Vydac反相分析柱 純化多肽柱 蛋白柱用于反相分析與純化多肽及蛋白分子的經典產品 

反相分析柱 純化多肽柱 蛋白柱反相分析及制備生物分子的Vydac經典反相色譜產品快速索引表

可向我們索取英文版和中文版的《反相HPLC 分析和純化多肽和蛋白手冊》，有大量實用性*的技術信息供科研和技術工作人員參考。

色譜柱的清潔與再生 

VYDAC®蛋白質/肽反相色譜柱可能會因為被吸附能力強的樣品成分污染而導致柱性能下降。如

果前面所給的建議方法不能解決問題，那么試試如下方法： 

1. 注射1％SDS溶液zui多達該色譜柱體積的12％（對于4.6mm×250mm規格色譜柱約為500µL）。然后用含有0.1％（v/v）TFA的5％到95％的乙腈進行20分鐘的梯度洗脫。 

2. 如果是脂類物質或疏水性*的小分子物質導致了柱性能的變化，我們建議您用數倍于柱

體積的溶劑按如下順序沖洗該色譜柱：乙腈（10個柱體積），二氯甲烷（10個柱體積），正己烷（10

個柱體積），二氯甲烷（10個柱體積），乙腈（10個柱體積）

 3. 如果色譜柱性能的損失源于蛋白質吸附，對于任何聚合式鍵合相我們建議可使用0.1N硝酸/異丙醇

（1：4）的混合液來沖洗該色譜柱。低流速（普通流速的20％）的隔夜沖洗是zui有效的。

注意：硝酸清洗  不建議用于238TP, 238MS和238EV的“單點式、單點式””鍵合鍵合反相色譜、反相色譜柱。

 4. 使用6M的鹽酸胍水溶液。先過濾胍溶液，然后與異丙醇1:1混合。注射5％柱體積（對于一個4.6×250mm的分析柱，注射200µL），然后運行異丙醇:水 1:1沖洗該柱。這樣能夠得到一個胍溶液組成的“塞流”，能夠打碎松脫柱內牢固附著的蛋白質物污染物。

 5. 合成肽：從固相樹脂上裂解下合成肽會產生具有高反應活性的碳正離子而需要用苯甲醚和

茴香硫醚來“打掃”清除。而這些清除正碳離子的反應產生大量的、可溶于有機溶劑的

芳香性化合物分子出現在“打掃”溶液中。用100％乙腈或者100％甲醇清洗色譜柱可能

無法將這些分子清洗干凈。又或者，有時，用這些有機溶劑清洗色譜柱可以除去一些這樣

的污染物，但是會產生蠟狀沉淀物，有時會被誤認為柱內的C18鍵合相流失。要進行清除：用異丙醇

0-100%進行梯度清洗大于10倍柱體積，在100％異丙醇處持續沖洗或直至基線平衡。在260nm

下檢測。用100％二氯甲烷沖洗至基線平衡。在使用前用異丙醇除去

二氯甲烷。這個方法在用于除去化學合成所引入的污染物方面*。

反相色譜分離肽或蛋白時，應參考被分析或被純化目標的疏水性大小及分子量大小來選擇合適的鍵和相。