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小鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體γ( PPAR-γ)elisa試劑盒

具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 公司名稱 上海橋杜商貿(mào)有限公司
  • 品牌
  • 型號
  • 產(chǎn)地 國產(chǎn)/進(jìn)口
  • 廠商性質(zhì) 代理商
  • 更新時間 2016/8/13 22:38:15
  • 訪問次數(shù) 263

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            上海橋杜生物科技有限公司專業(yè)提供各類進(jìn)口,國產(chǎn)ELISA試劑盒、細(xì)胞株、抗體、耗材、培養(yǎng)基等產(chǎn)品,并提供實(shí)驗外包,技術(shù)指導(dǎo),操作指導(dǎo),代做實(shí)驗,代做課題等技術(shù)服務(wù)。公司擁有合理的價格和優(yōu)良的服務(wù),能夠及時解決和滿足客戶各方面的需求,與國內(nèi)多家企業(yè)建立了良好的*合作關(guān)系,在市場上樹立了良好的信譽(yù)和形象。我們的目標(biāo)是為生命科學(xué)相關(guān)研究提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品、貼心的服務(wù)與一站式的解決方案。
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中文名稱:小鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體γ( PPAR-γ)elisa試劑盒

英文名稱:Mouse Peroxisome Proliferator-activated receptor γ,PPAR-γ ELISA Kit

上海橋杜——專業(yè)的elisa試劑盒供應(yīng)商,本公司所有產(chǎn)品僅用于科研,不得用于臨床,詳細(xì)信息請在線咨詢我公司銷售人員!

小鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體γ( PPAR-γ)elisa試劑盒用途:

本試劑盒僅供科研使用,定量檢測細(xì)胞液、體液、組織、血清、血漿等標(biāo)本中小鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體γ( PPAR-γ) 含量。

 

小鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體γ( PPAR-γ)elisa試劑盒原理:

采用雙抗體夾心法測定小鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體γ( PPAR-γ) 平。用純化的小鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體γ( PPAR-γ)抗體包被微孔板,制成固相載體,實(shí)驗時依次在微孔板中加入樣本及標(biāo)準(zhǔn)品,并加入HRP標(biāo)記的抗體,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,反復(fù)洗滌后加底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化為藍(lán)色,再用硫酸終止反應(yīng),轉(zhuǎn)變成黃色。顏色的深淺和樣品中的小鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體γ( PPAR-γ)含量呈正相關(guān)。采用酶標(biāo)儀在450nm波長測定吸光度(OD值),根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線,計算測試樣品中小鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體γ( PPAR-γ)濃度。        

 

小鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體γ( PPAR-γ) 試劑盒組成及保存:

 

試劑盒組成
48孔配置
96孔配置
保存
說明書
1份
1份
封板膜
2片(48)
2片(96)
密封袋
1個
1個
酶標(biāo)包被板
1×48
1×96
標(biāo)準(zhǔn)品
0.5ml×1瓶
0.5ml×1瓶
2-8℃保存
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
1.5ml×1瓶
1.5ml×1瓶
2-8℃保存
酶標(biāo)試劑
3 ml×1瓶
6ml×1瓶
2-8℃保存
樣品稀釋液
3 ml×1瓶
6ml×1瓶
2-8℃保存
顯色劑A液
3 ml×1瓶
6ml×1瓶
2-8℃保存
顯色劑B液
3 ml×1瓶
6ml×1瓶
2-8℃保存
終止液
3 ml×1瓶
6ml×1瓶
2-8℃保存
濃縮洗滌液
(20ml×20倍)×1瓶
(20ml×30倍)×1瓶
2-8℃保存

 

小鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體γ( PPAR-γ) 試劑盒 樣本處理及要求:

 1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。

仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。

2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。

3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。

4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBSPH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。

5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBSPH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8的溫度。加入一定量的PBSPH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。

6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗。若不能馬上進(jìn)行試驗,可將標(biāo)本放于-20保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.

7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

 

小鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體γ( PPAR-γ)elisa試劑盒操作步驟:

1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在*、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在*、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從*孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。

2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

3. 溫育:用封板膜封板后置37溫育30分鐘。

4. 配液:將3048T20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水3048T20倍)倍稀釋后備用。

5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。 6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。

7. 溫育:操作同3

8. 洗滌:操作同5

9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37避光顯色15分鐘.

10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。

11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

 

小鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體γ( PPAR-γ)elisa試劑盒數(shù)據(jù)計算:

以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,即為樣品的實(shí)際濃度。

 

小鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體γ( PPAR-γ)elisa試劑盒保存條件及有效期:

1.試劑盒保存:2-8℃

2.有效期:6個月

 

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