WBR0101 RIPA裂解液（中）
| 參考價 | ￥ 190 |
| 訂貨量 | ≥1 |
- 公司名稱 福因德科技（武漢）有限公司
- 品牌
- 型號 WBR0101
- 產地
- 廠商性質 生產廠家
- 更新時間 2015/11/16 14:02:30
- 訪問次數 223
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RIPA裂解液（強）
產品編號 | 產品名稱 | 包裝 |
WBR0101 | RIPA裂解液（中） | 100 ml |
1.產品簡介：
我們生產的RIPA裂解液(RIPA Lysis Buffer)是一種傳統的細胞組織快速裂解液。RIPA裂解液裂解得到的蛋白樣品可以用于常規的Western、IP等。RIPA裂解液(強)的主要成分為50 mM Tris (pH 7.4)，150 mM NaCl，1% Triton X-100，1% sodium deoxycholate，0.1% SDS，以及sodium orthovanadate，sodium fluoride，EDTA，leupeptin等多種抑制劑。可以有效抑制蛋白降解。用RIPA裂解液裂解得到的蛋白樣品，可以用我們生產的BCA蛋白濃度測定試劑盒(WB0201/WB0202)測定蛋白濃度。由于含有較高濃度的去垢劑，不能用Bradford法測定由本裂解液裂解得到樣品的蛋白濃度。
2.包裝清單：
產品編號 | 產品名稱 | 包裝 |
WBR0101 | RIPA裂解液（中） | 100 ml |
— | 說明書 | 1份 |
3.保存條件：4℃保存，一年有效。
4. 使用方法:
A. 對于培養細胞樣品：
取適當量的RIPA裂解液混勻，在使用前數分鐘內加入PMSF，使PMSF的zui終濃度為1 mM。
B. 對于貼壁細胞樣品：
去除培養液用PBS、生理鹽水或無血清培養液洗一遍。加入適量裂解液。用槍吹打數下，使裂解液和細胞充分接觸。輕輕的搖晃約5-10 min。充分裂解后，10000-14000 g離心10 min，取上清，即可進行后續操作。
表--裂解液用量說明： 用于不同規格標準培養板裂解液容量
板規格/表面積 | 100 mm | 60 mm | 6-well plate | 24-well plate | 96-well plate |
試劑容量 | 500-1000 μl | 250-500 μl | 200-400 μl per well | 100-200 μl per well | 50-100 μl per well |
C. 對于懸浮細胞樣品：
離心收集細胞，用PBS、生理鹽水或無血清培養液洗一遍.加入適量裂解液,用槍吹打把細胞吹散。用手指輕彈或旋渦震蕩5-10 min以充分裂解細胞。充分裂解后應沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多，必需分裝然后再裂解。充分裂解后，10000-14000 g離心10 min，取上清，即可進行后續操作。
D. 對于組織樣品：
1) 手術切除的組織塊迅速置于預冷的生理鹽水中，漂洗數次，以清潔表面的血跡，將組織稱量后切成幾個較小的組織塊放入組織勻漿器中。
2) 取適當量的RIPA裂解液混勻，在使用前數分鐘內加入PMSF，使PMSF的zui終濃度為1 mM。
3) 按組織凈重（g）：裂解液(ml)=1：10的比例，加入相應體積的裂解液進行勻漿(如果裂解不充分可以適當添加更多的裂解液,，如果需要高濃度的蛋白樣品, 可以適當減少裂解液的用量) 。
4) 用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。
5) 充分裂解后,10000-14000 g離心3- 5 min，取上清，即可進行后續作。
5. 注意事項：
1) 抽提蛋白的所有步驟都需在冰上或4℃進行。建議將樣品分裝成合適的量，然后冷凍干燥或直接以液體狀態置-20℃中保存，不要反復凍融。
2) 需自備PMSF。建議在臨用前數分鐘內加入PMSF，使PMSF的zui終濃度為1 mM。PMSF(WBR0114)可以向我公司訂購。
3) RIPA裂解液的裂解產物中經常會出現一小團透明膠狀物，屬正常現象。在不檢測和基因組DNA結合特別緊密的蛋白的情況下，可以直接離心取上清用于后續實驗；否則可以通過超聲處理打碎打散該透明膠狀物，隨后離心取上清用于后續實驗。
4）為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
*本試劑僅供實驗室研究使用
若有需求請在詢價詳細說明里面標注您的
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