Arc mRNA原位雜交試劑盒
參考價 | ¥ 19 |
訂貨量 | ≥1 |
- 公司名稱 華研科研產品供應網-主營ELISA試劑盒、標記抗體
- 品牌
- 型號
- 產地 TBD
- 廠商性質 生產廠家
- 更新時間 2016/11/29 9:21:17
- 訪問次數 549
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【中文名稱】:Arc mRNA原位雜交試劑盒
【英文名稱】:Arc mRNA FISH Kit
【規 格】:100T/盒
【主要用途】:科研檢測(僅用于科研實驗),不得用于臨床
【保 存】: 4°C保存一年
Arc mRNA原位雜交試劑盒原理:
FISH—Cellscience設計的原位雜交,用以顯示組織和細胞中mRNA的分布。探針的3,端標記地高辛,5’端標記熒光素。生物素標記的抗地高辛抗體可以與鏈霉親和素標記的過氧化物酶或堿性磷酸酶結合,作用于相應的顯色底物DAB或NBT/BCIP,顯色為棕黃色或藍紫色,探針5,端標記的熒光素,可以在熒光顯微鏡492-549nm時發出黃綠色熒光來顯示被檢測mRNA之信號。此方法的靈敏度可基本上替代放射同位素標記的探針且具有低背景和操作簡便的優點。也可以用于Northern和Southern的檢測以及原位PCR 。
原位雜交的注意事項:
原位雜交成套試劑盒,由于采用高效標記的探針和敏感性加強型原位雜交檢測試劑盒;使得原位雜交實驗的成功率大大提高,操作也更簡便。但仍有一些問題是引起注意的;
1、有條件應盡可能用新鮮標本,并及時進行固定。固定液為4%多聚甲醛(0.1MPBS,PH7.0-7.6)含0.1%DEPC。因為mRNA類基因容易降解。
2、標本的消化對原位雜交比較重要,適當的消化將使靶基因充分暴露,增加探針的接觸性。但過度的消化將使標本明顯減薄乃至消失。不同的標本對消化的敏感性不同。常用的消化酶有蛋白酶K和胃蛋白酶。大量標本實驗前,應仔細摸索*的消化條件。蛋白酶K的消化條件為10ug/mL(0.1M TBS,PH7.2-7.6),37℃消化1-5分鐘。
3、雜交后的洗滌對信號/背景/強度有密切關系,洗滌時間越短,信號越強,背景也越高;洗滌時間超長,信號越低。適當的洗滌時間會獲得理想的信號強度和可以忽略的背景染色。
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