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化工儀器網>產品展廳>試劑標物>行業專用試劑>生化與分子生物學用試劑> Ni-NTA-瓊脂糖 KIRGEN

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Ni-NTA-瓊脂糖 KIRGEN

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武漢艾瑞科生物科技有限公司致力于提供生物和化學領域實驗室科學研究或工業生產用的進口耗材、試劑、儀器等系列產品。我們于2011年11月正式成為KIRGEN耗材湖北總代理,全面負責KIRGEN耗材在湖北市場的銷售。我們經營的產品有:Kirgen實驗室耗材產品,Pall實驗室過濾及分離產品,Nunc細胞培養耗材產品,Amresco常規生化試劑產品,Fermentas分子生物學產品,Oxoid培養基產品,Eppendorf移液器產品,Gilson移液器產品,Biohit移液器產品等。客戶遍布高校、研究所、醫院、衛生防疫、商品檢驗檢疫、制藥公司、生物技術公司和食品工業等單位。我們堅信,經過我們的不懈努力,艾瑞科生物一定會成為Z受用戶喜愛的生物科技公司之一。
 

生物實驗耗材,試劑

產品名稱: Ni-NTA-瓊脂糖 KIRGEN
KG8222     Ni-NTA-瓊脂糖    25ml
KG8223     Ni-NTA-瓊脂糖    50ml
Ni-NTA-瓊脂糖 KIRGEN蛋白提純原理:NI-NTA主要用于帶His標簽蛋白的親和層析.
① Ni-NTA:瓊脂糖或者其他基質共價連接NTA基團,NTA基團與Ni形成四價螯合物,并留下Ni兩價用于與其他基團結合.同樣作用的還有IDA基團,但NTA相對比較耐還原劑,因此使用較多.
② 組氨酸(His)的R基上帶有1個咪唑基團,咪唑基團pKa值在6左右,在pH>7的條件下,咪唑基團帶負電,容易與Ni離子結合.
③ 因此通過Ni-NTA吸附住的蛋白可以使用咪唑、組氨酸、或者其他含N化合物進行競爭洗脫,也可以通過降低pH值使咪唑基團帶正電從而洗脫蛋白.
④ NI-NTA上的Ni可以通過EDTA進行螯合競爭洗脫下來.
⑤ 同樣的道理,其他過渡金屬離子如Cu2+、Co2+等也能起到和Ni一樣的作用,但是相比來說,Ni不容易引起蛋白變性.所以Ni柱較為常用.
⑥ 除了組氨酸外,還有一些氨基酸殘基如半胱氨酸等也能與金屬結合,但結合力比起組氨酸來說較弱.可以通過加入NaCl等消除這種吸附.

產品說明:鎳NTA親和層析介質,是由螯合劑(NTA)共價偶聯到Sepharose瓊脂糖介質(6%交聯度)上,再螯合Ni2+而成。該介質對6×His-tag蛋白具有顯著特異吸附能力,采用Sepharose瓊脂糖介質比Agarose瓊脂糖介質效果更好,顆粒粒度均勻,粒徑小,并且螯合鎳更穩定,能耐受更高的還原劑,物理和化學穩定性好,批次重復性好。已經螯合好鎳離子,可直接用于6×His-tag融合蛋白的純化。



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