貴，制備成酶結合物后仍繼續(xù)保留它的活性部分和催化能力.在受檢標本中不存在相同的酶.另外，它的相應底物易于制備和保存，價格低廉，有色產(chǎn)物易于測定等.在ELISA中，常用的酶為辣根過氧化物酶(horseradish peroxidase, HRP)和堿性磷酸酶(alkaline phosohatase, AP).在少數(shù)商品ELISA試劑中，應用的酶尚有葡萄糖氧化酶、β-D-半乳糖苷酶和脲酶等.國產(chǎn)ELISA試劑一般都用HRP制備結合物.HRP是一種糖蛋白，含糖量約為18%，分子量為44000，是一種復合酶，由主酶（酶蛋白）和輔基（亞鐵血紅素）結合而成，是一種卟啉蛋白質(zhì).主酶無色糖蛋白在275nm波長處有zui高吸收峰，輔基是深棕色的含鐵卟啉環(huán)，在403nm波長處有zui高吸收峰.HRP的純度用RZ(Reinheit Zahl，德文，意為純度數(shù)）表示，是403nm的吸光度與280nm吸光度之比，高純度的HRP的RZ≥?.0.HRP除符合上述的ELISA中標記酶的要求外，更有價格低廉和性質(zhì)較穩(wěn)定的特點.值得注意的是，在選用酶制劑時，除其純度RZ外，更應注意酶的活力.高純度的酶如保存不當，活力也會降低.酶制劑的活力以所含的酶活力單位表示，可用對底物作用后生成產(chǎn)物量的測定進行試驗.

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